Farklı memeli sütlerinden laktoperoksidaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu, suda çözünen organik çözücülerdeki davranışı, sekonder ve tersiyer hidroperoksitleri indirgeme kinetiğinin incelenmesi
Purification and characterization of lactoperoxidase from different mammalians milk: Investigation of LPO behavior in water-misciple solvents and reduction kinetics of seconder and tertiary hydroperoxides
- Tez No: 121476
- Danışmanlar: PROF. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU, YRD. DOÇ. DR. HAMDULLAH KILIÇ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Laktoperoksidaz, kinetik, inhibisyon, organik çözücü, organik peroksit
- Yıl: 2002
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 170
Özet
ÖZET Doktora Tezi FARKLI MEMELÎ SÜTLERİNDEN LAKTOPEROKSİDAZ ENZÎMÎNİN SAFLAŞTIRILMASI, KARAKTERİZASYONU, SUDA ÇÖZÜNEN ORGANİK ÇÖZÜCÜLERDEKÎ DAVRANIŞI, SEKONDER VE TERSİYER HİDROPEROKSİTLERİ İNDİRGEME KİNETİĞİNİN İNCELENMESİ Halil İbrahim HACIBEYOĞLU Atatürk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Kimya Anabilim Dalı Danışman: Prof. Dr. Ö. İrfan KÜFREVİOĞLU Ortak Yönetici: Yrd. Doç. Dr. Hamdullah KILIÇ Bu çalışmada laktoperoksidaz enzimi (LPO)(E.C. 1.1 1.1.7) sağlıklı sığır, manda ve koyun sütlerinden biyokimyasal ve kromatografik yöntemler kullanılarak saflaştırılmış ve bazı kinetik özellikleri araştırılmıştır. Laktoperoksidaz enziminin belirtilen memeli sütlerinden saflaştırılması amacıyla, Amberlite CG-50 H+ reçinesiyle kısmı saflaştırma yapılarak, CM- Sephadex C-50 iyon değişim kromatografisi, %0-90 amonyum sülfat çöktürmesi, Sephadex G- 100 jel filtrasyon kromatografisi, diyaliz ve enzim saflığını kontrol etmek amacıyla SDS- PAGE elektroforezi teknikleri kullanıldı. Bir litre sığır sütünden spesifik aktivitesi 22.72 EÜ/mg protein olan toplam 6.6 mg LPO, manda sütünden spesifik aktivitesi 23,1 EÜ/mg protein olan toplam 7,54 mg LPO ve koyun sütünden spesifik aktivitesi 3,36 EÜ/mg protein olan toplam 5,74 mg LPO elde edildi. Bu üç enzim için optimum pH, optimum sıcaklık ve ABTS substratı için Km ve VMax değerleri belirlendi. Suda çözünebilen organik çözücülerin enzim üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. ABTS ve H202 substratları kullanılarak yapılan çalışmalarda kullanılan çözücülerin tamamının enzimi inhibe ettiği ve inhibisyon tipinin yarışmalı inhibisyon olduğu bulundu. Kullanılan çözücüler içinde, metanol ve etanol'ün enzimi en az inhibe ettiği bulundu. Organik peroksitlerin enzim üzerindeki etkilerini incelenmek üzere organik peroksitler sentezlendi ve ABTS substratı için KM ve VMax değerleri bulundu. LPO enziminin sekonder ve tersiyer organik peroksitlere ilgisinin olduğu, fakat bu ilginin H202 ile karşılaştırıldığında çok düşük olduğu bulundu. 2002, 149 sayfa
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Ph.D.Thesis PURIFICATION AND CHARECTERIZATION OF LACTOPEROXIDASE FROM DIFFERENT MAMMALIANS MILK: INVESTIGATION OF LPO BEHAVIOR IN WATER- MISCIBLE SOLVENTS AND REDUCTION KINETICS OF SECONDER AND TERTIARY HYDROPEROXIDASES Halil Ibrahim HACIBEYO?LU Atatürk University Graduate School of Natural and Applied Sciences Department of Chemistry Supervisor: Prof.Dr.Ö.İrfan KÜFREVÎO?LU Co-Advisor: Yrd. Doç. Dr. Hamdullah KILIÇ Lactoperoxidase was purified from healthy mammalian animals milk (bovine, water buffalo, sheep) by using biochemical and chromatographic techniques and some kinetics properties have been investigated. For the purification of LPO milk was first treated with Amberlite CG- 50 H1" resins and later ammonium sulphate precipitation. CM-Sephadex C-50 ion exchange chromatography, Sephadex G-100 gel filtration chromatography and dialyze were employed, respectively. Enzyme purity determined by SDS-PAGE electrophoresis. 6.6 mg LPO from bovine milk (specific activity 22.72 EU/mg protein), 7.54 mg LPO from water buffalo milk (specific activity 23;10 EU/mg protein ), 5.74 mg LPO from sheep milk (specific activity 3.36 EU/mg protein) per liter were obtained. For the obtained enzyme optimum pH and temperature were determined and KM and VMax values were measured in the presence of ABTS and H202 as substrates. Behaviour of LPO in water-miscible solvents has been investigated and water- miscible solvents have been found to inhibit LPO. Inhibition type was found to be competitive. Among the water-miscible solvents, methanol and ethanol were less effective than others. Some organic peroxides were synthesed and KM and Vmax values were determined in the presence of ABTS. LPO activity on organic peroxides was found to be very low when compared with H2 02. 2002, 149 pages Keywords; Lactoperoxidase, kinetics, inhibition, organic solvents, organic peroxides. 11
Benzer Tezler
- Sülfanilamid türevleri kullanılarak memeli sütlerinden laktoperoksidaz enziminin saflaştırılması
Purification of the lactoperoxidase enzyme with using sulfanilamide derivatives from mammalian milk
ZEYNEP KÖKSAL
- BAMLET proteini üretimi ve koaservasyon yöntemiyle stabilitesinin arttırılması
Production of BAMLET protein and increase stability with coacervation
REYHAN KOYUNCU
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERAAT ÖZÇELİK
- Bazı memeli hayvan türlerinden alınan süt örneklerinde HPCL yöntemiyle karşılaştırılmalı vıtamın E mıktar tayını
Comparative vitamin E quantity determination by HPLC method in milk samples taken from some mammalian species
ELÇİN DİKİLİKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiFarmakognozi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUBA MERT GÖNENÇ
- Serum infüzyon setlerinden sızan kimyasalların sitotoksik ve genotoksik etkilerinin araştırılması
Investigation of the cytotoxic and genotoxic effects of leaking chemicals from serum infusion sets
AYŞEGÜL ÖZLÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
BiyoteknolojiBursa Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ GÖKÇE TANER
- IgE aracılı inek sütü alerjisi olan çocukların klinik özellikleri ve diğer memeli (keçi, koyun, manda ve deve) sütlerine duyarlılıklarının değerlendirilmesi
Clinical features of children with IgE mediated cow milk allergy and evaluation of sensitivity to other mammalian milk (goat, sheep, buffalo and camel)
DİCLE AYDEMİR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2019
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıKaradeniz Teknik ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FAZIL ORHAN