Geri Dön

Farklı memeli sütlerinden laktoperoksidaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu, suda çözünen organik çözücülerdeki davranışı, sekonder ve tersiyer hidroperoksitleri indirgeme kinetiğinin incelenmesi

Purification and characterization of lactoperoxidase from different mammalians milk: Investigation of LPO behavior in water-misciple solvents and reduction kinetics of seconder and tertiary hydroperoxides

  1. Tez No: 121476
  2. Yazar: HALİL İBRAHİM HACIBEYOĞLU
  3. Danışmanlar: PROF. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU, YRD. DOÇ. DR. HAMDULLAH KILIÇ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Laktoperoksidaz, kinetik, inhibisyon, organik çözücü, organik peroksit
  7. Yıl: 2002
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 170

Özet

ÖZET Doktora Tezi FARKLI MEMELÎ SÜTLERİNDEN LAKTOPEROKSİDAZ ENZÎMÎNİN SAFLAŞTIRILMASI, KARAKTERİZASYONU, SUDA ÇÖZÜNEN ORGANİK ÇÖZÜCÜLERDEKÎ DAVRANIŞI, SEKONDER VE TERSİYER HİDROPEROKSİTLERİ İNDİRGEME KİNETİĞİNİN İNCELENMESİ Halil İbrahim HACIBEYOĞLU Atatürk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Kimya Anabilim Dalı Danışman: Prof. Dr. Ö. İrfan KÜFREVİOĞLU Ortak Yönetici: Yrd. Doç. Dr. Hamdullah KILIÇ Bu çalışmada laktoperoksidaz enzimi (LPO)(E.C. 1.1 1.1.7) sağlıklı sığır, manda ve koyun sütlerinden biyokimyasal ve kromatografik yöntemler kullanılarak saflaştırılmış ve bazı kinetik özellikleri araştırılmıştır. Laktoperoksidaz enziminin belirtilen memeli sütlerinden saflaştırılması amacıyla, Amberlite CG-50 H+ reçinesiyle kısmı saflaştırma yapılarak, CM- Sephadex C-50 iyon değişim kromatografisi, %0-90 amonyum sülfat çöktürmesi, Sephadex G- 100 jel filtrasyon kromatografisi, diyaliz ve enzim saflığını kontrol etmek amacıyla SDS- PAGE elektroforezi teknikleri kullanıldı. Bir litre sığır sütünden spesifik aktivitesi 22.72 EÜ/mg protein olan toplam 6.6 mg LPO, manda sütünden spesifik aktivitesi 23,1 EÜ/mg protein olan toplam 7,54 mg LPO ve koyun sütünden spesifik aktivitesi 3,36 EÜ/mg protein olan toplam 5,74 mg LPO elde edildi. Bu üç enzim için optimum pH, optimum sıcaklık ve ABTS substratı için Km ve VMax değerleri belirlendi. Suda çözünebilen organik çözücülerin enzim üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. ABTS ve H202 substratları kullanılarak yapılan çalışmalarda kullanılan çözücülerin tamamının enzimi inhibe ettiği ve inhibisyon tipinin yarışmalı inhibisyon olduğu bulundu. Kullanılan çözücüler içinde, metanol ve etanol'ün enzimi en az inhibe ettiği bulundu. Organik peroksitlerin enzim üzerindeki etkilerini incelenmek üzere organik peroksitler sentezlendi ve ABTS substratı için KM ve VMax değerleri bulundu. LPO enziminin sekonder ve tersiyer organik peroksitlere ilgisinin olduğu, fakat bu ilginin H202 ile karşılaştırıldığında çok düşük olduğu bulundu. 2002, 149 sayfa

Özet (Çeviri)

ABSTRACT Ph.D.Thesis PURIFICATION AND CHARECTERIZATION OF LACTOPEROXIDASE FROM DIFFERENT MAMMALIANS MILK: INVESTIGATION OF LPO BEHAVIOR IN WATER- MISCIBLE SOLVENTS AND REDUCTION KINETICS OF SECONDER AND TERTIARY HYDROPEROXIDASES Halil Ibrahim HACIBEYO?LU Atatürk University Graduate School of Natural and Applied Sciences Department of Chemistry Supervisor: Prof.Dr.Ö.İrfan KÜFREVÎO?LU Co-Advisor: Yrd. Doç. Dr. Hamdullah KILIÇ Lactoperoxidase was purified from healthy mammalian animals milk (bovine, water buffalo, sheep) by using biochemical and chromatographic techniques and some kinetics properties have been investigated. For the purification of LPO milk was first treated with Amberlite CG- 50 H1" resins and later ammonium sulphate precipitation. CM-Sephadex C-50 ion exchange chromatography, Sephadex G-100 gel filtration chromatography and dialyze were employed, respectively. Enzyme purity determined by SDS-PAGE electrophoresis. 6.6 mg LPO from bovine milk (specific activity 22.72 EU/mg protein), 7.54 mg LPO from water buffalo milk (specific activity 23;10 EU/mg protein ), 5.74 mg LPO from sheep milk (specific activity 3.36 EU/mg protein) per liter were obtained. For the obtained enzyme optimum pH and temperature were determined and KM and VMax values were measured in the presence of ABTS and H202 as substrates. Behaviour of LPO in water-miscible solvents has been investigated and water- miscible solvents have been found to inhibit LPO. Inhibition type was found to be competitive. Among the water-miscible solvents, methanol and ethanol were less effective than others. Some organic peroxides were synthesed and KM and Vmax values were determined in the presence of ABTS. LPO activity on organic peroxides was found to be very low when compared with H2 02. 2002, 149 pages Keywords; Lactoperoxidase, kinetics, inhibition, organic solvents, organic peroxides. 11

Benzer Tezler

  1. Sülfanilamid türevleri kullanılarak memeli sütlerinden laktoperoksidaz enziminin saflaştırılması

    Purification of the lactoperoxidase enzyme with using sulfanilamide derivatives from mammalian milk

    ZEYNEP KÖKSAL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR

  2. BAMLET proteini üretimi ve koaservasyon yöntemiyle stabilitesinin arttırılması

    Production of BAMLET protein and increase stability with coacervation

    REYHAN KOYUNCU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BERAAT ÖZÇELİK

  3. Bazı memeli hayvan türlerinden alınan süt örneklerinde HPCL yöntemiyle karşılaştırılmalı vıtamın E mıktar tayını

    Comparative vitamin E quantity determination by HPLC method in milk samples taken from some mammalian species

    ELÇİN DİKİLİKAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Farmakognozi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TUBA MERT GÖNENÇ

  4. Serum infüzyon setlerinden sızan kimyasalların sitotoksik ve genotoksik etkilerinin araştırılması

    Investigation of the cytotoxic and genotoxic effects of leaking chemicals from serum infusion sets

    AYŞEGÜL ÖZLÜ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    BiyoteknolojiBursa Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ GÖKÇE TANER

  5. IgE aracılı inek sütü alerjisi olan çocukların klinik özellikleri ve diğer memeli (keçi, koyun, manda ve deve) sütlerine duyarlılıklarının değerlendirilmesi

    Clinical features of children with IgE mediated cow milk allergy and evaluation of sensitivity to other mammalian milk (goat, sheep, buffalo and camel)

    DİCLE AYDEMİR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FAZIL ORHAN