Geri Dön

BALB/c farelerde D-Galaktozamin/tümör nekroz faktör-alfa ile oluşturulan karaciğer hasarında apoptoz ve katepsin B'nin rolü

The role of cathepsin B and apopsin on D-Galactosamine/tumor necrosis factor-alpha-induced liver injury in BALP/c mice

  1. Tez No: 150813
  2. Yazar: SELDA GEZGİNCİ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. ŞEHNAZ BOLKENT
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2004
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 115

Özet

Karaciğer hasarı oluşturmak amacıyla farelere farklı dozlarda D-galaktozamin ve tümör nekroz faktör-alfa (D-GalN/TNF-a) verilmesi karaciğer hastalıklarının patogenezini ve tedavisini incelemek amacıyla yaygın olarak kullanılan deneysel bir metodtur. D- Galaktozamin/TümÖr Nekroz Faktör-a ikilisinin uygulanması sonucu baskın olarak apoptotik hücre ölümü ile karakterize edilen yaygın karaciğer hasarı oluştuğu bilinmektedir. Katepsin B, D-GalN/TNF-a birlikteliği ile oluşan apoptotik hücre ölümü mekanizmasında önemli rol oynayabileceği düşünülen bir sistein proteinazdır. Benziloksikarbonil-L-Fenilalanin-L-Alanin-Florometilketon (Z-FA-FMK) ise, katepsin B ile ilgili araştırmalarda kullanılan bir katepsin B inhibitörüdür. Bu çalışmanın amacı, farelerde D-GalN/TNF-a ile oluşturulan karaciğer hasarının, apoptotik ölümün ve hücre çoğalmasının hücresel mekanizmasında katepsin B'nin rolünün histolojik, immünohistokimyasal ve biyokimyasal olarak araştırılmasıdır. Çalışmada kullanılan BALB/c erkek fareler dört gruba ayrıldı. Birinci grup fizyolojik tuzlu su verilen bireylerden, ikinci grup sadece Z-FA-FMK verilen kontrol bireylerden, üçüncü grup D-GalN/TNF-a verilen bireylerden ve dördüncü grup hem D-GalN/TNF-a hem de Z-FA-FMK verilen farelerden oluşturuldu. 8 mg/kg Z-FA-FMK intravenöz olarak uygulandıktan 1 saat sonra, D-GaIN (700 mg/kg) ve TNF-a (15 ug/kg)'mn intraperitonal olarak enjekte edilmesi ile karaciğer hasarı oluşturuldu. Kesitler, Hematoksilin-Eosin ve Masson'un üçlü boyası ile boyandı. İn situ DNA uç işaretlemesi (TÜNEL) yöntemi apoptotik hücrelerin saptanması için, Streptavidin-Biyotin- Peroksidaz tekniği ise immünohistokimyasal metod olarak kaspaz-3 ve bölünen hücrelerin nukleus antijeni (PCNA) nin gösterilmesi için, parafin kesitlere uygulandı. Homojenize edilen karaciğer dokusu örneklerinde, glutatyon, lipid peoksidasyonu ve DNA düzeyleri biyokimyasal olarak tayin edildi. D-Galaktozamin/Tümör Nekroz Faktör-a verilen deney grubu bireylerinde, karaciğer dokusunda dejeneratif değişiklikler, TÜNEL ve kaspaz-3 pozitif hepatosit sayısında artma, PCNA pozitif hepatosit sayısında azalma, lipid peroksidasyon düzeyinde artma, glutatyon ve DNA düzeyinde azalma gözlendi. Oysa, D-GalN/TNF-a ve Z-FA-FMK verilen deney grubunun bireylerinde karaciğer dokusundaki histolojik hasarda azalma, TÜNEL ve kaspaz-3 pozitif hepatosit sayısında azalma, PCNA pozitif hepatosit sayısında artma, lipid peroksidasyon düzeyinde azalma, glutatyon ve DNA düzeyinde artma gözlendi. Yapılan mikroskobik ve biyokimyasal değerlendirmelerin sonuçlan, katepsin B'nin D- GaIN/TNF-a ile oluşturulan karaciğer hasarında ve TNF-a aracılı apoptotozda önemli bir rol oynadığını göstermiştir.

Özet (Çeviri)

Administration of D-galactosamine and tumor necrosis factor-alpha (D-GaIN/TNF-a) in different doses for liver injury to mice, is a prevelant experimental method, which is used to examine the pathogenesis and treatment of liver diseases. It is well known that inducement of a massive liver damage, which is characterised by a dominant apoptotic cell death, by administration of D-GaIN/TNF-a combination, is posssible. Cathepsin B is a systeine proteinase, considered to have an important role on the apoptotic cell death mechanism, which is activated by D-GaIN/TNF-a combination. Z-Phe-Ala-FMK is a cathepsin B inhibitor used in researches on cathepsin B. The aim of this study is to investigate the role of cathepsin B on the cellular mechanism of apoptotic cell death, cell proliferation and the liver damage induced by D-GaIN/TNF-a combination in mice histologically, immunohistochemically and biochemically. In this study, the BALB/c male mice were divided into four groups. The first group were given only physiologic saline, the second group were administred only Z-Phe- Ala.FMK, the third group were received D-GaIN/TNF-a, and the fourth group were given both D-GaIN/TNF-a and Z-Phe-Ala-FMK. After 1 hour administration of 8 mg/kg Z-Phe-Ala-FMK by intravenous enjection, the liver damage was induced by the intraperitoneal injection of D-GaIN (700 mg/kg) and TNF-a (15 ng/kg). The sections were stained by Hematoxyline-Eosin and Masson's triple dyes. The in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling (TUNEL) method was applied to paraffine sections in order to determine the apoptotic cells. The Streptavidin- Biotin-Peroxidase technique was applied to the paraffine sections as the immunohistochemical method for caspase-3 and the proliferating cell nucleus antigen (PCNA). The glutathione, lipid peroxide and DNA levels were determined in the homogenized liver tissue samples, biochemically. In the experimental group given D-GaIN/TNF-a, the degenerative changes in the liver tissue, an increase in the number of both TUNEL and caspase-3 positive hepatocytes, a decrease in the number of PCNA positive hepatocyte, an increase in the lipid peroxidation levels, a decrease in the glutathione and the DNA levels were observed. In contrast, it was seen in the experimental group given D-GaIN/TNF-a and Z-Phe-Ala- FMK that, a decrease in the histological damage on the liver tissue, a decrease in the number of both TUNEL and caspase-3 positive hepatocytes, an increase in the number of PCNA positive hepatocytes, a decrease in the lipid peroxidation levels, an increase in the glutathione and the DNA levels were determined. As a result, the microscopic and biochemical evaluations indicate that cathepsin B has an important role on the TNF-a mediated apoptosis, cell proliferation and liver injury induced by D-GaIN/TNF-a.

Benzer Tezler

  1. Balb/C farelerde D-galaktozamin/tümör nekroz faktör alfa ile oluşturulan karaciğer hasarında silmarin ve nanoformlarının, DNA, apoptosis, nekrosis ve ince yapı üzerindeki etkileri

    The effects of silmarin and its nano formulation on dna, apoptosis, necrosis and fine structure on experimentally caused D-galactosamine/tumor necrosis factor alpha-induced liver injury in balb/C mice

    MUSTAFA CENGİZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyolojiAnadolu Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HATİCE MEHTAP KUTLU

  2. Parsiyel hepatektomi ve sirotik karaciğer modellerinde HGF ve VEGF düzeylerindeki değişiklikler

    Başlık çevirisi yok

    NİLGÜN KAŞO TEKKEŞİN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    BiyokimyaMarmara Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. YAVUZ TAGA

  3. Balb/c farelerde TNF-alfa/aktinomisin D ile oluşan ince bağırsak hasarında GLP-2'nin biyolojik rolü

    Biological role of GLP-2 on TNF-alpha/actinomycin D-induced intestinal injury in balb/c mice

    BAHRİYE PELİN ARDA PİRİNÇÇİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    Biyokimyaİstanbul Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞEHNAZ BOLKENT

  4. Farelerde oluşturulan deneysel nöropatik ağrıda pregabalin ve agmatin etkilerinin karşılaştırılması

    Comparison of pregabalin and agmatine effects on experimental neuropathic pain in mice

    CEREN AYGÜN MUÇUOĞLU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Anestezi ve ReanimasyonDokuz Eylül Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE KARCI

  5. D-erythro-MAPP ve nanopartikül formülasyonunun meme kanseri hücrelerinde apoptoz ile ilişkili ölüm yolaklarının in-vitro ve in-vivo olarak araştırılması

    In-vitro and in-vivo investigation of D-erythro-MAPP and nanoparticle formulation of apoptosis-related death path in breast cancer cells

    HÜSEYİN İZGÖRDÜ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiEskişehir Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HATİCE MEHTAP KUTLU

    DOÇ. DR. SALİH GENCER