Sorbitol dehidrogenaz aktivitesi üzerine çalışmalar
Studies on sorbitol dehydrogenase activity
- Tez No: 164625
- Danışmanlar: PROF.DR. İNCİ ÖZER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Sorbitol dehidrogenaz, tavuk karaciğeri, tepkime-zaman eğri analizleri, yatışkın durum kinetik parametreleri, Sorbitol dehydrogenase, chicken liver, progress curve analysis, steady-state parameters
- Yıl: 2005
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 36
Özet
Tavuk karaciğeri sorbitol dehidrogenazı (SDH) iyon değiştirici kromatografisi kullanılarak %50 verimle 10 kez saflaştınldı. Spesifik aktivitesi 0.68 U/mg protein olan preparat 2 mM 6-aminokaproik asit ve luM pepstatin A içeren 50 mM tris-HCl tamponunda, -20°C'de saklandı. Bu koşullarda bir aylık bir süre içinde aktivitenin %75 düzeyinde korunduğu gözlendi. Enzimin yatışkın durum parametreleri 25°C'de 50 mM MOPS (pH 8) tamponunda spektrofotometrik olarak belirlendi. Sorbitol -> fruktoz yönündeki analizler, [NAD+]0 = 0.1-0.4 mM ve [sorbitols = 1.25-10 mM başlangıç koşullarında KNad+, Kjnad+ ve Ksorbitoi sırasıyla 210 + 62 uM, 220 ± 69 uM ve 3.2 ± 0.54 mM olarak bulundu. Fruktoz - > sorbitol yönünde, [NAD+]0 = 0.2 mM ve [fruktoz]0 = 66.7-267 mM koşulunda NADH tüketim eğrileri bütün olarak değerlendirildi. Eğrilerin Lineweaver-Burk formatına transformasyonu sonucunda Knadh, Kjnadh ve Kfruktoz sırasıyla 240 ± 58 uM, 10 ± 2.8 uM ve 1000 ± 140 uM olarak bulundu. Tavuk karaciğer SDH 'mm, diğer türlerde olduğu gibi sıralı ardışık ikili düzene göre (sequential ordered bi-bi) davrandığı görüldü. Kinetik parametreler insan kaynaklı SDH'm parametreleriyle uyumluydu. Türler arası benzerlik ve farklılıklar deneysel koşullar ve protein yapısı bazında tartışıldı.
Özet (Çeviri)
Chicken liver sorbitol dehydrogenase (SDH) was purified ca. 10-fold with %50 yield, using ammonium sulfate fractionation and ion exchange chromatography (Polybuffer Exchanger 94 column). The preparation had a specific activity of 0.68 U/mg protein and retained %75 of the activity for one month, when stored at -20°C in 50 mM tris-HCl containing 2 mM 6- aminocaproic acid and luM pepstatin A. The steady-state parameters of the enzyme were determined spectrophotometrically at 25°C in 50 mM MOPS (pH 8). Analyses in the sorbitol -» fructose direction were made at [NAD+]0 = 0.2 mM and [fructose]0 = 66,7-267 mM, by determining the initial rate of NADH formation. Knad+, Kjnad+ and Ksorbitoi were found to be 210 ± 62 uM, 220 ± 69 uM and 3.2 ± 0.54 mM, respectively. In the fructose -» sorbitol direction progress curves for NADH consumption were recorded at [NADH]0 = 0.2 and [fructose]0 = 66.7-267 mM. The curves were transformed to Linewever-Burk format and analysed. Knadh, Kjnadh and Kfructose were found to be 240 ± 58 uM, 10 ± 2.8 uM and 1000 ± 140 uM respectively. As with enzyme from other species, chicken liver SDH was found to act by a sequential ordered bi-bi mechanism. The kinetic parameters were similar to those of human SDH. Interspecific similarities and differences were discussed in terms of experimental factors and protein structure.
Benzer Tezler
- Tavuk karaciğerinden sorbitol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması ve bazı ağır metallerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification of sorbitol dehydrogenase from chicken liver, and investigation effects of some heavy metal on the enzyme activity
MUSA AKKUŞ
- Koyun beyninden sorbitol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification, characterization of sorbitol dehydrogenase from sheep brain, and investigation effects of some active substances on the enzyme activity
BEDİA ÖZALTIN
- Bazı açil tiyoüre türevlerinin diyabet ile ilişkili enzimler üzerine etkisinin incelenmesi
Investigation the effect of some acylthiourea derivatives on diabetes-associated enzymes
BÜKRE YAREN ERTANO
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyokimyaAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ORHAN ERDOĞAN
DOÇ. DR. YELİZ DEMİR
- Effects of acrylamide and resveratrol on rabbit liver and kidney antioxidant enzymes
Akrilamid ve resveratrolün tavşan karaciğer ve böbrek antioksidan enzimleri üzerine etkisi
ÇİĞDEM KALIN
Yüksek Lisans
İngilizce
2009
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ
YRD. DOÇ. DR. TÜLİN YANIK
- Pichia pastoris mayasında alkol dehidrogenaz (ADH3) promotoru ile rekombinant fitaz enzimi üretimi
Production of recombinant phytase enzyme with alcohol dehydrogenase (ADH3) promoter in Pichia pastoris
MERVE HADİMİOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Gıda MühendisliğiAkdeniz ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET İNAN