Farklı serum katkılarının kedi oositlerinin in vitro olgunlaşmalarına etkileri
Effects of different serum supplementation on in vitro maturation of cat oocytes
- Tez No: 165771
- Danışmanlar: PROF.DR. SEMA BİRLER
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Kedi, oosit, in vitro olgunlaşma, protein katkısı 43, Cat, oocyte, in vitro maturation, protein supplementation 45
- Yıl: 2005
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
6. ÖZET Farklı serum katkılarının kedi oositlerinin in vitro olgunlaşmalarına etkilerini belirlemek amacıyla yapılan çalışma, kısırlaştırma operasyonunu takiben elde edilen ovaryumlardan kazanılan oositlerin 48 saat kültüre edilmelerini kapsamaktadır. Inkubasyon peryodu tamamlanan oositler, olgunlaşma kriterlerinin incelenebilmesi amacıyla fikse edilerek boyanmış ve gelişim dönemleri değerlendirilmiştir. Araştırmada 8'i ev ortamında, 32'si sokak ortamında beslenen toplam 40 adet kedi kullanılmıştır. Genel anestezi altında ovario-histerektomi uygulanan kedilerden alınan ovaryumlar 25-30 °C deki PBS içerisinde laboratuara getirilmişlerdir. Çalışmada elde edilen oositlerden homojen vitellüs ve kompakt kumulus hücrelerine sahip olanlar seçilerek, farklı protein katkıları bulunan 4 olgunlaşma grubuna rastgele ayrılmış ve 38°C ısı, %5 CO2 içeren ortamda 48 saat kültüre bırakılmıştır. I.Grup (FCS Grubu): Ham's F-10 + FSH (1 ul/mg) + LH ( 1ul/mg) + FCS (%5) II.Grup (BSA Grubu): Ham's F-10 + FSH + LH + BSA (3 mg/ml) III.Grup (ÖKS Grubu): Ham's F-10 + FSH + LH + Östrustaki Kedi Serumu (%5). IV.Grup (Kontrol Grubu): Ham's F-10 + FSH + LH Çalışmanın III. grubunda kullanılacak olan ÖKS için ev ortamında beslenen 4 adet kedinin östrusları PMSG hormonu ile uyarılarak, kızgınlık semptomları göstermesi sağlanmıştır. Semptom gösteren kedilerin V.jugularilerinden alınan 6-7 cc.lik kan örnekleri 4000-5000 devirde, 5 dakika santrifüje edilmiş, elde edilen serum -20 °C'de dondurularak kullanıma kadar saklanmıştır. Kültür süresini tamamlayan oositler, kumulus hücreleri %0.1'lik hyaluronidaz enzimi içeren PBS solüsyonunda pastör pipeti ile pipetlenerek mekanik olarak uzaklaştırıldı ve % 0.7 KCI solüsyonunda 2-3 dakika bekletildikten sonra lam-lamel arasına alınarak, 1:3 asetik asitetanol solüsyonu içerisinde 24 saat fikse edildi. Fiksasyon sonunda %2 lik aseto-orsein ile boyanan oositler, faz-kontrast mikroskopta, x600 büyütmede olgunlaşma kriterleri incelenerek gelişme durumları 42saptanmıştır. Gruplar arasındaki farkın istatistiksel değerlendirilmesi amacıyla Ki-kare testi uygulanmıştır. Toplam 40 adet kediden elde edilen 1013 adet oosit 4 gruba ayrılmış ve kültüre edilmiştir (I. Grup:255; ll.Grup:260; III.Grup:273; IV.Grup: 225 ). 48 saatlik kültürü takiben gruplara göre sırasıyla %6.2 (14/225), % 16.5 (43/260), % 13.1 (36/273) ve % 13.3 (30/225) oranlarında oositin Metafaz II dönemine ulaştığı tespit edilmiştir. Protein katkısı olarak % 5 FCS kullanılan grupta elde edilen oranın diğer gruplara göre anlamlı şekilde düşük olduğu saptanmıştır (p<0.001 ). Sayısal farklılık mevcut olmasına rağmen, oositlerin M II dönemine ulaşmaları açısından BSA grubunun kontrol grubuna göre anlamlı bir farklılık oluşturmadığı bulunmuştur (p>0.05). Toplam olarak mayoza devam eden oosit oranının (M I + M II) gruplara göre sırasıyla % 32.4 (73/225), % 40.3 (105/260), % 31.1 (85/273) ve % 30.2 (68/225) olduğu ve protein katkısı olarak 3 mg/ml oranında BSA kullanılan grupta elde edilen oranın diğer gruplardan anlamlı şekilde yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0.05). Çalışma sonucunda, kedi oositlerinin in vitro olgunlaştırılması amacıyla kullanılacak medyumda protein katkısı olarak 3mg/ml oranında BSA ilavesinin, daha fazla oositin mayoza devam etmesi açısından yararlı olacağı kanısına varıldı.
Özet (Çeviri)
7. SUMMARY The aim of this study was to determine the effects of different protein supplementations on in vitro maturation of cat oocytes. Cat oocytes obtained from ovaries after ovariohysterectomy were incubated for 48 h, fixed and stained for the evaluation of maturation criteria. Cats (n=40) living indoor (n=8) and outdoor (n=32) conditions were used in this study. Ovaries obtained after ovario-hysterectomy operation in cats under general anesthesia were brought to laboratory in PBS at 25-30°C. The oocytes with evenly vitellus and compact cumulus cells were randomly divided into four maturation groups and matured for 48 hours at 38°C and 5% C02 in humidified atmosphere. I. Group (FCS Group): Ham's F-10 + FSH (1 ul/mg) + LH (1pl/mg) + FCS (5%) II. Group (BSA Group) : Ham's F-10 + FSH (1 ul/mg) + LH (1ul/mg)+ BSA (3 mg/ml) III. Group (OKS Group): Ham's F-10 + FSH (1 ul/mg) + LH (1 ul/mg )+ Estrous Cat Serum (5%). IV.Grup (Control Group): Ham's F-10 + FSH (1 ul/mg) + LH (1 ul/mg) OKS that will be used in Group III is obtained from the 4 cats living in house condition. Blood samples (6-7ml) were taken from V. jugularis of cats showed estrus behaviors after receiving PMSG, centrifuged in 4000-5000 rpm for 5 minutes and sera were frozen and stored in -20°C until use. After the end of the culture period, oocytes were denuded by gentle pipeting with a fine bore glass pipette in a PBS solution supplemented with 0.1% hyaluronidase. After retaining in 0.7% KCI solution for 2-3 min, oocytes were fixed in acetic acid:ethanol (1:3) for 24 h, stained with 2% aseto-orcein and examined under a phase-contrast microscope at a magnification of x600 for evaluation of maturation criteria. Chi-square analysis was used to evaluate differences in the maturation groups with different protein supplementations. 44From 40 cats, 1013 oocytes were recovered and divided into four groups (I. Group:255; II.Group:260; III.Group:273; IV.Group: 225 ). After 48 h incubation period, rate of the oocytes reached to metaphase II stage were 6.2% (14/225), 16.5% (43/260), 13.1% (36/273) and 13.3% (30/225), respectively. In the first group (FCS) the metaphase II rate was significantly lower than other groups (p<0.001 ). When the groups of BSA and control were compared, inspite of the numerical difference, no statistically important difference was observed (p>0.05). The rates of the oocytes resumed meiosis (Ml and MM) were 32.4% (73/225) 40.3% (105/260), 31.1% (85/273) and 30.2% (68/225), respectively. The value of the second group (BSA) was seen to be superior statistically to all the other groups (p<0.05). It can be concluded that the BSA supplementation of maturation medium is beneficial for the resuming of meiosis of cat oocytes in vitro.
Benzer Tezler
- Sığır besi geliştirme yemlerinde farklı tampon maddelerin kullanılmasının besi performansı ve rumen asidozuna bağlı bazı parametrelere etkileri
Effects of different buffering agents in beef cattle fattening diets on fattening performance and some parameters related to ruminal acidosis
ERKAMGEDİZ TOSUN
Doktora
Türkçe
2026
Veteriner HekimliğiBalıkesir ÜniversitesiHayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERGÜN DEMİR
- Sebze püreleri ile üretilen yoğurtların özelliklerinin belirlenmesi
Determination of properties of yogurt produced with vegetable puree
EDA YILDIZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Gıda MühendisliğiUludağ ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TÜLAY ÖZCAN
- Transtiretin kardiyak amiloidoz tanısında Tc-99m pirofosfat ile yapılan planar ve SPECT/BT kardiyak sintigrafisinin 1. ve 3. saat değerlendirmelerinin karşılaştırılması
Comparison of 1st and 3rd hour evaluations of planar and SPECT/BT cardiac scintigraphy with Tc-99m pyrophosphate in diagnosis of transtyretin cardiac amyloidosis
FURKAN BURKAY AYDIN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2025
Radyoloji ve Nükleer TıpOndokuz Mayıs ÜniversitesiNükleer Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FEVZİYE CANBAZ TOSUN
- Tip 2 diyabetik hastalarda ve sağlıklı birinci derece yakınlarında lipoprotein (a) düzeyleri ve tip 2 diyabetik hastalarda lipoprotein (a) düzeylerinin koroner anjiografi bulgularıyla ilişkisinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
ABDURRAHMAN ÇÖMLEKÇİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1995
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıDokuz Eylül Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF.DR. SEVİNÇ BİBEROĞLU
- Erişkin periodontitisli bireylerde subgingival irrigasyon yoluyla uygulanan metronidazolün klinik ve mikrobiyolojik etkilerinin incelenmesi
The Clinical and microbiological effects of subgingival metronidazole irrigation on adult periodontitis
OYA YILMAZ