Metakrilik asit aşılanmış kitosan kürelerin karakterizasyonu ve lizozim enziminin saflaştırılmasında kullanılması
Characterization of metacrylic acid grafted chitosan beads and the use of them in the purification of the lysozyme enzyme
- Tez No: 202355
- Danışmanlar: PROF. DR. NECATİ BEŞİRLİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Kitosan küre, lizozim, immobilizasyon, iyon değisim, yumurta beyazı, Ası Kopolimer, metakrilik asit, Chitosan bead, lysozyme, Immobilization, Ion-exchange, metacrylic acid, Graft copolymer, Egg white
- Yıl: 2007
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Uludağ Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 72
Özet
Bu çalısmada, yumurta beyazından doğrudan lizozim enziminin saflastırılması için yeni bir kromatografik matriks gelistirildi. Destek materyali olarak, kitosan-g-pMAA küreleri kullanıldı. Kesikli sistemde bu afinite adsorbentleri üzerine farklı pH'larda farklı miktarda lizozim içeren sulu ortamdan lizozim adsorpsiyonu davranısı incelendi. Lizozimim iyon değistirici kürelere adsorpsiyonu için optimal pH değeri 4.0- 8.0 değerleri arasında arastırıldı. Sıcaklık ve iyonik siddetin, adsorbentlerin, adsorpsiyon kapasiteleri üzerindeki etkisi belirlendi. Kitosan-g-pMAA iyon değistirici kürelerin lizozim adsorpsiyon kapasitesi, sırasıyla 65.7 mg/g olarak belirlendi. ?mmobilize lizozim enziminin baslangıçtaki aktifliğini koruyarak 7 kez tekrar kulanılabildiği belirlendi. Yumurta beyazından doğrudan lizozim enzimi saflastırması sonuçları YBSK ile tayin edildi. Kitosan-g-pMAA iyon değistirici kürelerin, lizozim enziminin yumurta akından saflastırılmasında kullanılmasından sonra, lizozim enziminin 1.0 M KSCN ile elüsyonları yapıldı. Kitosan-g-pMAA iyon değistirici kürelerden elüe edilen lizozimin saflık derecesi ve geri kazanımları sırasıyla %94.16 ve %87.30 olarak belirlendi. Kitosan-g-pMAA küreler ile saflastırılan lizozimin spesifik aktivitesi 40486 U mg-1 olarak belirlendi.Ayrıstırma ve saflastırma islemlerinde lizozim aktivitesi, substrat olarak Micrococcus lysodeikticus bakterisi kullanılarak belirlendi.
Özet (Çeviri)
In this study, for direct purification of lysozyme enzyme from egg white, a new chromatography matrixs was developed. Chitosan-g-pMAA ion-exchange beads were used as support material.Behaviour of lysozyme adsorption onto these ion-exchange beads, from Aqueous solutions containing different amounts of lysozyme at different pH, investigated in a batch system. The optimal pH values for adsorption of lysozyme on the affinity adsorbents, were investigated in the pH range of 4.0-8.0. The effects of temperature and ionic strenght,on the adsorption capacities of the adsorbents, were determined. The lysozyme adsorption capacity of the chitosan-g-pMAA ion-exchange beads was found as 65.7 mg/g, respectively. It was determined that the orginial activity was preserved when immobilized lysozyme was used repeatedly 7 times. The results of direct lysozyme enzyme purification from egg white were determined by HPLC. After usage of chitosan-g-pMAA ion-exchange beads the lysozyme enzyme from the egg white, lysozyme enzyme was eluted by 1.0 M KSCN solution. The purity and the recovery of the eluted lysozyme, were 94.16% and 87.30 % for chitosan-g-pMAA ion-exchange beads, respectively. The specific activity of the lysozyme purified with Kitosan-g-pMAA beads 40486 Umg-1. Separation and purification was monitored by determination of lysozyme activity using Micrococcus lysodeikticus as substrate.
Benzer Tezler
- Yeni akrilat kökenli afinite kürelerin tasarlanması: Protein adsorpsiyonu ve saflaştırılmasında kullanılması
Design of the new acrylate based affinty beads and the use of adsorption and purification of protein
AYŞEGÜL ÜLKÜ METİN
Doktora
Türkçe
2008
BiyoteknolojiKırıkkale ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜLAY BAYRAMOĞLU
PROF. DR. M. YAKUP ARICA
- Poli(etilen teraftalat) lifler üzerine metakrilik asit aşılanması ve aşılanan liflerin özelliklerinin incelenmesi
Grafting methacrylic acid on poly (ethylene terephthalate)fibers and the observation of the properties of grafted fibers
FİLİZ SERTKAYA
- Water soluble monomer grafting on thin films of ultra high molecular weight polyethylene
Çok yüksek molekül ağırlıklı polietilen ince filmlerine hidrofilik monomer aşılanması
CANAN GÖKTEPE
Yüksek Lisans
İngilizce
2003
Polimer Bilim ve TeknolojisiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiPolimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TEOMAN TİNÇER
- Antibakteriyel özelliğe sahip modifiye edilmiş poli (etilen teraftalat) liflerin sentezi ve karakterizasyonu
Synthesis and characterization of antibacterial properties of modified poly (ethylene terephthalate) fibers
KÜBRA GÜNAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyomühendislikKırıkkale ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. METİN ARSLAN