BHV-1 ile enfekte hücre kültüründe asiklovir ve insan amniyon membran etkinliğinin ve viral DNA yükünün real-time PCR ile değerlendirilmesi
Evaluation of acyclovir and human amniotic membrane efficiency on BHV-1 infected cell culture and viral DNA load with real-time PCR
- Tez No: 248954
- Danışmanlar: PROF. DR. FİKRET AKATA
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Göz Hastalıkları, Eye Diseases
- Anahtar Kelimeler: Amnion, Asiklovir, DNA, Herpes simplex, Hücre kültürü, Keratit, Polimeraz zincirleme reaksiyonu, Virüsler, Amnion, Acyclovir, DNA, Herpes simplex, Cell culture, Keratitis, Polymerase chain reaction, Viruses
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
HSV, korneal hastalığın ve görme kaybının en önemli nedenlerinden biridir. Yüksek prevelansa rağmen rekürrens yapısı ve körleştiren komplikasyonlarının mekanizması net değildir. Görmeyi tehdit eden oküler enfeksiyon kontrolünde erken tanı ve tedavi önemlidir. Antiviral tedavilerle klinik düzelme sağlanmasına rağmen bu ilaçların latent Herpes virüsüne etki etmemektedir. Şiddetli vakalarda alternatif tedavi olarak AMT uygulanabilmektedir. Bu çalışmanın amacı, Herpes virüs ve hücre kültüründe asiklovir ve amniyon membran etkinliğinin Real-time PCR ile viral DNA yük analizi yapılarak değerlendirilmesi amaçlanmıştır.Çalışmamız Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Viroloji Anabilim Dalı laboratuvarında yapılmıştır. MDBK hücre kültürleri ve BHV-1 suşları kullanılmıştır. İki grup oluşturularak 1. gruba hücre kültürüne adsorbsiyonlu virüs inokulasyonunu takiben kültür petrilerine amniyon membran, asiklovir tek ya da kombine uygulandı. İkinci grupta ise virüs inokulasyonu yapılmadan sadece hücre kültürüne benzer uygulamalar yapıldı. Membran ve ilacın uygulanmasını takiben 24. ve 48. saatte CPE (+)'liği açısından doku kültürü mikroskobu ile incelendi. CPE (+)'liği görülen örneklerden DNA ekstraksiyonu sonrası Real-time PCR ile viral DNA yük analizi yapıldı.Analiz sonunda Ct değerinin VZ<Vİ<VZİ şeklinde olduğu görüldü. Bu, membranın antiviral etkisinin olmadığını göstermektedir. VZİ'de membranın bir bariyer etkisinin olmadığını belirtebilmek için deney sayısının ve zaman diliminin arttırılması gerekmektedir. Ayrıca asiklovir ve membranın hücreler üzerinde sitotoksik etkisinin olmadığı görüldü.Sonuç olarak çalışmanın amniyon membran ve asiklovir birlikteliğinin klinik etkisinin değerlendirilmesi için hayvan çalışmalarına uygulanması uygun olacaktır.
Özet (Çeviri)
HSV is one of the most important causes of corneal disease and loss of vision. Despite of high prevalance, mechanisms of reccurence and blinding complications are not obvious. Early diagnosis and treatment is important in the control of vision threatening complications. Clinical improvement can be achieved by antiviral treatment but they are not effective in the latent Herpes infections. In severe cases AMT is an alternative treatment choise. The aim of this study was to evaluate the effect of acyclovir and human amniotic membrane on herpes virus culture by analysis of viral DNA with RT-PCR.This study was conducted in Ankara University Veterinary Faculty Virology Department laboratory. MDBK cell culture and BHV-1 types were used. Out of two groups the first culture group was inoculated by absorbted virus and then amniotic membrane, acyclovir or both were added. In the second group virus inoculation wasn?t done, only applications similar to cell cuture were performed. After mebrane and drug application, culture was evaluated on 24th and 48th hours for CPE positivity with tissue culture microscope. In CPE (+) samples DNA was extracted for viral DNA analysis by real time PCR.After analysis Ct was found as VZ<Vİ<VZİ. This shows that membrane has no antiviral effect. To show the barrier activity of membrane in VZI, samples and study time must be increased. Also no cytotoxic effect of membrane and acyclovir on cells was seen.In conclusion, animal studies performed to evaluate the clinical effect of amniotic membrane and acyclovir.
Benzer Tezler
- Bovine Herpes I virusu ile enfekte madin-darby bovine kidney hücre kültüründe oksidatif stres üzerine kuersetinin etkisi
The effect of quercetin on oxidative stress in madin-darby bovine kidney cell culture infected with bovine Herpes i Virus
GÖKHAN KOÇAK
Doktora
Türkçe
2019
BiyokimyaOndokuz Mayıs ÜniversitesiVeterinerlik Biyokimyası Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SENA ÇENESİZ
- Sığır herpesvirüs-5 ile doğal enfekte buzağılarda nöropatolojik bulgular ve virüsün apoptozis ile ilişkisi
Neuropathological findings of bovine herpesvirus-5 in naturally infected calves and its association with apoptosis.
ERKMEN TUĞRUL EPİKMEN
Doktora
Türkçe
2014
Veteriner HekimliğiAdnan Menderes ÜniversitesiPatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NİHAT TOPLU
- Orta Karadeniz bölgesi sığır ve koyunlarında yerli izolat bovıne herpesvirus tip-1 (BHV-1 trsamsun2019/2B) seroprevalansının araştırılması
Investigation of seroprevalance of domestic isolate bovine herpesvirus TYPE-1 (BHV-1 trsamsun2019/2B) in cattle and SHEEP of the central Black Sea region
SERDAR YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Veteriner HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiVeterinerlik Viroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAFER YAZICI
- Development and in vitro characterization of vaccine delivery systems for mucosal immunization against bovine Herpes Virus Type 1 (BHV-1) infections
Sığır Herpes Virüs Tip 1 (BHV-1) enfeksiyonlarına karşı mukozal immunizasyon için taşıyıcı sistemlerin geliştirilmesi ve in vitro olarak değerlendirilmesi
MERVE GÜNBEYAZ
Yüksek Lisans
İngilizce
2010
Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEVDA ŞENEL
- Sığır sürülerinde solunum sistemi viruslarının enfeksiyon dinamiğinin serolojik takibi ve klinik olgulardan virus tespiti
Serological detection of infection dynamics of respiratory viruses in cattle herds and virus isolation from clinical cases
PELİN TUNCER
Doktora
Türkçe
2013
Veteriner HekimliğiUludağ ÜniversitesiMikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KADİR YEŞİLBAĞ