Geri Dön

Serotonin reseptörü ve SERCA genlerinin A7r5 Vasküler Düz Kas Hücre kültürlerindeki ayrımsal ekspresyon kalıplarının işlevsel sonuçları.

Functional consequences of differential expression patterns of serotonin and SERCA genes in A7r5 vascular smooth muscle cell lines.

PDF İndir

  1. Tez No: 260135
  2. Yazar: PELİN FİLİK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. METİNER TOSUN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2009
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Farmakoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 76

Özet

In vitro farmakolojik ve fizyolojik çalışmalarda vasküler düz kas hücre modeli olarak A7r5 (embriyonik sıçan torasik aort düz kas hücre hattı) 10-25. pasajlar arasında sıklıkla kullanılmaktadır. Ancak, primer hücre kültürlerinden farklı olarak, ölümsüzleştirilen bu hücrelerde gen ekspresyonunda dramatik nicel ve nitel değişiklikler gözlenmektedir. Bu nedenle çalışmamızda yapısal proteinlere oranla oldukça düşük düzeyde olan 5-HT2A ve SERCA2b gen ekspresyonlarını ve bunlarla ilişkili olası reseptör-aracılı/ reseptörden bağımsız hücre içi Ca+2 dinamiklerindeki değişimler belirlenerek laboratuvarımızda kullanılan bu modelin validasyonu amaçlanmıştır.Hücre kültür ortamında erken (pasaj no: 14-16) ve ileri (pasaj no: 23-24) pasajlara ait hücrelerde ekspresyon analizleri ve hücre içi Ca+2 ölçümleri yapılmıştır. A7r5 (ECACC) hücreleri besi ortamı (DMEM/Ham's F-12) ile kültüre edilmiştir. Her iki gruba ait hücrelerden elde edilen total RNA'lardan ters transkriptaz reaksiyonu ile cDNA oluşturulmuştur. 5-HT ve SERCA2b mRNA düzeyleri kantitatif Real Time PCR ile belirlenmiştir. Serotoninin neden olduğu reseptör aracılı hücre içi Ca+2 konsantrasyonundaki artış ve selektif SERCA inhibitörü siklopiazonik asit (CPA) ile aktive edilen depo-kontrollü Ca+2 girişi (SOCE) Ca+2 belirteci fura-2/AM yüklenmiş hücrelerde yüzeyel spektrofluorometri yöntemi ile gerçek zamanlı olarak belirlenmiştir.Kantitatif Real time PCR sonuçlarına göre 5-HT2A mRNA düzeyinde anlamlı bir değişiklik olmazken, SERCA2b geninin ekspresyonu ileri pasajlarda erken pasajlara göre belirgin olarak artmıştır (P

Özet (Çeviri)

Embryonic rat aortic smooth muscle cell line, A7r5, is indiscriminately used between 10th and 25th passages as vascular smooth muscle cell model in pharmacological and physiological studies. Unlike freshly dispersed primary cells, immortalized cells including A7r5s have been reported to have quantitative and qualitative changes after 25th passages. For this reason, we investigated 5-HT2A and SERCA2b gene expressions as well as possible associated changes in receptor-dependent and/or -independent cytoplasmic Ca2+ dynamics in A7r5s in which we routinely used for post-transcriptional gene silencing of candidate genes coding for novel Ca2+ channels.Expressional changes as well as cytoplasmic Ca2+ levels in cells at early (p#14.-16.) and late (p#23.-24.) passages were performed. A7r5 (EACC) cell?s medium was cultured by DMEM/Ham?s F-12. Complementary DNAs were synthesized by reverse transcriptase reaction for total RNAs isolated from both cell groups.and 5-HT2A and SERCA mRNA levels were determined by quantitative Real Time PCR. Serotonin receptor-mediated elevations in cytosolic Ca+2 concentration and the receptor-independent store operated Ca+2 entry activated by the selective SERCA blocker the CPA, were monitored via a front face spectrofluorometric method in Ca+2 ?specific dye fura-2-loaded cells.On the basis of real time PCR results, no significant change was observed in 5-HT2A mRNA levels, however, SERCA2b mRNA expression increased in late passages compared to that of earlier passages (P

Benzer Tezler

  1. Tez No

    165563

    Vasküler SERCA inhibisyonunun serotonin yanıtlarındaki işlevi: Sekresyon-tipi kenetlenmeye bir kanıt

    The role of vaskular SERCA inhibition on serotonin responses: An evidence for 'secretion-like' coupling

    ÇİĞDEM SELLİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. METİNER TOSUN

  2. Tez No

    819696

    Seçici serotonin gerialım inhibitörü kullanımına bağlı cinsel işlevlerde bozulma gelişen ve gelişmeyen hastalar ile sağlıklı gönüllülerin melanokortin-4 reseptörü ve α - melanosit stimüle hormon düzeylerinin karşılaştırılması

    Comparison of melanocortin-4 receptor and α - melanocyte stimulated hormone levels of healthy volunteers with patients who developed and did not develop impaired sexual function due to the use of selective serotonin reuptake inhibitor

    SİMGE NUR KURT KAYA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    PsikiyatriSağlık Bakanlığı

    Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YASİR ŞAFAK

  3. Tez No

    611981

    Erken boşalma etiyolojisinde gen polimorfizmleri

    Gene polymorphisms in premature ejaculation etiology

    MELİS DANIŞMAN SONKURT

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    GenetikEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. GÜLCAN GÜLEÇ

  4. Tez No

    713190

    The association of HTR2A gene polymorphism wıth autism in Jordanian population

    Ürdün nüfusunda HTR2A gen polimorfizmin otizm ile ilişkisi

    ZEYAD MAHMOOD

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2021

    Sağlık EğitimiBahçeşehir Üniversitesi

    Sinir Bilimi Ana Bilim Dalı

    ASSOC. DR. FATİH ÖZDENER

  5. Tez No

    271666

    Palonosetronun kanserli hastalarda EKG parametreleri üzerinde akut dönemde etkileri

    Acute effects of palonosetron on ECG parameters in cancer patients

    CENGİZ AKOSMAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    OnkolojiYeditepe Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BAŞAK OYAN ULUÇ

Geri Dön