Cevizden (Juglans regia L.) paraoksonaz enziminin saflaştırılması, karakterize edilmesi ve bazı pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkisinin araştırılması
Purification and characterization of paraoxonase enzyme from the walnut (Juglans regia L.), research the effects of some pesticides on enzyme activity
- Tez No: 270727
- Danışmanlar: PROF. DR. NAZAN DEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 81
Özet
Bu çalışmada cevizden (Juglans regia L.) paraoksonaz (PON) enzimi saflaştırıldı ve karakterize edildi. Paraoksonaz enziminin saflaştırılmasında afinite kromatografisinden faydalanıldı. Cevizden (Juglans regia L.) saflaştırılan paraoksonaz enziminin saflığını kontrol etmek ve alt birim sayısını belirlemek için SDS-PAGE elektorofezi uygulandı.Enzimin substrat spesifikliğinin belirlenmesi amacıyla, paraokson ve fenilasetat substratları denenmiş ve aktivetesi daha yüksek olan paraokson aktivite ölçümlerinde ağırlıklı olarak kullanılmıştır.Enzimin optimum pH ve sıcaklık değerleri tespit edilerek paraokson ve fenilasetat substratları için KM ve Vmax değerleri belirlendi. Paraokson için Vmax ve KM değerleri sırasıyla: 0,062 ? g/L.dak ve 0,038 mM, fenilasetat için Vmax ve KM değerleri sırasıyla: 0,038 ? g/L.dak ve 0,018 mM olarak bulundu.Enzim aktivitesi üzerine 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM konsantrasyonlarında, Mg2+, Ca2+, Cu2+, Mn2+, Zn+2, Fe+3 katyonlarının ve EDTA, Askorbik Asit, ß ß-Merkaptoethanol ve SDS bileşiklerinin etkisi denendi. Ca2+, Fe+3'ün paraoksonaz enzim aktivitesini arttırdığı bulundu. Mn2+, Zn+2'nin yüksek konsantrasyonlarda enzim aktivitesini kısmen inhibe ettiği belirlendi. ß-Merkaptoethanol, EDTA, Askorbik Asit ve SDS'nin yüksek konsantrasyonlarda enzimi inhibe ettiği belirlendi.PON enzim aktivitesi üzerine 100 ppm, 10 ppm, 1 ppm klorprifos etil, metil paratiyon, dimetoat, diklorvos, diazinon, metamidopos, etil paratiyon ve fention pestisitlerinin etkisi araştırıldı. Bu pestisitlerin paraoksonaz enzim aktivitesini arttırdığı bulundu.
Özet (Çeviri)
In this study; the paraoxonase enzyme was purified and characterized from the walnut (Juglans regia L.). Affinity chromatography was used for purification of the paraoxonase. SDS-polyacrilamide gel electrophoresis was applied for control of the paraoxonase enzyme purified from the walnut (Juglans regia L.).KM and Vmax values for paraoxon and phenyl acetate substrates were determined after setting optimal pH and temperature conditions of paraoxonase enzyme. Vmax and KM values for paraoxon were determined as 0,062 ? g/L.min ve 0,037 mM. Vmax and KM values for phenyl acetate were determined as 0,038 ? g/L.min ve 0,018 mM.Effects of 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM Mg2+, Ca2+, Cu2+, Mn2+, Zn+2, Fe+3 cations and 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM EDTA, Ascorbic Asid, ß-Merkaptoethanol, SDS compounds on enzyme activity were researched. It was found that Ca2+ and Fe+3 activated the enzyme. It was determined that high concentrations of Mn2+, Zn+2 partially inhibited the enzyme. It was determined that high concentrations of ß-Merkaptoethanol, EDTA, Ascorbic Acid and SDS inhibited the enzyme.Effects of 100 ppm, 10 ppm, 1 ppm chloropyriphos-ethyl, methyl-parathion, dichlorvos, dimethoate, diazinon, methamidophos, ethyl-parathion and fenthion pesticides on enzyme activity were researched. This pesticides activated the enzyme.
Benzer Tezler
- Ceviz (Juglans regia L.) sütünün çeşitli kanser hücreleri üzerindeki sitotoksik etkinliğinin antimikrobiyal, antioksidan ve prebiyotik aktivite ile birlikte değerlendirilmesi
Evaluation of citotoxic activity of walnut (Juglans regia L.) milk on various cancer cells with antimicrobial, antioxidant and prebiotic activity
MERVE GİDEMEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyokimyaHitit ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜLÇİN ALP AVCI
- Ceviz kabuğu kullanılarak biyoaktif materyal geliştirilmesi
Development of bioactive material using walnut husk
RUKEN BAKIRCIOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiGaziantep ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. REMZİYE AYSUN KEPEKÇİ
- Cevizde (Juglans regia L.) bazı fenolojik özelliklerle bağlantılı DNA markörlerinin ilişki haritalama yöntemi ile belirlenmesi
Determination of dna markers linked to some phenological traits with association mapping method in walnut (Juglans regia l.)
ŞAKİR BURAK BÜKÜCÜ
Doktora
Türkçe
2019
ZiraatKahramanmaraş Sütçü İmam ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET SÜTYEMEZ
- Cevizde (Juglans regia L.) DNA markörleri ile genetik haritalama
Genetic linkage mapping in walnut (Juglans regia L.) by DNA markers
YILDIZ DOĞAN
Doktora
Türkçe
2016
BiyoteknolojiÇukurova ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SALİH KAFKAS
- Cevizde (Juglans regia L.) farklı konum ve olgunluktaki çiçeklerin çiçek tozu canlılık ve çimlenme yeteneklerinin belirlenmesi.
Determination of pollen wiability and germination ability of different location and maturity in walnut (Junglans regia L.).
YAKUP EZBER
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
ZiraatAydın Adnan Menderes ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FAİK EKMEL TEKİNTAŞ