Gıdalarda genetiği değiştirilmiş organizmaların tayinine yönelik nanomateryalle zenginleştirilmiş elektrokimyasal genosensör tasarımı
Nanomaterial enhanced electrochemical genosensor design for the detection of genetically modified organisms in food
- Tez No: 346627
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET YEKTA GÖKSUNGUR, DOÇ. DR. PINAR KARA KADAYIFCILAR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Gıda Mühendisliği, Biyoteknoloji, Food Engineering, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tezde, gerçek gıda ve yem örnekleri kullanılarak, genetiği değiştirilmiş organizmaların tayinine yönelik, indikatörsüz DNA dizi algılama yöntemine dayalı, altın nanopartikülle zenginleştirilmiş elektrokimyasal genosensör tasarımı ve optimizasyonu araştırılmıştır. Çalışmada tek kullanımlık grafit elektrotlar kullanılmıştır. DNA düzeyinde algılamaya yönelik tasarlanan genosensörde elektrot yüzeyi, genetiği değiştirilmiş organizmaların tayini için seçici gen bölgesini simgeleyen tek sarmal prob DNA dizi ile kaplanmıştır. En yüksek biyosensör seçiciliği, aktive edilmiş grafit elektrot yüzeylere, belli oranda seyreltilmiş altın nanopartikül çözeltisi adsorbe edilip 18 saat beklendikten sonra, yüzeylere tiyol (-SH) işaretli probun immobilizasyonu yöntemi ile elde edilmiştir. Elektrot yüzeyini en iyi şekilde kaplayan prob konsantrasyonu 2 µg/mL (ppm) olarak belirlenmiştir. Hibridizasyon parametreleri olan hedef konsantrasyonu, hibridizasyon tamponu, yıkama tamponu ve yıkama süresinin biyosensör seçiciliği üzerine etkilerini incelemek için yapılan optimizasyon çalışmaları sonucunda, optimum hedef konsantrasyonunun 10 µg/mL (ppm) olduğu belirlenmiştir. Hibridizasyon sonrası hedef dizi ve tüm bazları hedeften farklı rastgele diziden alınan sinyallerin oranı (H/NC) analizin cevabı olarak değerlendirilmiştir. Tüm bu parametrelerin biyosensör seçiciliği üzerine güçlü bir etkiye sahip olduğu görülmüştür. Biyosensör seçiciliği için belirlenen optimum koşullarda (hedef konsantrasyonu 10 ppm, hibridizasyon tamponu TBS + %1 Tween 20, yıkama tamponu TBS + %1 Tween 20 + %0.05 SDS ve yıkama süresi 5 dakika) maksimum H/NC oranı elde edilmiştir. Optimum koşullarda, farklı gıda ve yem örneklerinin analizi gerçekleştirilmiştir. Hibridizasyon derecesi, Elektrokimyasal Empedans Spektroskopisi (EIS) kullanılarak belirlenmiştir. Geliştirilen analiz yöntemiyle gerçek gıda ve yem örneklerinde genetiği değiştirilmiş organizmaların tayininin etkin bir şekilde gerçekleştirildiği gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
In this thesis, design and optimization of gold nanoparticle enhanced electrochemical genosensor based on label free DNA technique for the detection of genetically modified organisms in real food and animal feed samples was investigated. Disposable pencil graphite electrodes (PGE) were used as working electrode. PGE surface was covered by single stranded DNA array that is a selective gene zone for detection of genetically modified organisms. The optimum biosensor selectivity was obtained after a certain rate of diluted gold nanoparticle solution was adsorbed onto activated graphite electrode surfaces after waiting for 18 hours; and probe was immobilized onto electrode surfaces via thiol (-SH) linking. Optimum probe concentration was found as 2 µg/mL (ppm). At the end of the optimization studies to determine the effects of the hybridization parameters including target concentration, hybridization buffer, washing buffer and washing time, on biosensor selectivity, the optimum target concentration was found to be 10 ppm. The ratio of electrochemical transduction after hybridization with complementary and non-complementary targets (H/NC) was evaluated as the response of the analysis. It was seen that all these parameters have a strong effect on the selectivity of biosensor. At the optimum conditions that were defined for biosensor selectivity (target concentration 10 ppm, hybridization buffer TBS + %1 Tween 20, washing buffer %1 Tween 20 in TBS + %0.05 SDS and washing time 5 minutes) the maximum H/NC ratios were obtained. Under the optimized conditions, different food and animal feed samples were analyzed. The extent of hybridization was determined by using Electrochemical Impedance Spectroscopy (EIS). With the developed analysis method, determination of genetically modified organisms for real food and feed samples were carried out effectively.
Benzer Tezler
- Süt formüllerinin tüketim uygulamaları ve süt formüllerinin C vitamini içeriği ile pH değerleri
Başlık çevirisi yok
GÖNÜL VAROL
Yüksek Lisans
Türkçe
1986
Besin Hijyeni ve Teknolojisiİstanbul ÜniversitesiÇocuk Gelişimi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TÜRKAN KUTLUAY
- Bursa ili İnegöl ilçesi merkez köylerinde 0-3 yaş grubu çocukların beslenme durumları ve bunu etkileyen faktörler
Children's in the age group of 0-3 years nutritional conditions and effective factors in the villages of Bursa-İnegöl-Merkez
ŞEBNEM SOYUER
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
Ev EkonomisiAnkara ÜniversitesiEv Ekonomisi Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NEVİN AKTAŞ
- Isı iletimli bir tam karıştırmalı akım tankının dinamiği ve kontrolu
Başlık çevirisi yok
Ö. METE KOÇKAR
Yüksek Lisans
Türkçe
1983
Kimya MühendisliğiAnadolu ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. MUSTAFA ALPBAZ
- Determination of selenium in diet by radiochemical neutron activation analysis
Başlık çevirisi yok
YASER HASSAN EL-HALLOQ
- Gıdaların donmasının sayısal yöntemle incelenmesi ve donma sürelerinin öngörülmesi
Başlık çevirisi yok
SEMİH TEVFİK ENGEZ
Yüksek Lisans
Türkçe
1988
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Teknolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. COŞKAN ILICALI
