Kuşburnu meyvasından izole edilen polifenol oksidaz enziminin kinetik ve elektroforetik özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 35145
- Danışmanlar: DOÇ. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Enzimler, Kinetik özellikler, Kuşburnu, Polifenol oksidaz, Enzymes, Kinetic properties, Rose hip, Polyphenol oxidase
- Yıl: 1994
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, kuşburnu meyvasından polifenol oksidaz enzimi izole edilerek, çeşitli kinetik ve elektroforetik özellikleri incelenmiştir. Bu amaçla, 8 ayrı substrat için Km ve Vmax değerlerini belirlemek üzere optimum şartlar (pH, sıcaklık ve iyonik şiddet) tesbit edildi. Optimum şartlarada 5 farklı substrat konsantrasyonunda aktivite ölçümleri yapıldı. Km değerleri katekol, 4-metil katekol, L-dopa, dopamin, gallik asit, pirogallol, L-tirozin ve p-kresol için sırasıyla 7.41x1 0“3 M, 6.06x1 0”4 M, 2.82x10-3 M, 2.64x10-3 M, 2.79x10“3 M, 8.27x10-4 M ve 8.63x10”5 M; Vmax değerleri ise aynı substratlar için 41.66, 431.96, 45.45, 42.48, 111.11, 111.73, 142.85 ve 40.00 EÜ/ml dak. olarak bulundu. Inhibitor çalışmalarında substrak olarak 4-metilkatekol kullanılarak, sodyum metabisülfit, L-sistein, askorbik asit, glutatyon, tiyoüre, sodyum azotür, sodyum dietilditiyokarbamat, ditiyoeritritol, tannik asit, benzoik asit ve p-merkaptoetanol inhibitörleri ile çalışıldı. Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla bu inhibitörler için Kj sabitleri ve inhibisyon türleri bulundu. Ayrıca I50 değerleri tesbit edildi. Kj sabitleri ve I50 değerlerine göre en etkili inhibitörün sodyum metabisülfit olduğu ve kompetetiv inhibisyon etkisi gösterdiği belirlendi. Enzimin sıcaklık artışına paralel olarak daha kısa sürede denature olduğu sıcaklığın düşürülmesi ile renatüre olduğu gözlendi. Enzim saflaştırıma işlemlerinde, jel filtrasyon kromatografisi ve iyon değişim kromatografisi ile iki pikin elde edilmesi ve tabii elektroforez ile iki bantın gözlenmesi iki izoenziminin varlığını gösterdi.
Özet (Çeviri)
The polyphenol oxidase enzyme was extracted from doge rose fruit and its kinetic and electrophoretic features were investigated in this study. For this purpose, optimum conditions, i.e., pH, temperature and ionic strength, affecting the values of Km and Vmax for eight different substrates were determined. The assay of activites were carried out in the optimum conditions for five different concentrations of the substrate. The values of Km for catechol, 4-methyl catechol, L- dopa, dopanine, gallic acid, pyrogallol, L-tyrosine and p-Cresol are 7.41 x10“3 M, 8.46x10-3 M, 6.06x1 0'4 M, 2.82x1 0”3 M, 2.64x1 0“3 M, 2.97x1 0”3 M, 8.27x1 0-4 M, and 8.63x10-5 M. and Vmax values for the same substrates were found 4.66, 431.96, 45.45, 42.48, 111.11, 111.73, 142.85, and 40.00 EU/ml min. respectively. In inhibitor studies, 4-methyi catechol substrate was employed with sodium metabisulphite, L- cysteine ascorbic acid, glutathione thiourea, sodium azide sodium diethyl-dithiocarbamat, benzoic acid, dithioerythritol, tannic acid and 3- mercaptoethanol inhibitors for the investigation. Kj constants and the types of inhibition of these inhibitors were found by using lineweaver-Burk graphics. In addition, the values of I50 were found. Sodium metabisulfite is found to be the most effective inhibitor and to display competitive inhibition effect on the basis of the Kj constants. It was observed that the enzyme was denaturated as the temperature increased, it was renaturated as the temperature decreased. In the processes of enzyme purification, the presence of two peaks obtained with gel filtration chromatography and ion-exchange chromatography and of two bands observed from nature polyacrylamid gel electrophoresis show that there are two distinct isoenzymes of the enzyme.
Benzer Tezler
- Green extraction and encapsulation of black rosehip polyphenols: İn vitro bioaccessibility, bioavailability, and biological activities
Siyah kuşburnu polifenollerinin yeşil ekstraksiyonu ve enkapsülasyonu: İn vitro biyoerişilebilirlik, biyoyararlılık, ve biyolojik aktiviteleri
KADRİYE NUR KASAPOĞLU
Doktora
İngilizce
2022
Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERAAT ÖZÇELİK
- Siyah kuşburnu (Rosa pimpinellifolia L.) meyvesinden sulu iki faz sistemiyle antosiyanin ekstraksiyonu ve mikroenkapsülasyonu
Extraction of anthocyanins from black rosehip (Rosa pimpinellifolia L.) by aqueous-two phase system and its microencapsulation
HALİL İBRAHİM ODABAŞ
Doktora
Türkçe
2019
Gıda MühendisliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İLKAY KOCA
- Kuşburnu meyvalarında (Rosacanina) absisik asit (ABA) miktarı ve elde edilen ABA'nın izomerizasyonu üzerine ışığın etkisi
Başlık çevirisi yok
MEHMET GÖNÜLLÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
1989
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HÜSNÜ ÇAKIRLAR
- Kara kuşburnu çayının antioksidan aktivitesi ve antosiyanin miktarı üzerine infüzyon süresinin etkileri
The effects of infusion time on antioxidant activity and anthocyanin content of black rosehip tea
NESLİHAN KAVAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Gıda MühendisliğiAtatürk ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEMNUNE ŞENGÜL
- Kuşburnu (Rosa canina L. ) meyvesinin işlenmesi sırasında askorbik asit degradasyonunun kinetiği
Degradation kinetics of ascorbic acid in rose hip fruit (Rosa canina L. ) during processing
MEHMET AKSU
Yüksek Lisans
Türkçe
2002
Gıda MühendisliğiAkdeniz ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MUSTAFA KARKACIER