Cancur eriğinden (Prunus domestica L.) polifenol oksidazın saflaştırılması ve eriğin antioksidan özelliğinin incelenmesi
Purification of polyphenol oxidase from cancur plum (Prunus domestica L.) and investigation of plum' s antoxidant properties
- Tez No: 394453
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. BARBAROS DİNÇER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Recep Tayyip Erdoğan Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 114
Özet
Polifenol oksidazlar (PFO), bakır içeren metaloenzimler olup oksijen varlığında, monofenollerin o-difenollere hidroksilasyonunu ve o-difenollerin de o-kinonlara yükseltgenmesini katalizler. Bu çalışmada, Ardahan İli Posof İlçesi Türkgözü Köyü' nden toplanmış olan Cancur Eriğinden (Prunus domestica L.) PFO, Sepharose-4B-L-tirosin-p-aminobenzoik asit afinite jeli kullanılarak saflaştırıldı. PFO, doğal ve SDS-poliakrilamid jel elektroforez ile biyokimyasal özellikleri bakımından karakterize edildi. Cancur eriği PFO' sunun elektroforez kromatogramında iki izoenzime sahip olduğu belirlendi. Cancur eriği PFO' sunun L-tirozin, 3,4-dihidroksihidrosinnamik asit, 3,4-dihidroksifenil propanoik asit, p-kumarik asit, katekol ve 4-metil katekol substratları varlığında en yüksek aktiviteyi 30-40 °C ve pH 5.0-7.0 arasında gösterdiği tespit edildi. Cancur eriği PFO' sunun her bir substratının Michaelis-Menten kinetiğine uyduğu tespit edildi. Kinetik veriler olan Michaelis-Menten sabiti (Km) ve maksimum hız (Vmaks) çizilen Lineaweaver-Burk grafiği yardımıyla hesaplandı. Cancur PFO' sunun hem monofenolaz hem de difenolaz aktivitesine sahip olduğu belirlendi. En fazla katekol substratına ilgi duyduğu ve bunu sırasıyla 4-metil katekol, DHHSA, L-tirozin, DHPPA, p-kumarik asitin izlediği belirlendi. Cancur eriği PFO' sunun 4-metil katekol substratı varlığında askorbik asit, sodyum metabisülfit, benzoik asit ve sodyum azid tarafından inhibe edildiği tespit edildi. Bu inhibitörler için Ki değerleri sırasıyla 0.02, 0.12, 6.0 ve 18.3 mM olarak tespit edildi. Cancur eriğinin sulu özütünde toplam fenol miktarı 114.6±5.0 mg GAE/100 g olarak tespit edildi. Özütte yapılan antioksidan aktivitesi CUPRAC yöntemiyle 30.19±0.96 (mg TEAK/g), DPPH yöntemiyle 1.98±0.02 (mg/mL) ve ABTS yöntemiyle 2.17±0.01 (mg/mL) olarak belirlendi.
Özet (Çeviri)
Polyphenol oxidases (PPO) are copper-containing metalloenzymes that catalyze the hydroxylation of monophenols to o-diphenols and the oxidation of o-diphenols to o-quinones in the presence of oxygen. In this study, PFO was purified from Cancur plums (Prunus domestica L.), collected from Türkgözü village in Posof, Ardahan, Turkey, using Sepharose-4B-L-tyrosine-p-aminobenzoic acid affinity gel. The PPO was characterized with natural and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and in terms of biochemical properties. It was determined to have two isoenzymes by electrophoresis chromatogram on Cancur plum PPO. It was detected that the enzyme showed the highest activity at between 30-40 °C and pH 5.0-7.0 in the presence of L-tyrosine, 3,4-dihydroxyhydrocinnamic acid, 3,4-propanoic acid, p-coumaric acid, catechol and 4-methyl catechol as substrates. Each substrate of cancur plum PPO was found to comply with Michaelis-Menten kinetics. Kinetic data as a Michaelis-Menten constant (Km) and a maximum velocity (Vmax) calculated via the drawn-Lineaweaver Burk plot. Cancur PPO was found to have both monophenolase and diphenolase activity. It was determined that catechol is most interested in as substrate and followed by 4-methylcatechol, DHHSA, L-tyrosine, DHPPA and p-coumaric acid as substrates, respectively. The PPO was inhibited by ascorbic acid, sodium metabisulfite, benzoic acid and sodium azide in the presence of 4-methyl catechol as a substrate. The Ki values for these inhibitors were found as 0.02, 0.12, 6.0 and 18.3 mM, respectively. The total amount of phenol in aqueous extracts of Cancur plum was determined as 114.6 ± 5.0 mg GAE / 100 g. The antioxidant activity of the extract was found as 30.19 ± 0.96 (mg TEAC / g) with CUPRAC method, as1.98 ± 0.02 (mg / mL) wih DPPH method and as 2.17 ± 0.01 (mg / mL) with ABTS method.
Benzer Tezler
- HSP90 gen polimorfizmi ile over ve endometriyum kanseri arasındaki ilişkinin belirlenmesi
Determination of relationship between HSP90 and ovarian and endometrial cancer
HANDE ATASOY
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
Moleküler TıpYeditepe ÜniversitesiMoleküler Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TURGAY İSBİR
- Küçük hücreli dışı akciğer kanserinde anastazisin moleküler ve genetik mekanizmalarının araştırılması
Investigation of molecular and genetic mechanisms af anastasis in non-small cell lung cancer
HALİME AKGÜN
- Tıp etiğinde gerçeğin söylenmesi ve Türkiye'deki durum
Başlık çevirisi yok
REMZİ GÜLSOY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2003
Deontoloji ve Tıp TarihiHacettepe ÜniversitesiDeontoloji ve Tıp Tarihi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERDEM AYDIN
- Automated melanoma detection in dermoscopic images
Dermoskopik görüntülerde otomatik melanom tespiti
ERDEM OKUR
Doktora
İngilizce
2023
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİzmir Ekonomi ÜniversitesiBilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MEHMET TÜRKAN
- Radyofrekans uygulaması yapılan fare meme kanser modelinde primer tümör ve metastazda kisspeptin düzeyinin incelenmesi
Investigation of kisspeptin level in primary tumor and metastasis in the mouse breast cancer model with radiofrequency exposure
SİMGE ÇELEBİ AYLAN
Doktora
Türkçe
2024
Histoloji ve EmbriyolojiAnkara Yıldırım Beyazıt ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HABİBE MELTEM ÖZGÜNER
PROF. DR. ELÇİN ÖZGÜR BÜYÜKATALAY