Embriyonik kök hücre ve insülin taşıyan lipozom, nanopartikül ve kohleat formülasyonlarının geliştirilerek etkinliğinin incelenmesi
Development and investigation of efficiency of embryonic stem cell and insulin-loaded liposome, nanoparticle and cochleate formulations
- Tez No: 399076
- Danışmanlar: PROF. DR. ZELİHAGÜL DEĞİM
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 259
Özet
Diyabet, pankreastaki beta hücrelerinden insülin yapımının yetersiz oluşu ya da üretilen insülinin yeterince etki göstermemesi nedeni ile karbonhidrat, yağ, protein metabolizmasındaki bozuklukla karakterize kronik bir hastalıktır. Diyabet tedavisindeki en önemli araçlardan biri olan insülin Langerhans adasının beta hücreleri tarafından salınır. Diyabette bu hücreler hasar gördüğü için farklı kaynaklardan yeniden eldesi ile yeni hücrelerin oluşturulması düşüncesi kök hücre çalışmalarına hız kazandırmıştır. Embriyonik kök hücreler sınırsız olarak çoğalabilme yeteneğinden dolayı diyabet, miyokart enfarktüsü ve parkinson gibi hemen hemen bütün dejeneratif ve hasar görmüş dokuların yenilenmesinde kullanılabilmektedir. Çalışmamızda, beş farklı formülasyon (lipozom, pegile lipozom, nanokohleat, pegile nanokohleat ve nanopartikül) hazırlandı. İnsülin ve fare embriyonik kök hücre ile hazırlanan lipozomal ve nanopartiküler formülasyonların glukoz ve streptozosin çözeltisi ile diyabetik hale getirilmiş pankreatik beta TC hücreleri ve farelere uygulanmasının ardından hem in vitro hem de in vivo etkinliği incelendi. Formülasyonlarda kullanılacak maddelerin farklı derişimleri için MTT testleri yapıldı. Hazırlanan lipozom, nanokohleat ve nanopartikül formülasyonlarının karakterizasyonu (morfoloji, partikül büyüklüğü, zeta potansiyel ve yükleme etkinliği) ve üç farklı sıcaklıkta (4⁰C ve 25⁰C) stabilite çalışmaları yapıldı. EKH ile hazırlanan formülasyonlarda yükleme etkinliği insülin ile hazırlanan formülasyonlardan farklı olarak hücre sayımı ve western blot yöntemi ile de analiz edilmiştir. İnsülinin pankreatik beta TC hücre kültürlerinden geçiş özellikleri, formülasyonlardan salım kinetikleri kıyaslanarak incelendi. Hücre kültürü geçiş çalışmaları sonucunda geçirgenlik katsayıları ve elektriksel dirençleri hesaplandı. İnsülin yüklü lipozomlarda en yüksek geçirgenlik katsayısı ve en düşük direnç elde edildi. Diyabetik hale getirilmiş hücrelere formülasyonların uygulanmasının ardından glukoz ve insülin miktarlarındaki değişimler kit ile ölçüldü. İn vivo çalışmalarda insülin yüklü formülasyonların i.p. uygulanmasının ardından 24 saat boyunca belirli zaman aralıklarında alınan örneklerden glukoz ve insülin miktar tayini yapıldı. İnsülin yüklü formülasyonların aynı örnek alma zamanlarında hücre geçiş çalışmaları ile kan örnekleri arasındaki in vivo-in vitro korelasyon incelendi. İnsülin yüklü lipozomlarda en yüksek korelasyon katsayısı bulundu (r2=0,967). Diyabet tedavisindeki yeni yaklaşımlardan olan kök hücre ile hazırlanan formülasyonlar hem i.p. hem de pankreas içi uygulandı ve farelerin pankreasları histopatolojik olarak incelendi. Özellikle lipozomlar ile Langerhans adacık sayısı ve kapladığı alan bakımından en yüksek sonuçlar elde edilmiş (p
Özet (Çeviri)
Diabetes is a chronic disease that takes place because of insufficient insulin build in the beta cells located in pancreas or inability of the insulin to act resulted in an imbalance in the carbohydrate, lipid and protein metabolism. Insulin is released by the beta cells of the islands of Langerhans that is one of the most important tools in the treatment of diabetes. Because of these cells are damaged in diabetes, the stem cell studies are increasing rapidly due to regain of beta cells from different sources. Embryonic stem cells (ESCs) because their ability to proliferate without limitation, may be used in the regeneration of damaged tissue. such as diabetes, myocardial infarction and Parkinson. In our study, we used five (liposome, Peg-liposome, nanocochleate, Peg-nanocochleate and nanoparticle) different formulations. After administration of liposomal and nanoparticulate formulations prepared with insulin and mouse embryonic stem cells to diabetic pancreatic beta TC cells and mice by glucose and streptozocin solution, activity was investigated both in vitro and in vivo. For different concentrations of the substance to be used in the formulations, MTT assays were performed. Characterisation (morphology, particle size, zeta potential and encapsulation efficieny) of liposomes, nanocochleates and nanoparticulate formulations were performed and stability was investigated under three different conditions (4⁰C and 25⁰C). Encapsulation efficiency of ECHs formulations were calculated by cell counting and were also analyzed by western blotting unlike insulin formulations. Permeation properties of insulin through pancreatic beta TC cell line, release kinetics of formulations were investigated and compared. The permeability coefficient and electrical resistance of formulations were calculated after cell culture permeation studies. The highest permeability coefficient and lowest resistance is obtained from insulin-loaded liposomes. After applying formulations to diabetic pancreatic beta TC cell, changes in glucose and insulin concentrations were measured with the kit. In in vivo studies, after the intraperitonal administration of insulin-loaded liposome formulation, samples were assayed for glucose and insulin amounts at determined time periods during 24 hours. At the same sampling time, calculated insulin amount from cell transport studies and blood samples were examined for the in vivo-in vitro correlation. Insulin-loaded liposomes were found in the highest correlation coefficient (r2=0,967). Formulations that were prepared with new approaches in the treatment of diabetes stem cells administered both intraperitonally and intrapancreas and pancreases of mice were examined histopathologically. The highest results (p
Benzer Tezler
- Assessment of the effects of melatonin on the funtional deficits induced by cellular stress in obese donor derived mesenchymal STEM cells
Melatonin'in obez donor mezenkimal kök hücrelerinde hücresel strese bağlı olarak oluşan fonksiyon bozuklukları üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi
ECE GİZEM POLAT
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİMA SUSANNA FAUSTINA AERTS KAYA
- PID-PC'lerden izole edilen eksozomların pankreas kanseri üzeine etkisi
Effects of exosomes isolated from PID-PCs on pankreatic cancer
İMREN HASOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞE KARATUĞ KAÇAR
- Fare embriyonik kök hücrelerinden kondrosit farklılaştırılması ve mezenkimal kök hücrelerden farklılaştırılan kondrositlerle karşılaştırılması
Embriyonic stem cell differantation to chondrocytes and compare the chondrocytes were differantated from bone marrow stem cell
GÜLŞAH KÜRKÇÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyomühendislikEge ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. H. SEDA VATANSEVER
PROF. DR. S. İSMET DELİLOĞLU GÜRHAN
- Pankreatik adacık mikro çevresinde kültüre edilen fare embriyonik kök hücrelerin insülin üreten hücrelere farklılaşma potansiyeli
Insulin producing cell differentiation potential of mouse embryonic stem cells cultured in pancreatic islet microenviroment
İREM YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyolojiKocaeli ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. AYLA EKER SARIBOYACI
- Tet-on sistemi ile metil-CPG-bağlanma bölgesi 3 (MBD3) ekspresyonu susturulmuş fibroblast hücrelerinin embriyonik kök hücre kaynaklı eksozomlar aracılığı ile pluripotent hücrelere programlanması
Reprogramming of methyl-cpg binding domain (MBD3)/tet-on silenced fibroblast cells BY embryonic stem cell derived exosomes into pluripotent cells
CEREN ÖZEL