Hipokampal mikroglia aktivasyonu ile serum S100B düzeyi arasındaki olası korelasyonun sıçanlarda lityum-pilokarpin ile oluşturulan deneysel bir status epileptikus modelinde incelenmesi ve minosiklinin etkilerinin araştırılması
Investigation of the putative correlation between hippocampal microglia activation and serum S100B level lithium – pilocarpine induced status epilepticus model in rats and evaluation of the effects of minocycline
- Tez No: 409362
- Danışmanlar: PROF. DR. GÖKHAN KURT
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Nöroşirürji, Neurosurgery
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Nöroşirürji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 130
Özet
Bu çalışmanın amacı hipokampal mikroglia aktivasyonu ile serum S100B düzeyi arasındaki olası korelasyonun lityum-pilokarpin ile oluşturulan deneysel bir status epileptikus modelinde incelenmesi ve minosiklin'in etkilerinin araştırılmasıdır. Deneylerde 12 haftalık 200-250 g arası ağırlığa sahip erkek Sprague-Dawley sıçanlar kullanıldı (n=24). Sıçanlar, 4 gruba ayrıldı. Deney grubunda lityum-pilokarpin ile SE indüklenmiş hayvanlar yer aldı. Deney hayvanlarına pilokarpin enjeksiyonundan 24 saat önce lityum klorid uygulandı (127 mg/kg. i.p.). Pilokarpin tek doz olarak uygulandı (30 mg/kg, i.p.). Ayrıca pilokarpin'den 30 dakika önce kolinerjik yan etkileri ortadan kaldırmak maksadı ile sıçanlara metilskopolamin-bromid (1mg/kg) verildi. Nöbetler Racine skalasına göre derecelendirildi. SE'nin başlangıcı süregelen nöbet aktivitesinin başlangıcı olarak tanımlandı (nöbetler arasında normalleşme olmaksızın) . SE oluşan sıçanlarda, SE süresi i.p. diazepam (10 mg/kg) ile kontrol altına alındı. Deney grupları aşağıdaki şekilde planlanmıştır: Grup 1(Kontrol, n=6): Bu gruptaki hayvanlara herhangi bir işlem uygulanmadı. Grup 2 (Sham,n=6): Sıçanlara lityum, metilskopolamin ve pilokarpin yerine salin verildi. Salin enjeksiyonundan 2 saat sonra tek doz diazepam enjekte edildi. Grup 3 (Status Epileptikus): Sıçanlara pilokarpin enjeksiyonundan 24 saat önce lityum klorid uygulandı (127 mg/kg. i.p.). Pilokarpin tek doz olarak uygulandı (30 mg/kg, i.p.). Ayrıca hayvanlara metilskopolamin de verildi. Nöbetleri sonlandırmak için ilk pilokarpin dozundan 60 dakika sonra diazepam ( 10 mg/kg i.p. ) uygulandı. 3, 4, 5, 6 ve 7. günlerde bütün sıçanlara ölüm oranını azaltmak için 09:30-10:30 ve 16:30- 17:30 zaman dilimlerinde günde 2 defa 5 ml subkutan enjeksiyon ile salin ve gavaj ile yaklaşık 1 ml TPN solüsyonu verildi Grup 4 (Status Epileptikus + Minosiklin): Grup 3'deki aynı deney protokolü minosiklin varlığında tekrarlandı. Minosiklin 0.1 M fosfat tamponu içerisinde çözülerek (pH:7.4), i.p olarak 3, 4, 5, 6 ve 7. günlerde 50 mg/kg dozunda uygulandı. Lityum uygulamasını takiben 8. günde sıçanların tamamının hipokampusları çıkarıldı ve dorsal hipokampusta OX-42 ve GFAP ekspresyonu immünhistokimyasal yöntemlerle değerlendirildi. Ayrıca, hipokampuslar çıkarılmadan önce hayvanların periferik venlerinden kan alınarak S100B tayini yapıldı. Bu çalışmanın sonucunda, Kontrol grubuna göre SE ve SE + Minosiklin gruplarındaki kan S100B düzeylerindeki yüksekliğin, literatüre bakıldığında eksitotoksik hasar sonucu glialar tarafından salınan S100B' nin , sürmekte olan hasarı ve buna karşı gelişen glial reaktiviteyi yansıtmasından kaynaklandığını düşündürdü. Ayrıca Kontrol grubundaki CA1'de OX42 (+) mikroglia sayısı ve DG'de GFAP (+) astrosit sayısının SE grubundan anlamlı olarak daha düşük bulunması ise epilepsi gibi nörodejeneratif hastalıklarda nöroinflamatuar süreçlerin tetiklendiği mikroglial aktivasyonun varlığını düşündürdü.
Özet (Çeviri)
The purpose of this study is the investigation of the effect of Minocycline and the possible correlation between hippocampal microglial activation and S100B serum in an experimental status epilepticus model. In the experiments, 12 week old male Sprague-Dawley rats weighting 200 to 250 grams were used (n=24). Rats were separated in to four groups. Animals induced with lithium and pilocarpin was used in the experiment group. Lithium chloride was given to the experimental animals 24 hours before the injection of pilocarpin (127 mg/kg. i.p.). One dose of Pilocarpin was applied (30 mg/kg, i.p.). Besides that methilschoplamine-bromide (1mg/kg) was given to the animals 30 minutes before pilocarpin injection to remove the cholinergic side effects. Seizures were degreed due to Racine scale. The beginning of SE was defined as the start of lasting seizure activity (without normalizing between seizures). SE time was taken under control using diazepam (30 mg/kg, i.p.) in the rats having SE. Experiment groups are planned as follows: Group 1 (Control,n=6): There was no proceeding on the animals in this group. Group 2 (Sham,n=6): Saline was given to the animals instead of Lithium, methilescopolamine. One dose of diazepam was injected after 2 hours of Saline injection. Group 3 (SE): Lithium Chloride (127 mg/kg. i.p.). was applied to the animals 24 hours before one dose of pilocarpin injection(30 mg/kg, i.p.). Methilescopolamine was also given. Diazepam (10 mg/kg i.p. ) was applied after 60 minutes of pilocarpin injection to end the seizures. At the days of 3, 4, 5, 6 and 7, subcutaneous injection with 5 ml saline and gavage and 1 ml TPN solution is given to the rats two times a day between 09:30-10:30 and 16:30- 17:30 to reduce the death rate. Group 4 (SE + minocycline): the experiment protocol in the group 3 was repeated with the existence of minocycline. Minocycline dissolved in 0.1 M phosphate buffer (pH:7.4, i.p ) was applied with a 50 mg/kg dose at the days 3, 4, 5, 6 ve 7. After Lithium application at eight day all the hippocampuses of the rats was removed and OX-42 and GFAP expression in the dorsal hippocampus was evaluated with immunohistochemical methods. Besides, determination of S100B was performed by taking blood from peripheral veins before the removel of hippocampuses. As a result of this, the high levels of S100B at SE and SE+ minocycline groups with respect to the control group suggest that S100B released from glias as a result of excitotoxic injury is the projection of the ongoing injury and glial reactivity developing against it referring to the literature. Also the significant low level of OX42 (+) microglia number and GFAP (+) astrocyte number in the control group at CA1 with respect to SE group suggests the presence of microglial activation triggered by neuroinflammatory processes in neurodegenerative diseases like epilepsy.
Benzer Tezler
- Ratta deneysel status epileptikus modelinde gap junctıon inhibitörlerinin hipokampal dejenerasyon üzerine etkileri ve serum S100B düzeyi ile ilişkisi
Effects of gap junction inhibitors on hippocampal degeneration and their relationship with serum S100B level in rat experimental status epilepticus model
AHMET EREN SEÇEN
- Neuroprotective effects of n-acetylcysteine in an acute model of LPS induced neuroinflammation
Akut LPS modelinde n-asetilsisteinin nöroprotektif etkileri indüklenmiş nöroinflamasyon
JUDİ KESEBİ
- Alzheimer hastalığında uykunun beyin lenfatik drenaj sistemi üzerindeki etkisinin plazma proteom profili ve nörotoksisite açısından araştırılması
Investigation of the effect of sleep on brain lymphatic drainage system in alzheimer's disease concerning plasma protein profile and neurotoxicity
NAGİHAN MANTAR
Doktora
Türkçe
2022
Nörolojiİstanbul Medipol ÜniversitesiSinir Bilimi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. LÜTFÜ HANOĞLU
PROF. DR. GÜRKAN ÖZTÜRK
- Sıçanlarda intrahipokampal beta amyloid (1-42) uygulamasının öğrenme ve bellek fonksiyonları üzerine etkisi: NO/NOS sistemi ve mmikroglial aktivasyon ile ilişkisi
Effects of intrahippocampal beta amyloid (1-42) injection on spatial learning and memory in rats: Involvement of NO/NOS system and microglial activation
FERİHAN ÇETİN
- Lipopolisakkarit ile indüklenen sıçan nöroinflamasyon modelinde hidrojen sülfür tedavisinin etkilerinin araştırılması
Investigating the effects of hydrogen sulfide treatment on a lipopolysaccharide-induced rat model of neuroinflammation
AYŞE KÜBRA KİBAR GÜZİN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2024
Eczacılık ve FarmakolojiGazi ÜniversitesiTıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÖKÇE SEVİM ÖZTÜRK FİNCAN
DOÇ. DR. ERGİN DİLEKÖZ
