İnsan trombosit gamma-glutamil transferazın karakterizasyonu
Characterization of human platelet gamma-glutamyl transferase
- Tez No: 44812
- Danışmanlar: PROF. DR. TURAY YARDIMCI
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1995
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 70
Özet
Gamma glutamil transferaz (GGT) glycoprotein yapısmda bir membran proteinidir. GGT gamma-glutamil artıklarının amino asitlere, dipeptidlere ve suya transferinde, gtutatyon metabolizmasında ve LTC4'ün LTD/j'e dönüşümünde rol alır. Bu çalışmada GGT insan trombositlerinden Triton X-100 ile solubiüze edilerek karakterize edildi. Kinetik çalışmalar için 7 normal kişiden alman kanlardan elde edilen trombosit havuzu kullanıldı. Substrat gamma- glutamil p-nitroanilid için Vmax: 100 mU/lO^ Trombosit, Km: 2.08 mmol/L olarak, akseptör glisüglisin için Vmax : 45.45 mU/lO^ Trombosit, Km : 15.87 mmol/L olarak saptandı, insan trombosit GGT'sinin optimum pH'sı 8.2, optimum temperatür 37 1 olarak gözlendi Enzimin 56°C de termal stabilitesi ölçüldüğünde 30 dakika inkübasyonu takiben aktivitenin %36 oranında azaldığı tespit edildi Inhibitor çalışmaları sonucunda borat varlığında L-serinin enzimin kompetetif inhibitörü olduğu ve 5 mmol/L L-serin konsantrasyonunda GGT aktivitesinin %93 inhİbe olduğu görüldü. L-serin için inhibitor sabiti (Kj) 30 umol/L olarak hesaplandı. Bromkresol yeşilinin ise enzimin nonkompetetif inhibitörü olduğu ve O.lmmol/L konsantrasyonda GGT aktivitesini %34 inhibe ettiği gözlendi Enzimin transfer reaksiyonu için ping pong mekanizmasını kullandığı saptandı Trombosit GGT'si, Triton X-100 ile solubilizasyon, gel filtrasyon, iyon değiştirici kromatografi afinite kromatografi yöntemleri ile başlangıca oranla 10 kez saflaştinldı. Poliakrilamid gel elektroforezi (PAGE) ile trombosMerde GGT'nin tek bir izoenziminin olduğu saptandı.
Özet (Çeviri)
Gamma- glutamyl transferase (GGT) is a membrane glycoprotein which is involved in the transfer of gamma glutamyl residues to amino acids, to dipeptides and to water, in glutathione metabolism and in formation of LTD4 from LTC4 of the leucotriens. In this work GGT was solubilized with Triton X-100 from human platelet membranes and was characterized. Kinetic studies were performed in pooled platelets of 7 normal subjects. For gamma glutamyl p-nitroanilide as the substrate, Vmax was 100 mU/ 10^ pits and Km was 2.08 mmol/L. For grycylglycine as the acceptor, Vmax was 45.45 mU/10^ pits and Km was 15.87 mmol/L. Its optimum pH and optimum temperature were 8.2 and 37°C, respectively. The thermal stability tests showed 36% GGT activity decrease after 30 min incubation at 56° C. In the presence of borate, L- serine was found to be competitive inhibitor and GGT activity was inhibited 93% with L-serine at a concentration of 5 mmol/L. Inhibition constant (Kj) was calculated as 30 umol/L for L-serine. Bromcresol green was a noncompetitive inhibitor and enzyme was inhibited 34% with bromkresol green at a concentration of 0. 1 mmol/L. GGT showed ping pong mechanism for transfer reactions. Only one isozyme was observed through poryacrylamide gel electrophoresis (PAGE). GGT was purified 10 times by Triton X-100 solubilization, gel filtration, ion exchange chromatography and affinity chromatography.
Benzer Tezler
- Gestasyonel ve pregestasyonel diyabetes mellitusu olan gebelerde plazma asprosin düzeyinin gebelik prognozu ile ilişkisi
The relationship between plasma asprosin levels and pregnancy prognosis in pregnant women with gestational and pregestational diabetes mellitus
ÖZGE DOGANAY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2024
İç HastalıklarıSağlık Bilimleri Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İHSAN ATEŞ
- Çocuklarda akut karaciğer yetmezliği (etiyoloji, seyir ve seyire etki eden risk faktörleri)
Acute liver failure in children (Etiology, outcome and prognostic risk factors)
ZEREN BARIŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2008
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıHacettepe ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. İNCİ NUR SALTIK TEMİZEL
- Mobil telefon kullanımına bağlı oluşan 900-1800 mhz radyo frekans dalgalarının meydana getirdiği elektromanyetik alanın iliak kanat kemik mineral yoğunluğuna etkisi
The effect of electromagnetic fields on bone mineral density of iliac bone produced by 900-1800 mhz radio frequency waves dependent on cellular phone usage
BEŞİR ANDAÇ AKSOY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2006
Ortopedi ve TravmatolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. NEVRES HÜRRİYET AYDOĞAN
- Derin ven trombuslarının teşhisi ve sintigrafik görüntülenmesi amacıyla geliştirilen ilaç taşıyıcı sistemler üzerinde in vitro ve in vivo çalışmalar
In vitro and in vivo studies on drug delivery systems developed for diagnosis and scintigraphic imaging of deep vein thrombosis
SUNA ERDOĞAN
Doktora
Türkçe
2001
Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe ÜniversitesiRadyofarmasi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. A. YEKTA ÖZER
- Sıçanlarda pikrotoksin ile oluşturulan epilepsi modelinde rutin'in etkinliğinin araştırılması
The investigation of the efficiency of rutin in the picrotoxin-induced epilepsy model in rats
ATAKAN ÖZTÜRK
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
FizyolojiMustafa Kemal ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. FATİH SEFİL