Bakteriyel kökenli ekstraselüler biyopolimerlerin protein adsorpsiyon davranışlarının incelenmesi için imak uygulamaları
Imak applications for the investigation of protein adsorption behaviors of bacterial originated extracellular biolopolimers
- Tez No: 526539
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ODABAŞI, PROF. DR. FATMA GÜRBÜZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Aksaray Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 46
Özet
Bu çalışmada, endüstriyel açıdan son derece önemli bir enzim olan α-amilazın efektif bir yöntemle ortamdan saflaştırılması için afinite kromatografisi metotlarından popüler bir yöntem olan immobilize metal afinite kromatografisinden (İMAK) yararlanılmıştır. Polimerizasyon için, monomer olarak poli(2-hidroksietil metakrilat) (PHEMA), ko-monomer olarak glisidil metrakrilat (GMA), çapraz bağlayıcı olarak N,N´-metilen-bis-akrilamid, metal bağlayıcı olarak ekstraselüler polimerik maddeler (EPS), başlatıcı/aktivatör olarak N,N,N´,N´-tetrametilen diamin (TEMED)/amonyum persülfat (APS) ve gözenek oluşturucu olarak da etanol kullanılmıştır. Radikal kopolimerizasyon yöntemiyle PHEMA bazlı kompozit membranlar, petri kabında sentezlenmiştir. Daha sonra Cu2+ iyonları membranlara EPS'ler üzerinden takılmıştır. Hazırlanan Cu2+-takılı EPS katkılı membranlar taramalı elektron mikroskobu (SEM), şişme testleri ile karakterize edilmiştir. Sulu ortamdan α-amilaz adsorpsiyonuna pH'nın, α-amilaz başlangıç derişiminin, sıcaklık ve iyonik şiddet gibi parametrelerin etkisi incelenmiştir. Cu2+-takılı EPS katkılı polimer membranlar üzerine (Cu2+-EPS-EM) en yüksek adsorpsiyon kapasitesi 25ºCˈda pH 5 sodyum asetat tamponunda, 2 mg/mL'lik başlangıç α-amilaz derişiminde 54,2 mg/g polimer, olarak belirlenmiştir. Ayrıca, Cu2+-EPS-PM üzerine enzimin defalarca adsorplanıp desorplanabildiği belirlenmiştir.
Özet (Çeviri)
In this work, IMAC, a popular method of affinity chromatography, has been utilized effectively, for the purification of α-amylase, which is an important enzyme industrially. For the polymerization, poly (2-hydroxyethyl methacrylate) as monomer, glycidyl methacrylate (GMA) as co-monomer, N,N'-methylene-bis-acrylamide as crosslinker, extracellular polymeric materials (EPS) as metal binding, N,N,N ',N'-tetramethylenediamine (TEMED)/ammonium persulfate (APS) as activator/initiator and ethanol as porogen were used. PHEMA based composite membranes were synthesized in the petri dish by radical copolymerization method. Then, Cu2+ ions were attached to the membranes via EPSs. Prepared Cu2+ attached EPS-mixed membranes were characterized by scanning electron microscopy (SEM), swelling tests. The influence of parameters such as pH, α-amylase starting concentration, temperature, and ionic strength in α-amylase adsorption from aqueous medium is investigated. The highest adsorption capacity on Cu2+attached-EPS mixed polymer membranes (Cu2+-EPS-PM) was determined as 54,2 mg /g polymer at pH 5 sodium acetate buffer at 25°C in an initial α-amylase concentration of 2 mg/mL. Furthermore, it has been determined that the enzyme can be adsorbed and desorbed repeatedly on Cu2+-EPS-PM.
Benzer Tezler
- Development of enzyme-based coating methods for the prevention of bacterial biofilm formation
Bakteriyel biyofilm oluşumunu engellemeye yönelik enzim bazlı kaplama yöntemlerinin geliştirilmesi
ABDULLAH SERT
Doktora
İngilizce
2014
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER
PROF. DR. MELEK TÜTER
- DNA saflaştırılmasına yönelik bakteriyel kökenli ekstraselüler biyopolimer kompozit kriyojellerin İMAK uygulamaları
IMAC applications for DNA purification of bacterial originated extracellular biopolymeric composite cryogels
BURCU ÖNAL
- Sinop ili toprak ve su örneklerinden izole edilen Bacillus türlerinin moleküler karakterizasyonu ve bazı enzim aktivitelerinin belirlenmesi
Determination of some enzymes activities and molecular characterization of Bacillus species isolated from soil and water samples in Sinop region
HİLAL KOYUNCU
- Deneysel parkinson oluşturulmuş ratlarda Saccharomyces boulardii ve bakteriyel kökenli probiyotiklerin etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of saccharomyces boulardii and bacterial origin probiotics in experimental parkinson's disease induced rats
EDA DUYGU İPEK
Doktora
Türkçe
2020
AnatomiAydın Adnan Menderes ÜniversitesiAnatomi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HULKİ BAŞALOĞLU
- Beyaz peynir üretiminde nitrat-nitrit tuzlarının kullanılması ve kalıntı düzeyleri üzerine araştırmalar
The Use of nitrate-nitrite salts in white cheese production and investigations on their residue levels
NURŞEN BAYRAKTAR
Doktora
Türkçe
1994
Veteriner Hekimliğiİstanbul ÜniversitesiBesin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZER ERGÜN