Hansenula polymorpha mayasında metanol oksidaz aktivitesinin karakterizasyonu, metanol oksidazın izolasyonu ve saflaştırılması
Characterization of methanol oxidase activity, isolation and purification of methanol oxidase in hansenula polymorpha
- Tez No: 67590
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. AYTEN SAĞIROĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1997
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Trakya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 71
Özet
ÖZET Bu çalışmada Hansenula polymorpha A16 metilotrofik mayası kullanılarak içerdiği metanol oksidaz (MOX) enzimi konsantrasyonunu bağıl maksimum konsantrasyona ulaştırmak, dolayısıyla MOX aktivitesini artırmak amacıyla uygun koşulların optimizasyon denemeleri yapıldı. Uygun optik yoğunluk (ODeoo) yaklaşık 1-1,5 arasında bulundu. Uygun substrat (Metanol) konsatrasyonu 100-200 pl arasında belirlendi. Uygun inkübasyon zamanı 50 dakika, inkübasyon sıcaklığı 25°C, uygun pH aralığı 6-8 olarak belirlendi. Uygun koşullar belirlendikten sonra bu şartlar altında kültürü yapılarak elde edilen maya ekstratından MOX enzimini saflandırma aşamalarına geçildi. %30-60 aralığında (w/v) amonyum sülfat ile tuz çöktürmesi yapıldı. Sonra tuz fazlasını gidermek için 50 mM fosfat tamponuna karşı 24 saat süreyle dializ yapıldı. SDS-jel elektroforezi ile MOX enzimnin her alt ünitesinin molekül ağırlığı yaklaşık 68000 olarak belirlendi.
Özet (Çeviri)
1 7 II SUMMARY In this study optimization of the compression the MOX enzyme for methylotrophic yeast Hansenula polymorpha A16 was carried out. It was found that at an ODeoo=1-1,5, 100-200 jxL methanol concentration, 50 minutes incubation time, 25°C incubation temperature and pH=6-8 were the most suitable conditions to active the maximum activity of MOX. After determination of the optimized conditions is the MOX enzyme was purified using 30-60 % amonium sulphate then the protein dialyses against 50 mM phosphate buffer. SDS gel electrophoresis about that each subunit "of MOX enzyme was about 68000 Da.
Benzer Tezler
- SE-600 dikey dilim jel elektroforezinde proteinlerin izoelektrik odaklanması
SE-600 vertical slab gel electrophoresis by proteins isoelectric focusing
ALEV SUNAY
- Düşük molekül ağırlıklı polipeptidlerin poliakrilamid jel elektroforeziyle ayrılması
Seperation of the low molecular weight polypeptides with polyyacrylamide gel electrophoresis
İSMAİL KILIÇ
- Metilotrofik mayaların izolasyonu ve tanımlanması
Izolation and identification of methylotrophic yeasts
ASUMAN ÖZTÜRK
- Isolation and characterization of k5 type yeast killer toxin
K5 tipi maya toksik proteinlerinin izolasyonu ve karakterizasyonu
DİDEM ERDOĞDU BULUT
Yüksek Lisans
İngilizce
2001
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİH İZGÜ
