Lizil oksidaz enzimi saflaştırılması ve biyoteknolojik uygulamaları
Lysyl oxidase enzyme purification and biotechnological applications
- Tez No: 716042
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZLEM ÜNLÜER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyoteknoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 71
Özet
Bu çalışmada, sığır aortundan lizil oksidaz (LOX) enzimi yeni bir kriyojel kolon geliştirilerek saflaştırılmıştır. Bu tez kapsamında ilk olarak metakriloil benzatriazol (Ma-Bt) temelli kompleksler sentezlenmiştir. Ardından, sentezlenen kompleksler 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) tabanlı kriyojel kolona tutturularak LOX enzimi saflaştırılması için yeni bir kromatografik ayırım kolonu geliştirimiştir. Sentezlenen komplekslerin karakterizasyonu Fourier Taramalı Infrared (FTIR) Spektroskopisi, Nükleer Manyetik Rezonas (NMR) Spektroskopisi, kriyojel kolonun karakterizasyonu ise FTIR, Taramalı Elektron Mikroskop (SEM) analizi ve şişme testleriyle yapılmıştır. Sığır aortundan elde edilen ham ekstrakttan LOX enzimi, sentezlenen kriyojel kolonun Hızlı Protein Sıvı Kromatografisi (FPLC)'nde ayırım kolonu olarak kullanılmasıyla saflaştırılmıştır. Saflaştırılan enzimin protein içeriği Bradford yöntemiyle tayin edildikten sonra, saflaştırılan enzimin aktivitesi ve optimum aktivite koşulları belirlenmiştir. Dairesel dikroizm (CD) spektroskopisiyle, saflaştırılan enzimin ikincil ve tersiyer yapısındaki değişim izlenmiş ve enzimin saflığı SDS-PAGE analiziyle belirlenmiştir. Yapılan çalışmada, LOX enziminin kromatografik olarak saflaştırılması için etkili ve kolay uygulanabilir bir kolon dolgu materyali geliştirilmiştir. Geliştirilen yöntemle saflaştırılan LOX enziminin, laboratuvar koşullarında elastinin çapraz bağlanmasında etkili olduğu görülmüştür. Bu açıdan değerlendirildiğinde, LOX enziminin farklı biyoteknolojik uygulamalarda da kullanılabileceği öngörülmektedir.
Özet (Çeviri)
In this study, lysyl oxidase (LOX) enzyme has purified from bovine aorta by developing a new cryogel column. In the thesis, firstly methacryloyl benzotriazole (Ma-Bt) based complexes have synthesized. Then, a new chromatographic separation column has developed for LOX enzyme purification by embedding the synthesized complexes to 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) based cryogel column. The synthesized complexes have characterized by Fourier Scanning Infrared (FTIR) Spectroscopy and Nuclear Magnetic Resonance (NMR) Spectroscopy. The cryogel column has characterized by FTIR, Scanning Electron Microscope (SEM) analysis and swelling tests. LOX enzyme has purified from the crude extract obtained from bovine aorta by using the synthesized cryogel as the separation column in Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC). Then, determination of the protein content of the purified enzyme by Bradford method, activity of the purified enzyme and the optimum enzyme activity conditions have investigated. Change in the secondary and tertiary structure and the purity of the purified enzyme have investigated by Circular Dichroism (CD) spectroscopy and SDS-PAGE analysis, respectively. In this study, an effective and easily applied column material has developed for the chromatographic purification of the LOX enzyme. It has been observed that the LOX enzyme purified by the developed method is effective in cross-linking of elastin under laboratory conditions. From this point of view, it is predicted that the LOX enzyme can be used in different biotechnological applications.
Benzer Tezler
- Muşmuladan (Mespilus germanica) izole edilen polifenol oksidaz enziminin aktivitesi üzerine amino asitlerin inhibisyon etkileri
Inhibition effects of amino acids on the activity of polyphenol oxidase enzyme isolated from medlar (Mespilus germanica)
EREN ÖZDEMİR
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyokimyaYıldız Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİNE KARAKUŞ
DR. ÖĞR. ÜYESİ ÇİĞDEM BİLEN
- Rational design of hydro- and organo-cryogels
Hidro- ve organo-kriyojellerin rasyonel tasarımı
BERKANT YETİŞKİN
- Meme kanseri olgularında shear-wave elastografi değerleri ile lizil oksidaz gen ekspresyonu arasındaki korelasyonun değerlendirilmesi
The correlati̇on between shear-wave elastography values and gene expressi̇on of LYSYL oxi̇dase in breast cancer patients
YASEMİN KAYADİBİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
Radyoloji ve Nükleer Tıpİstanbul ÜniversitesiRadyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET HALİT YILMAZ
- Pulmoner amfizemde lizil oksidaz enzimlerinin sentezindeki değişimler
Alteration in the synthesis of lysyl oxidase enzymes in pulmonary emphysema
NEZİHA BEŞİKTEPE
- L-lizin tayini için karbon nanomalzemelere dayalı amperometrik enzim elektrotlar hazırlanması
Construction of amperometric enzyme electrodes based on carbon nanomaterials for L-lysine determination
CEREN KAÇAR
