Geri Dön

Farklı hücre tiplerinin fotobiyomodülasyon ve askorbik asit varlığında hücre tabakası oluşturma potansiyellerinin incelenmesi

Examination of the potential of different cell types to form cell sheet in the presence of ascorbic acid and photobiomodulation

PDF İndir

  1. Tez No: 721520
  2. Yazar: HATİCE DEMİR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyomühendislik Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 108

Özet

Bu çalışma“Farklı hücre tiplerinin fotobiyomodülasyon ve askorbik asit varlığında hücre tabakası oluşturma potansiyellerinin incelenmesi”başlıklı Lisansüstü Tez Projesi (FYL- 2020-18707) kapsamında Hacettepe Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinasyon Birimi tarafından desteklenmiştir. Gerçekleştirilen tez çalışması kapsamında farklı morfolojik yapılara sahip hücrelerle polikromatik ışık kaynağı (600-1200 nm dalga boyunda) ve askorbik asit (vitamin C, VC) varlığında hücre tabakası elde edilmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla üç tür hücre seçilmiştir. Bu hücreler; insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal kök hücreleri (GK-MKH), insan dermal fibroblast hücreleri (BJ) ve insan keratinosit epitel hücreleri (HS2) dir. Çalışmanın ilk kısmında GK-MKH'lerin karakterizasyon çalışmaları tamamlanmış ve bu hücrelerden hücre tabakası elde edebilmek için kültür ortamına 20 µg/mL VC eklemesi yapılmıştır. Daha sonra bu hücreler için uygun olan fotobiyomodülasyon (PBMT) parametreleri belirlenerek (20 cm mesafe, 2 dk ve gün aşırı uygulama) hücre tabakaları üretilmiştir. Sonuçta VC grubunda 5-7. günler arası, PBMT ve PBMT+VC gruplarında 6-7. günler arasında hücre tabakaları elde edilmiştir. Daha sonra elde edilen bu hücre tabakalarına ait karakterizasyon çalışmaları yapılmıştır. Karakterizasyon çalışmalarında hücre tabakalarının hücre dışı matriks (ECM) yapısı, hücre morfolojisi, çekirdek yapısı ve farklı gen ifade düzeyleri incelenmiştir. Bu kapsamda yapılan immünofloresan ve Hematoksilen- Eozin (H&E) boyama sonuçları en yoğun çekirdek yapısının PBMT+VC grubuna ait olduğunu göstermektedir. Makroskobik ve mikroskobik gözlemler de en kalın ve opak hücre tabaka yapısının, PBMT+VC grubuna ait olduğunu göstermiştir. Gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) analiz sonuçlarına göre VC ve PBMT varlığı ECM yapısını arttırmış, kök hücre gen ifadelerini anlamlı düzeyde etkilememiş, fakat PBMT osteojenik gen ifade düzeylerini (OCN, RUNX2) arttırmıştır. BJ fibroblast ve HS2 hücre hattı için de karakterizasyon çalışmaları yapılmıştır. BJ fibroblast hücre hattı ile hücre tabakası elde edebilmek için kültür ortamına 60 µg/mL vitamin C eklemesi yapılmış ve bu hücreler için uygun olan PBMT parametreleri belirlenerek (20 cm mesafe, 5 dk ve gün aşırı uygulama) hücre tabakaları üretilmiştir. Bu hücre hattı için PBMT grubunda hücre tabakası elde edilemezken, VC ve PBMT+VC grubunda 6-7. günlerde elde edilen hücre tabakaları arasında özellikler açısından anlamlı farklılıklar gözlemlenmemiştir. HS2 hücre hattı ile hücre tabakası elde edebilmek için kültür ortamına 20 µg/mL vitamin C eklemesi yapılmış ve bu hücreler için uygun olan PBMT parametreleri belirlenerek (20 cm mesafe, 5 dk ve gün aşırı uygulama) hücre tabakaları üretilmiştir. Bu hücre hattı için VC grubunda 8.gün ve PBMT+VC grubunda 8-9.gün günlerde hücre tabakası elde edilmiştir. Elde edilen hücre tabakaları arasında makroskobik ve mikroskobik incelemeler sonucu anlamlı farklılar gözlemlenmemiştir. Sonuç olarak çalışılan 3 farklı hücre tipinde de vitamin C varlığında etkin bir şekilde hücre tabakaları elde edilebilmiştir. Polikromatik ışıkla yapılan fotobiyomodülasyon uygulamasının çalışılan koşullarda hücre proliferasyonunu arttırıcı etkiye sahip olduğu, GK-MKH'ler ile HS2 hücrelerinde ise tek başına tabaka oluşumunu sağlayabildiği, ayrıca GK-MKH'lerde osteojenik farklılaşmada etkili olduğu görülmüştür. Elde edilen veriler klinik uygulamalar için umut vaat etmektedir.

Özet (Çeviri)

This study was funded by Hacettepe University Scientific Research Projects Coordination Unit (BAP) graduate project entitled“Examination of the potential of different cell types to form cell sheet in the presence of ascorbic acid and photobiomodulation”(FYL-2020 18707). In this study, it is aimed to investigate the formation of cell sheets in the presence of ascorbic acid and polychromatic light (600-1200 nm) with cells in different morphologies. For this purpose, three types of cells have been selected, human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells (HUC-MSCs), human dermal fibroblast cells (BJ) and human keratinocyte epithelial cells (HS2). In the first part of the study, characterization studies of HUC-MSCs were performed. Then, in order to obtain a cell sheets from these cells, 20 µg/mL vitamin C (VC) was added to the culture medium, the appropriate photobiomodulation (PBMT) parameters were determined and cell sheets were obtained at 5-7 days in VC group and 6-7 days in PBMT and PBMT+VC groups. In characterization studies, the extracellular matrix (ECM) structure, cell morphology, nucleus structure and different gene expression levels of cell sheets were examined. In this context, immunofluorescence and Hematoxylin-Eosin (H&E) staining results and macroscopic/microscopic observations showed that the thickest and opaque cell sheet was obtained in the PBMT+VC group. Real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) results showed that while VC and PBMT are causing to increase of ECM, they did not significantly affect stem cell gene expressions. However, PBMT upregulates osteogenic genes (OCN, RUNX2) expression levels. Hydroxyproline assays results were also regulated upwards in the presence of VC and PBMT. The similar studies were also carried out for BJ fibroblasts and HS2 cells. While no cell sheets were obtained in the PBMT group for the BJ fibroblast cell line, no significant differences were observed between the cell sheets obtained in the VC and PBMT+VC group on the 6th-7th days. RT-PCR and hydroxyproline assay results also supported that ECM increased in the presence of VC and PBMT. In the VC and PBMT+VC group for the HS2 cell line, the cell sheets were obtained in the 8th-9th days. In conclusion, cell sheets could be obtained effectively in the presence of vitamin C for different cell types. Photobiomodulation with polychromatic light was found to have an increasing effect on cell proliferation at the studied conditions. Photobiomodulation provided sheet formation in HUC-MSCs and HS2 cells, and it was also effective in osteogenic differentiation in HUC-MSCs. The results are promising for clinical applications.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    677934

    Yüzey zenginleştirilmiş raman spektroskopisi (SERS) yaklaşımı ile farklı hücre tiplerinin tanımlanması

    Detection of different cell types through surface enhanced raman spectroscopy (SERS) approach

    SEDA TARHAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Kimya MühendisliğiAtatürk Üniversitesi

    Proses ve Reaktör Tasarımı Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET YILMAZ

  2. Tez No

    741025

    Periferik kan mononükleer hücre tiplerinin COVID-19 enfeksiyonuna verdiği transkripsiyonel cevabın scRNA-seq verileri üzerinden biyolojik ağlarla incelenmesi

    Başlık çevirisi yok

    NESİBE ŞEBNEM PALULUOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Biyolojiİstanbul Medeniyet Üniversitesi

    Biyolojik Veri Bilimi Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MUHAMMED ERKAN KARABEKMEZ

  3. Tez No

    791355

    Hücre kültürü kaynaklı hücreler arası matris tabanlı biyomürekkep ile 3 boyutlu biyobaskı

    3D bioprinting with cell derived extracellular matrix based bioink

    DOĞANTAN ÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyomühendislikAnkara Üniversitesi

    Disiplinlerarası Kök Hücre ve Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AÇELYA YILMAZER AKTUNA

  4. Tez No

    313597

    Modeling neurons that can self organize into building blocks and hierarchies: An exploration based on visual systems

    Özdüzenleme ile yapıtaşları ve hiyerarşiler oluşturabilen nöron modellenmesi: Görsel sistemler üzerine bir araştırma

    AYDIN GÖZE POLAT

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2012

    Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve KontrolOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Bilişsel Bilim Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MURAT PERİT ÇAKIR

  5. Tez No

    873581

    Meme ve kolon kanser hücre hatlarında quercetin ve CD3254 kombinasyonunun NR4A1/RXR üzerinden apoptoza etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of quercetin and CD3254 combination on apoptosis via NR4A1/RXR in breast and colon cancer cell lines

    NURGÜL ABBASOVA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYŞE ÇIRAKOĞLU

Geri Dön