Geri Dön

Biyokompozit substratlarda kültürün mezenkimal kök hücre - kaynaklı ekstrasellüler veziküllere olan etkilerinin incelenmesi

Evaluation of the infuence of culture on biocomposite substrates on mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles

PDF İndir

  1. Tez No: 752314
  2. Yazar: NEZİHA AYŞENUR KURT
  3. Danışmanlar: PROF. DR. YAŞAR MURAT ELÇİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Adipoz doku, Biyokompozit substrat, Eksozomlar, Elektromanyetik alanlar, Hidrojeller, Kök hücreler, Substrat, Vezikül, Adipose tissue, Biocomposite substrates, Exosomes, Electromagnetic fields, Hydrogels, Stem cells, Substrate, Blister
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre ve Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu çalışmada, ilk önce kemik hücre dışı matriksi (K-HDM) kaynaklı hidrojeller ile biyokompozit substrat yüzeyler hazırlanmıştır. K-HDM, sığır femur kemiğinden elde edilen spongiyöz dokunun deselülerizasyonu ile elde edilmiş ve liyofilizasyon ile işlenebilir hale getirilmiştir. Bundan sonra, asidik pepsin çözeltisinde gerçekleştirilen sindirme işlemi sonrasında çözelti nötralleştirilerek pH değeri 7,4 olarak ayarlanmıştır.Fizyolojik sıcaklıkta jelasyon davranışı gösteren hidrojelin, farklı oranlarda [%50 ve %100; (a:a)] hidroksiapatit ile katkılanmak suretiyle biyokompozitleri (BH50 ve BH100) oluşturulmuştur. Elde edilen hidrojellerin fizikokimyasal karakterizasyonu basamağında, SEM analizleri ile yüzey morfolojileri, FT-IR analizleri ile fonksiyonel grupları ve kimyasal bağ bilgileri elde edilmiştir. Biyokompozit substratların in vitrositotoksisite özelliği, ISO 10993-5 indirekt yöntemine dayalı MTT analizi ile belirlenmiştir. Hücre kültürü çalışmaları, insan adipoz mezenkimal kök hücreleri (iAMKH'leri) ile yürütülmüştür. iAMKH'lerin karakterizasyonu, invert mikroskobik incelemeler, immünfenotiplendirme, farklılaşma çalışmaları ve CFU-f oluşturma yeteneğinin incelenmesine dayalı olarak gerçekleştirilmiştir. Hücreler biyokompozit substratlar üzerine ekildikten sonra, standart koşullar altında ve şartlandırma etkisi amacıyla düşük frekanslı darbeli elektromanyetik alan (EMA) maruziyetinde kültürleri sürdürülmüştür. In vitro hücre canlılığı ve proliferasyon durumu, mitokondriyel dehidrojenaz aktivitesine dayalı Alamar mavisi yöntemi kullanılarakincelenmiştir. Farklı substrat yüzeyler üzerinde ve farklı koşullar altındaki sürdürülen hücre kültürlerinin besiyerleri toplanarak ekstrasellüler veziküller (EV'ler) izole edilmiştir. İzole edilen EV'lerin, zetasizer parçacık boyut dağılımları ve zeta potansiyelleri belirlenmiş, SEM analizi ile morfolojileri incelenmiştir. Bunların yanısıra, spesifik yüzey belirteçlerinin varlığı ELISA yöntemi ile, toplam protein içerikleri ise bikinkoninik asit (BCA) yöntemi kullanılarak belirlenmiştir. Çalışmada elde edilen bulgular, farklı bileşim ve özelliklere sahip substrat yüzeylerin ve EMA maruziyetinin, iAMKH'lerin EV içeriği üzerinde etkilere yol açtığını göstermektedir.

Özet (Çeviri)

In this study, firstly, biocomposite substrate surfaces were prepared using bone extracellular matrix (bECM)-derived hydrogels. bECM was obtained by decellularization of the cancellous tissue of the bovine femur and rendered workable by lyophilization. The product was digested in acidic pepsin, then neutralized and the pH value was adjusted to 7.4. This hydrogel, which shows gelling behavior at physiological temperature, was blended with different ratios of hydroxyapatite [50% and 100%; (w:w)] to obtain BH50 and BH100 biocomposites. For the physicochemical characterization of the obtained hydrogels, surface morphology was investigated by SEM analysis, and functional groups and chemical bond information were obtained by FT-IR analysis. In vitro cytotoxicity of biocomposite substrates was determined by an indirect MTT method based on ISO 10993-5. Cell culture studies were conducted with human adipose mesenchymal stem cells (hAMSCs). hAMSCs were characterized by inverted microscopy, immunophenotyping, differentiation studies and the ability to generate CFU-f. After the cells were seeded on biocomposite substrates, they were cultured under standard conditions and under exposure to a low frequency pulsed electromagnetic field (EMF) for creating a mechano-transductive conditioning effect. In vitro viability and proliferation status of cells were examined using Alamar blue method based on mitochondrial dehydrogenase activity. Extracellular vesicles (EVs) were isolated by collecting the media of cell cultures maintained on different substrates and under different conditions. Zetasizer particle size distributions and zeta potentials of isolated EVs were determined and their morphology was examined by SEM analysis. In addition, the presence of specific surface markers was determined by ELISA, and the total protein contents were determined using the bicinchoninic acid (BCA) method. The findings obtained in the study support the notion that substrate surfaces with different composition and properties, and EMF exposure cause effects on the EV content of hAMSCs.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    95475

    Production and morphological investigation of a polyethylene based composite implant

    Polietilen bazlı kompozit protezlerin üretimi ve morfolojik incelemesi

    PINAR ERCAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2000

    Makine MühendisliğiBoğaziçi Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. SABRİ ALTINTAŞ

  2. Tez No

    116099

    The Effect of silane coupling agents on the mechanical properties of polyhydroxybutyrate-valerate copolymer and hydroxyapatite composites

    Polihidroksibütirat-valerat kopolimeri ve hidroksiapatit kompozitlerinde silan kaplamanın mekanik özelliklere etkisi

    MEHMET ÖZGÜR SEYDİBEYOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2001

    Polimer Bilim ve TeknolojisiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Polimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERDAL BAYRAMLI

  3. Tez No

    142018

    Polimerik biyomalzemelerin biyouyumluluğu (deneysel çalışma)

    Biocompatibility of polymeric biomaterials (experimental study)

    FAİK TÜRKMEN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Ortopedi ve TravmatolojiSelçuk Üniversitesi

    Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. UĞUR YENSEL

  4. Tez No

    167208

    Hemicellulose based biodegradable film production

    Hemiselüloz bazlı biyobozunur film üretimi

    EMEL IRAZ GÖKSU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    Kimya MühendisliğiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Bölümü

    PROF.DR. UFUK BAKIR

    PROF.DR. ÜLKÜ YILMAZER

  5. Tez No

    179970

    Yerle temas halindeki bir otomobil lastiğinin nümerik olarak doğal frekans analizi

    Numerical analysis of natural frequency in an automobile tire having contact with ground

    AYDIN ÇAVUŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    Makine MühendisliğiAfyon Kocatepe Üniversitesi

    Makine Eğitimi Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MEHMET ÇOLAKOĞLU

  6. Tez No

    185315

    Toz metalurjisi teknigi ile üretilen bir paslanmaz çelikte katkı elemanlarının asınma direncine etkileri

    The effects of alloying elements over wear resistance in stainless steel material produced with powder metallurgy technique

    VAHDETTİN KOÇ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    Eğitim ve ÖğretimFırat Üniversitesi

    Metalurji Eğitimi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET KORKUT

Geri Dön