Geri Dön

Pulpa kaynaklı kök hücrelerin biyomateryal ve dentin üzerine tutunmasına konsantre büyüme faktörünün etkisi

The effect of concentrate growth factor on pulp-derived stem cells adhesion to biomaterials and dentin

PDF İndir

  1. Tez No: 758821
  2. Yazar: BEYZA BORAZAN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. BERİVAN TUĞBA TÜRK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Diş Hekimliği, Dentistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Endodonti Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 122

Özet

Bu çalışmanın amacı insan molar dişlerinin pulpasından kök hücreleri izole etmek ve bu hücrelerin MTA, Biodentine ve dentin üzerinde tutunmasına ve farklılaşmasına konsantre büyüme faktörünün (CGF) etkisini immunohistokimyasal, kolorimetrik ve mikroskobik tekniklerle değerlendirmektir. Pulpa kök hücreleri, insan 3. molar dişlerin pulpasından elde edildi. Aseptik şartlarda izole edilen pulpa dokusu parçalara ayrılarak alfa-MEM ortamda 40 gün kültüre edildi. Farklılaştırılmamış hücreler stoklanarak kök hücre bankası oluşturuldu ve deneylerde pasajlanarak kullanıldı Hücrelerin kök hücre karakterizasyonu CD90, CD105, CD73, CD44, CD19, CD45 ve CD34, CD11b, CD14, CD19, CD79α ve HLA-DR yüzey antijenleri ile kit kullanılarak flow sitometri ile analiz edildi. Kültürlenen hücreler kontrol amaçlı osteosit ve adipositlere farklılaştırıldı. Deneylerde kullanmak üzere kök parçalarını oluşturmak için insan üst santral dişlerinin, kök kanalları standart şekilde genişletildi ve vertikal olarak 2 simetrik parçaya ayrılarak boyları 6 mm olacak şekilde kesildi. Çalışmada; 1. Grup sadece dentin, 2.grup sadece pulpa kök hücreleri, 3.grup sadece MTA, 4.grup sadece Biodentine, 5.grup Dentin +MTA, 6. Grup Dentin + Biodentine, ve 1. 2. 5. ve 6. Grupların CGF eklenmiş haliyle toplam 10 adet deney grubu oluşturuldu. Biodentine veya MTA kullanılan gruplarda, biyomateryal kanal oluklarının yarı uzunluğuna (3mm) uygulandı, geri kalan dentin kısmı açıkta bırakıldı. CGF gönüllü hastalardan kan alınarak elde edildi ve taze olarak örneklerin üzerine yerleştirildi. Daha sonra örneklerin üzerine pulpa kök hücreleri ekilerek, hücre kültür kabında inkübe edildi. Örneklere 14 ve 21 gün sonra MTT ve ALP aktivite testi uygulandı. Kalsiyum iyonlarının belirlenmesi için örnekler Alizarin Red S ile boyandı. Örnekler taramalı elektron mikroskobunda (SEM) incelenerek, fotoğraflandı. CGF kullanılan gruplarda, CGF'siz gruplara göre anlamlı olarak daha fazla hücre tutundu ve çoğaldı. MTA içeren gruplar kontrol grubuna göre daha az hücre sayısı gösterirken, Biodentine içeren grupta kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha fazla sayıda hücre gözlendi. ALP aktivitesi, tüm gruplarda kontrol grubuna göre daha yüksek bulundu. Bu bulgu Alizarin Red S boyaması ile de desteklendi. SEM incelemelerinde, CGF kullanılan gruplarda hücrelerin sayısının ve tutunmasının anlamlı olarak daha iyi olduğu gözlendi.

Özet (Çeviri)

The aim of this study was to describe in vitro isolation of dental pulp stem cells from human molar teeth and evaluation of the effect of concentrate growth factor (CGF) on adhesion and proliferation of pulp-derived stem cells to biomaterials and dentin by immunohistochemistry, colorimetric assay and Scanning electron microscopy. Dental pulps were obtained from sound human third molars extracted for therapeutic reasons. Extracted pulp tissue was minced into small pieces. The tissue blocks were cultured in the alpha modification of Eagle medium (Gibco-BRL, Grand Island, NY) supplemented with 20% fetal bovine serum and a complex of 100 U/mL penicillin G and 100 mg/mL streptomycin.Dental pulp stem cells (DPSCs) characterized by flow cytometric analysis of CD90, CD105, CD73, CD44, CD19, CD45 ve CD34, CD11b, CD14, CD19, CD79α ve HLA-DR. To control stem cell nature, cultured cells differentiated into osteocytes and adipocytes. Pulp derived stem cells were pooled to establish stem cell bank. To obtain root canal fragments, single root teeth were collected. After separation of the crowns at cemento-enamel junction, roots were instrumented and vertically divided into two pieces. Samples divided into 10 groups and were set up as follows; group 1: only dentin, group 2: only pulp stem cells, group 3: only MTA, group 4: only Biodentinee, group 5: MTA+ Dentin, group 6: Biodentine + dentin and group 1, 2, 5 and 6 with CGF. Biomaterials were placed into half-length of canals. CGF were obtained from volunteers and freshly placed on root canal fragments Then stem cells were seeded into samples with culture medium. After 14 and 21 days, MTT and ALP Activity test was performed. The samples were stained with Alizarin Red S to evaluate calcium ions. Finally, samples were then examined using a scanning electron microscope at various magnifications. While the groups with MTA demonstrated the lower number of cells, the groups with Biodentine demonstrated the significantly higher number of cells. CGF significantly increased the number of cells and their adhesion. The ALP activity was higher in the presence of dentin that was also demonstrated on alizarin red s staining.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    411798

    Kök kanal tedavisi esnasında ve sonrasında ortaya çıkan flare-up ile ilgili olan faktörler

    Factors related with flare-up during or after root canal treatment

    BUĞRA GÜLER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Diş HekimliğiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Endodonti Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HİKMET AYDEMİR

  2. Tez No

    411862

    Identification and characterization of a new mosquitocidal Bacillus sphaericus and its toxin proteins

    Sivrisinek öldürücü yeni bir suş olan Bacillus sphaericus ve toksin proteinlerinin tanımlanması ve karakterizasyonu

    FATİH ÇAKAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN

  3. Tez No

    411897

    Akdeniz bölgesinde yetişen bazı boya bitkilerinin drog ve posaları ile ilmelik yün ipliklerinin boyanması ve haslık değerleri

    Dyeing of wool pile yarn with some natural dyeing plants' drog and pulp grown in the mediterranean and fastness values

    MENEKŞE SUZAN TEKER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    El SanatlarıAkdeniz Üniversitesi

    Geleneksel Türk El Sanatları Ana Sanat Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ÖMER ZAİMOĞLU

  4. Tez No

    411939

    Sıçan dalağında marjinal bölge makrofajlarının incelenmesi (ışık mikroskobu, enzimhistokimya gösterimleri)

    Investigation of marginal zone macrophages at rat spleen (light microscopy, enzyme-histochemistry demonstrations)

    DENİZ ERGENECİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    Histoloji ve EmbriyolojiAnkara Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NURŞEN SAYIN

  5. Tez No

    412702

    IL-17, IL-17R, IL-23 VE IL-23R GEN gen polimorfizmlerinin apikal periodontitis hastalarının periapikal lezyonlarında kemik yıkımı oluşması üzerine etkisi

    Effect of İL-17, İL-17R, IL-23 and İL-23R gene polymorphisms on the formation of bone destruction at periapical lesions of apical periodontitis patients

    ELÇİN TEKİN BULUT

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Diş Hekimliğiİnönü Üniversitesi

    Endodonti Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NESLİHAN ŞİMŞEK

    PROF. DR. SEMA BELLİ

Geri Dön