Geri Dön

Pulpa kaynaklı kök hücrelerin biyomateryal ve dentin üzerine tutunmasına konsantre büyüme faktörünün etkisi

The effect of concentrate growth factor on pulp-derived stem cells adhesion to biomaterials and dentin

PDF İndir

  1. Tez No: 758821
  2. Yazar: BEYZA BORAZAN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. BERİVAN TUĞBA TÜRK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Diş Hekimliği, Dentistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Endodonti Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 122

Özet

Bu çalışmanın amacı insan molar dişlerinin pulpasından kök hücreleri izole etmek ve bu hücrelerin MTA, Biodentine ve dentin üzerinde tutunmasına ve farklılaşmasına konsantre büyüme faktörünün (CGF) etkisini immunohistokimyasal, kolorimetrik ve mikroskobik tekniklerle değerlendirmektir. Pulpa kök hücreleri, insan 3. molar dişlerin pulpasından elde edildi. Aseptik şartlarda izole edilen pulpa dokusu parçalara ayrılarak alfa-MEM ortamda 40 gün kültüre edildi. Farklılaştırılmamış hücreler stoklanarak kök hücre bankası oluşturuldu ve deneylerde pasajlanarak kullanıldı Hücrelerin kök hücre karakterizasyonu CD90, CD105, CD73, CD44, CD19, CD45 ve CD34, CD11b, CD14, CD19, CD79α ve HLA-DR yüzey antijenleri ile kit kullanılarak flow sitometri ile analiz edildi. Kültürlenen hücreler kontrol amaçlı osteosit ve adipositlere farklılaştırıldı. Deneylerde kullanmak üzere kök parçalarını oluşturmak için insan üst santral dişlerinin, kök kanalları standart şekilde genişletildi ve vertikal olarak 2 simetrik parçaya ayrılarak boyları 6 mm olacak şekilde kesildi. Çalışmada; 1. Grup sadece dentin, 2.grup sadece pulpa kök hücreleri, 3.grup sadece MTA, 4.grup sadece Biodentine, 5.grup Dentin +MTA, 6. Grup Dentin + Biodentine, ve 1. 2. 5. ve 6. Grupların CGF eklenmiş haliyle toplam 10 adet deney grubu oluşturuldu. Biodentine veya MTA kullanılan gruplarda, biyomateryal kanal oluklarının yarı uzunluğuna (3mm) uygulandı, geri kalan dentin kısmı açıkta bırakıldı. CGF gönüllü hastalardan kan alınarak elde edildi ve taze olarak örneklerin üzerine yerleştirildi. Daha sonra örneklerin üzerine pulpa kök hücreleri ekilerek, hücre kültür kabında inkübe edildi. Örneklere 14 ve 21 gün sonra MTT ve ALP aktivite testi uygulandı. Kalsiyum iyonlarının belirlenmesi için örnekler Alizarin Red S ile boyandı. Örnekler taramalı elektron mikroskobunda (SEM) incelenerek, fotoğraflandı. CGF kullanılan gruplarda, CGF'siz gruplara göre anlamlı olarak daha fazla hücre tutundu ve çoğaldı. MTA içeren gruplar kontrol grubuna göre daha az hücre sayısı gösterirken, Biodentine içeren grupta kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha fazla sayıda hücre gözlendi. ALP aktivitesi, tüm gruplarda kontrol grubuna göre daha yüksek bulundu. Bu bulgu Alizarin Red S boyaması ile de desteklendi. SEM incelemelerinde, CGF kullanılan gruplarda hücrelerin sayısının ve tutunmasının anlamlı olarak daha iyi olduğu gözlendi.

Özet (Çeviri)

The aim of this study was to describe in vitro isolation of dental pulp stem cells from human molar teeth and evaluation of the effect of concentrate growth factor (CGF) on adhesion and proliferation of pulp-derived stem cells to biomaterials and dentin by immunohistochemistry, colorimetric assay and Scanning electron microscopy. Dental pulps were obtained from sound human third molars extracted for therapeutic reasons. Extracted pulp tissue was minced into small pieces. The tissue blocks were cultured in the alpha modification of Eagle medium (Gibco-BRL, Grand Island, NY) supplemented with 20% fetal bovine serum and a complex of 100 U/mL penicillin G and 100 mg/mL streptomycin.Dental pulp stem cells (DPSCs) characterized by flow cytometric analysis of CD90, CD105, CD73, CD44, CD19, CD45 ve CD34, CD11b, CD14, CD19, CD79α ve HLA-DR. To control stem cell nature, cultured cells differentiated into osteocytes and adipocytes. Pulp derived stem cells were pooled to establish stem cell bank. To obtain root canal fragments, single root teeth were collected. After separation of the crowns at cemento-enamel junction, roots were instrumented and vertically divided into two pieces. Samples divided into 10 groups and were set up as follows; group 1: only dentin, group 2: only pulp stem cells, group 3: only MTA, group 4: only Biodentinee, group 5: MTA+ Dentin, group 6: Biodentine + dentin and group 1, 2, 5 and 6 with CGF. Biomaterials were placed into half-length of canals. CGF were obtained from volunteers and freshly placed on root canal fragments Then stem cells were seeded into samples with culture medium. After 14 and 21 days, MTT and ALP Activity test was performed. The samples were stained with Alizarin Red S to evaluate calcium ions. Finally, samples were then examined using a scanning electron microscope at various magnifications. While the groups with MTA demonstrated the lower number of cells, the groups with Biodentine demonstrated the significantly higher number of cells. CGF significantly increased the number of cells and their adhesion. The ALP activity was higher in the presence of dentin that was also demonstrated on alizarin red s staining.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    554423

    Dental materyallerin mezenkimal kök hücreler üzerine etkilerinin incelenmesi

    Investigation of the effects of dental materials on mesenchymal stem cells

    MELEK BİLGE PINARBAŞI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Mühendislik BilimleriErciyes Üniversitesi

    Malzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SERVET ÖZCAN

  2. Tez No

    618228

    Yağ doku matriksi desellülerizasyon tekniklerinin araştırılması

    Invastigation of adipose tissue matrix decellularization methods

    RAVZA TOSUNBAYRAKTAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    GenetikErciyes Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ZEYNEP BURÇİN GÖNEN

  3. Tez No

    359700

    Pulpal dental kök hücre kaynağının kritik boyuttaki rat kalvaryal defekt modeli üzerindeki kemik rejenerasyon etkinliğinin incelenmesi

    Bone regeneration efficacy of dental pulp stem cell source in rat calvarial critical size defect model

    FATİH ASUTAY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Diş Hekimliğiİnönü Üniversitesi

    Ağız, Diş, Çene Hastalıkları ve Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SERKAN POLAT

  4. Tez No

    716825

    Gene expression omnibus (GEO) veribankası kaynakları kullanılarak nöral krest kaynaklı dental kök hücrelerinin, nörojenik rejenerasyon ile ilişkili gen ifade profillerinin karşılaştırılmalı olarak incelenmesi

    Investigation of the comparative gene expression profiles of dental stem cells related to neurogenic regeneration using gene expression omnibus (GEO) database

    ABDULLAH CEVDET AKMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Diş HekimliğiHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞEN ÖZCAN

    DOÇ. DR. CEREN SUCULARLI

  5. Tez No

    850071

    Genç yetişkinlerin maksiller ve mandibular üçüncü molar dişlerinden alınan dental pulpa kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin osteojenik, adipojenik ve kondrojenik farklılaşma potansiyellerinin incelenmesi

    Investigation of osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation potentials of dental pulp-derived mesenchymal stem cells from maxillary and mandibular third molars of young adults

    AZİZ BERKEM ALTIPARMAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyolojiMersin Üniversitesi

    Kök Hücre ve (Rejeneratif) Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ NAZAN ERAS

    PROF. DR. TUNÇ AKKOÇ

Geri Dön