Karbonik anhidraz izoenzimlerinin (BCA, CA-II, CA-I ve CA-IV) katalizlediği reaksiyonlar yardımıyla enzim aktif bölgesinin ve kataliz mekanizmasının yeniden yorumlanması
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 76894
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. NAZAN DEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1998
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 99
Özet
Sığır eritrositlerinden, insan eritrositlerinden ve sığır akciğerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (BCA, CA-I, CA-II ve CA-IV) saflaştınlmıştır. Bu izoenzimler katalizörlüğünde ester hidrolizi ve alkollerin esterleşme reaksiyonları çalışılmıştır. Önce sığır kanından BCA, insan kanından CA-I ve CA-II ve sığır akciğerinden CA-IV izoenzimleri afınite kromatografisi ile saflaştırıldı. Karbonik anhidraz izoenzimlerinin aktivite ölçümleri CO2-hidrataz aktivitesi ve esteraz aktivitesi yöntemleri ile yapıldı. Saflaştırılan karbonik anhidraz izoenzimleri katalizörlüğünde p-nitrofenilasetat, fenilasetat ve l-asetoksi-2-siklohekzen esterleri hidroliz edildi. Ayrıca m-nitrofenol ve p-nitrofenol alkollerinin de yine BCA,CA-I, CA-II, CA-IV izoenzimleri katalizörlüğünde esterleştirme reaksiyonları yapıldı. Esterlerin hidrolizlenmesi ve alkollerin esterleşmesi reaksiyonları 10 saat sürdürüldü. Reaksiyonların olup olmadığı, reaksiyon ortamından belirli hacimde ve belirli aralıklarla numune alınarak, organik çözücü ile ekstrakte edildikten sonra ince tabaka kromatografisi, gaz kromatografisi, NMR spektroskopisi ve UV spektroskopileri yardımı ile izlendi. Her bir izoenzimin esterler ve alkoller üzerine farklı tarzda etki ettikleri gözlendi. Bu reaksiyonlardan faydalanarak karbonik anhidraz enziminin aktif bölgesinin yapısı hakkında fikirler geliştirildi.
Özet (Çeviri)
Bovine carbonic anhydrase (BCA) purified from bovine erythrocytes, carbonic anhydrases CA-I and CA-II purified from human erythrocytes carbonic anhydrases CA- IV purified from bovine lung were used for ester hydrolysis and esterification of alcols. The purification of BCA, human CA-I and CA-II, bovine lung (CA-IV) isoenzymes was done by affinite chromatography. Activity measurements were performed by CO2- hidratase activity and esterase activity methods. p-Nitro phenyl asetate, phenyl asetate, phenyl asetate and l-acetoxyi-2-cycloex-2-ene esters were hydrolysed by the catalysis of BCA, CA-I, CA-II and CA-IV isoenzymes. The esterification reactions of m- nitro fenol and p- nitrophenol were performed by a catalysis of the isoenzymes. Esters hydrolysis and alcohols esterification reaction were carried out during 10 hours. To be able to determine whether reactions occur, defined volumes of samples were taken from reaction mictures at interval times and extracted by an organic solvent then analised on TLC, gas chromatography, NMR and UV spectroscopies. It was observed that each isoenzymes has a different effects on esters and alcohols. From this results some suggestion can be made about the structure of active domain of CA enzyme.
Benzer Tezler
- Bazı karbonik anhidraz izoenzimlerinin saflaştırılması için yeni bir afinite jelinin sentezi ve uygulanması
A new affinity gel synthesis for purification of some of carbonic anhydrase isozymes and applications
AYŞEGÜL ŞAHİN
- Eritrosit membranlarının karbonik anhidraz izoenzimlerinin aktiviteleri üzerine etkilerinin incelenmesi
The investigation of effects of erythrocyte membrane on activities of carbonic anhydrase isoenzymes
ZUHAL İNAM
Yüksek Lisans
Türkçe
2004
BiyokimyaKaradeniz Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF.DR. EDİP KEHA
- Eritrositlerden karbonik anhidraz izoenzimlerinin saflaştırılması için yeni bir afinite jelinin sentezi ve uygulanması
Application and synthesis of a new affinity gel for the purification of carbonic anhydrase isoenzymes from the erythrocytes
ÖZEN ÖZENSOY
- Değişik karbonik anhidraz inhibitörlerinin organik sentezi ve inhibisyon kinetiğinin incelenmesi
The Synthesis of various carbonic anhydrase inhibitors and investigation of inhibition kinetics
METİN BÜLBÜL
Doktora
Türkçe
2002
KimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU
DOÇ. DR. OKTAY ARSLAN
- Sığır midesinden karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması ve biyoorganik reaksiyonlarda kullanılması
Purified of carbonic anhydrase from bovine stomach and used in bioorganic reactions
HAYRUNNİSA NADAROĞLU
Doktora
Türkçe
2003
KimyaAtatürk ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NAZAN DEMİR
DOÇ. DR. YAŞAR DEMİR