Geri Dön

Türkiye'nin çeşitli bölgelerindeki ruminantlardan izole edilen Brucella türlerinin tüm genom dizileme temelli analizi

Whole genome sequencing based analysis of Brucella species isolated from ruminants in various regions of Türkiye

PDF İndir

  1. Tez No: 833655
  2. Yazar: SONGÜL ÖTKÜN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SEVİL ERDENLİĞ GÜRBİLEK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Mikrobiyoloji, Veteriner Hekimliği, Microbiology, Veterinary Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Harran Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Mikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 114

Özet

Bu çalışma, Türkiye'de ve dünyanın birçok ülkesinde önemli bir hayvan ve halk sağlığı sorununa neden olan brusellozis etkenlerinin ruminantlardan izole edilen türlerine tüm genom dizileme (WGS) yapmak amacıyla yürütüldü. Bu kapsamda tek nükleotit polimorfizmleri (SNP) ile WGS-SNP tabanlı filogenetik analiz ve ikili SNP mesafesi hesaplama, WGS tabanlı virulens gen ve direnç gen analizleri gerçekleştirme, geleneksel mikrobiyolojik analizlerle identifikasyon ve biyotiplendirme, fenotipik antimikrobiyal direnç ve faj duyarlılık analizleri yapılarak, elde edilen veriler uyumluluk kapsamında birbiriyle karşılaştırıldı. Çalışmada Türkiye'nin çeşitli bölgelerindeki ruminantlardan izole edilen 21 adet ve insanlardan izole edilen iki adet Brucella spp. izolatı kullanıldı. Kültürel yöntemler, polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve WGS analizleri sonucunda 11 adet Brucella melitensis, 12 adet B. abortus identifiye edildi. B. abortus izolatlarının tamamının sığır orijinli, B. melitensis izolatlarının ise koyun, keçi, koç ve insan orijinli olduğu belirlendi. B. abortus izolatlarının 11 (%91,66) adedi biyovar (bv) 3, bir adedi (%8,33) B. abortus bv 9 olarak, B. melitensis izolatlarının 9 (%81,8) adedi B. melitensis bv 3, birer adedi bv 1 ve bv 2 olarak biyotiplendirildi. Tüm genomu dizilenen 23 adet izolatın ortalama GC içeriği %57, genom uzunluğu ise 3,2 megabaz (mb) olduğu belirlendi. Tüm genom SNP tabanlı oluşturulan filogenetik ağaçlandırmada B. melitensis suşlarının tamamının Doğu Akdeniz soyu ile ilişkilendirilen genotip II'nin IIb alt genotipinde yer aldığı tespit edildi. IIb alt genotipinde üç ayrı kümelenme sergileyen yerel izolatlarımız arasında en fazla SNP mesafesinin Siirt ve İstanbul menşeili izolatlar (22RB24671) arasında olduğu tespit edildi. B. abortus izolatlarıyla oluşturulan WGS-SNP tabanlı filogenetik ağaca göre yerel izolatların tamamının C1 kladında yer aldığı görüldü. C1 kladında iki ana kümelenme gösteren yerel izolatlardan Iğdır ili izolatlarının tamamı ve Şanlıurfa/Hilvan ile İstanbul (22RB24674) izolatları İran menşeili suşlarla bir kümelenme oluştururken diğer B. abortus izolatları Çin menşeili suşunda yer aldığı ikinci kümelenmeyi meydana getirdi. Gerçekleştirilen ikili SNP mesafesi karşılaştırma analizinde yerel B. abortus izolatları arasında SNP farkının 0-316 arasında değiştiği belirlendi. Aynı dönemde ve aynı sürüdeki farklı hayvanlardan izole edilen bazı B. melitensis ve B. abortus izolatlarında SNP farkı olmadığı tespit edildi ve bu durum ortak bir bulaş kaynaklı enfeksiyon olarak değerlendirildi. Çalışmaya dahil edilen 23 adet B. abortus ve B. melitensis izolatlarının WGS verileri ile gerçekleştirilen virulens gen analizinde tür, konakçı ve izolasyon yılı fark etmeksizin tüm suşlarda 43 adet virulens geni ile ilişkili bölge tespit edildi. Tespit edilen genlerin büyük bir kısmının kromozom I (Chr I) üzerinde yer aldığı ve lipopolisakkarit (LPS) ile tip 4 salgı sistemiyle (T4SS) ilişkili genlerin çoğunlukta olduğu belirlendi. Gerçekleştirilen WGS tabanlı antimikrobiyal direnç gen analizinde kontrol edilen klasik dirençle ilişkili genler tespit edilmezken, fenotipik direnç analizinde B. abortus izolatlarının %58,33'ü test edilen antibiyotiklerin en az ikisine dirençli bulundu. B. melitensis izolatlarında bu oranın %63,63 olduğu tespit edildi. Sonuç olarak brusellozisin en yaygın iki etkeni olan B. melitensis ve B. abortus izolatlarının WGS tabanlı ileri epidemiyolojik analizi gerçekleştirilerek Türkiye'de dolaşımda olan genotipler belirlendi. Bu verilerin ülkede hastalığın izlenmesi ve salgınların kontrolü açısından önemli olduğu, antimikrobiyal dirençliliğin kaygı verici boyuta ulaştığı ve izlenmesi gerektiği kanısına varıldı.

Özet (Çeviri)

This study was conducted to perform whole genome sequencing (WGS) of Brucella isolates originated from ruminants. Brucellosis is an important animal and public health problem in Türkiye and many countries around the world. In this context, single nucleotide polymorphisms (SNPs) and WGS-SNP-based phylogenetic analysis and double SNP distance calculation, WGS-based virulence gene and resistance gene analyses, identification and biotyping by conventional microbiological analyses, phenotypic antimicrobial resistance and phage susceptibility analyses were performed and the obtained data were compared with each other within the scope of compatibility. In the study, 21 Brucella spp. isolates from ruminants and two Brucella spp. isolates from humans in various regions of Türkiye were used. As a result of cultural methods, polymerase chain reaction (PCR) and WGS analyses, 11 Brucella melitensis and 12 B. abortus were identified. It was determined that all B. abortus isolates were of bovine origin, while B. melitensis isolates were isolated from sheep, goat, ram and human. Eleven (91.66%) B. abortus isolates were biotyped as biovar (bv) 3, one (8.33%) as B. abortus bv 9. Nine (81.8%). B. melitensis isolates were biotyped as B. melitensis bv 3, while one isolate was found as bv 1 and the other was identified as bv 2. The average GC content of 23 whole genome sequenced isolates was 57% and the genome length was 3.2 megabases (Mb). In the whole genome SNP-based phylogenetic tree, it was determined that all of the B. melitensis isolates were located in the IIb subgenotype of genotype II, which is associated with the Eastern Mediterranean lineage. Among the local isolates that clustered into the IIb subgenotype, the highest SNP distance was observed between the isolates from Siirt and Istanbul (22RB24671). According to the WGS-SNP-based phylogenetic tree constructed with B. abortus isolates, all local isolates were found to be in clade C1. Among the local isolates showing two main clusters in clade C1, all isolates from Iğdır province and isolates from Şanlıurfa/Hilvan and Istanbul (22RB24674) formed one cluster with Iranian strains, while the other B. abortus isolates formed the second cluster including the Chinese strain. In the pairwise SNP distance comparison analysis, it was determined that the SNP differences between local B. abortus isolates ranged between 0-316. In some B. melitensis and B. abortus isolates isolated from different animals in the same period and in the same herd, no SNP difference was detected and this was considered as a common transmission-induced infection. In the virulence gene analysis performed with WGS data of 23 B. abortus and B. melitensis isolates included in the study, 43 virulence gene-related regions were detected in all isolates regardless of species, host and isolation year. It was determined that most of the detected genes were located on chromosome I (Chr I) and the majority of the genes associated with lipopolysaccharide (LPS) and type 4 secretion system (T4SS). In the WGS-based antimicrobial resistance gene analysis, no classical resistance-related genes were detected, while 58.33% of B. abortus isolates were resistant to at least two of the antibiotics tested in phenotypic resistance analysis. This rate was 63.63% in B. melitensis isolates. In conclusion, WGS-based epidemiological analysis of B. melitensis and B. abortus isolates, the two most common causative agents of brucellosis, was performed and the circulating genotypes in Türkiye were determined. It was concluded that these data are important for monitoring the disease and controlling outbreaks in the country. It was also thought that antimicrobial resistance reached an alarming level and it should be monitored.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    331462

    Kırıkkale yöresinde sığırlarda theileria annulata ve theileria buffeli/orientalis'in PCR-Reverse line blotting yöntemi ile araştırılması

    Investigation of theileria annulata and theileria buffeli/orientalis in cattle in kirikkale province by PCR-Reverse line blotting method

    SAMİ GÖKPINAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    ParazitolojiKırıkkale Üniversitesi

    Veteriner Hekimliği Bölümü

    PROF. DR. MERAL AYDENİZÖZ

  2. Tez No

    511547

    Türkiye'nin çeşitli illerinde yapılacak arazi tipi lisanssız güneş enerjisi santrali yatırımlarının teknik ve finansal analizi

    Technical and financial analysis of unlicensed ground mounted pv plants investments in several provinces of Turkey

    GÜNAY TEKKALE

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Enerjiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Enerji Bilim ve Teknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖNDER GÜLER

  3. Tez No

    773322

    Türkiye'de akademik hareketlilik üzerine ampirik bir çalışma

    An empirical study on academical mobility in Turkey

    HACER PINAR ALTAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    EkonomiAtılım Üniversitesi

    İktisat Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET GÜRSAN ŞENALP

  4. Tez No

    515244

    Şehiriçi ateşli silah yaralanmalarına bağlı torakoabdominal yaralanmaların klinik ve epidemiyolojik analizi

    Thoracoabdominal injuries with firearm in 'in-city'

    AYKUT ÖZTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Genel CerrahiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NAZİF ZEYBEK

    DR. ÖĞR. ÜYESİ OĞUZ HANÇERLİOĞULLARI

  5. Tez No

    113293

    Dış ticaret meslek eğitiminin Anadolu ticaret meslek liseleri açısından incelenmesi

    An Investigation of the vocational education of foreign trade interm of the vocational high school of Anatolian commerce

    ORHAN SAĞÇOLAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Eğitim ve ÖğretimGazi Üniversitesi

    Dış Ticaret Eğitimi Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. İZZET GÜMÜŞ

Geri Dön