Yüksek hassasiyetle bir biyomolekülün ortogonal metotlarının tasarımı ve tayin sınırlarının sayısal analizi
Design of orthogonal methods for a biomolecule and numerical analysis of the limits of determination
- Tez No: 931537
- Danışmanlar: PROF. DR. ECE KÖK YETİMOĞLU, PROF. DR. MEMET VEZİR KAHRAMAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Analitik Kimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Orijinal referans ürünü olarak da bilinen referans ürün, analitik metot geliştirme ve validasyon çalışması için çalışmada kullanılmıştır. Referans ürün spesifikasyonlarını inceledikten sonra spesifikasyonların SEC HPLC sonucunu içerdiğini ancak analitik bir test olarak Protein A kromatografisinin belirtilmediği anlaşılmıştır. Referans ürün spesifikasyonlarına ilişkin bir kayıt olmamasına rağmen, özellikle alt akım üretimi (USP) ve üst akım üretimi (DSP) ürünlerin rutin analizi için alternatif yöntemler gereklidir. Bu çalışmada, Uluslararası Uyumlaştırma Konferansı (ICH M10) tarafından belirlenen kılavuzlara uygun olarak, monoklonal antikorların (mAb) konsantrasyon tayini (titer) validasyonunda ortogonal iki kromatografik yönteminin etkinliği incelenmiştir. SEC HPLC analitik metot validasyon çalışması (0,01 mg/ml–2,0 mg/ml) % 1,0 (LLOQ seviyesi) ile % 200,0 aralığında gerçekleştirilmiştir. Protein A kromatografisi analitik yöntemi için (0,0078 mg/ml–4,0 mg/ml) % 0,78 (LLOQ seviyesi) ile % 400,0 doğrusallık seviyeleri arasında validasyon çalışması gerçekleştirilmiştir. Monoklonal antikor (mAb) için analitik metot validasyonu, Waters® HPLC ekipmanı, Empower® 3 isimli bir yazılıma sahip PDA dedektörü kullanılarak metotları geliştirilmiş ve valide edilmiştir. Elde edilen kromatogramlar/datalar proses edilerek istatistiksel analizler (ANOVA) ile doğrulanmıştır. Protein A kromatografisi ve SEC HPLC analitik metotları, ICH M10 kılavuzuna uygun olarak mAb referans ürünü için validasyon parametreleri oluşturularak gerçekleştirilmiştir.
Özet (Çeviri)
The reference product, also known as the original reference product, was used in the study for bioanalytical method development and method validation study. After reviewing the reference product specifications, it became clear that the specifications included the SEC HPLC result but did not specify Protein A chromatography as an analytical test. Although there is no record of reference product specifications, alternative methods are required, especially for routine analysis of upstream production (USP) and downstream production (DSP) products. In this study, the effectiveness of two orthogonal chromatographic methods in the concentration determination (titer) validation of monoclonal antibodies (mAb) was examined, in accordance with the guideline set by the International Conference on Harmonization (ICH M10). SEC HPLC analytical method validation study (0.01 mg/ml–2.0 mg/ml) was performed between 1.0 % (LLOQ level) and 200.0 %. A method validation study was conducted for the Protein A chromatography bioanalytical method (0.0078 mg/ml–4.0 mg/ml) between 0.78 % (LLOQ level) and 400.0 % linearity levels. Bioanalytical method validation for monoclonal antibody (mAb) was developed and validated using Waters® HPLC equipment and a PDA detector with software called Empower® 3. The obtained chromatograms/data were processed and confirmed by statistical analysis (ANOVA). Protein A chromatography and SEC HPLC bioanalytical methods were performed by establishing validation parameters for the mAb reference product in accordance with the ICH M10 guideline.
Benzer Tezler
- Particle detection and signal analysis in nanopores
Nanogözeneklerde parçacık algılama ve sinyal analizi
DÜRDANE YILMAZ
Doktora
İngilizce
2023
Biyoteknolojiİstanbul Medeniyet ÜniversitesiNanobilim ve Nanomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ALİ DİNLER
DOÇ. DR. KAAN KEÇECİ
- Applications of deep learning for binding site predicitons in proteins
Proteinlerdeki bağlanma noktaları tahminleri için derin öğrenme uygulamaları
NİHAT TOLGA FİLOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİzmir Katip Çelebi ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ONAN GÜREN
DR. ÖĞR. ÜYESİ ARZU UYAR
- Poli[(metoksietoksi)etoksi-ko-3-formilfenoksi]fosfazen'in sentezi ve biyosensör uygulamalarında kullanımı
Synthesis and biosensor application of poly[(methoxyethoxy)ethoxy-co-3-formylphenoxy] phosphazene
DİDEM UÇAN
- Kullanılmayan hücre kültürlerinden saflaştırılan histonlardan katyonik peptitlerin eldesi ve potansiyel biyolojik aktivitelerinin araştırılması
Production and potential biological activities of cationic peptides derived from unused cell culture purified histones
SUDE YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyokimyaEge ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİGEN ZİHNİOĞLU
DR. ÖĞR. ÜYESİ HICHEM MOULAHOUM
- Metal organik kafes yapılarının diol içeren biyomolekül tayini ve izolasyonu için kullanılabilirliğinin incelenmesi
Investigation of the usability of metal organic frameworks structures for detection and isolation of diol containing biomolecule
SEHER PARLAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATOŞ ÇİĞDEM KİP