Farklı konukçulardan elde edilen erwinia amylovora izolatlarının protein profillerinin virülenslik seviyeleri ile ilişkilerinin araştırılması
Investigation of the relationship between protein profiles and virulence levels of erwinia amylovora isolates obtained from different hosts
- Tez No: 935057
- Danışmanlar: PROF. DR. KUBİLAY KURTULUŞ BAŞTAŞ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Ziraat, Agriculture
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Selçuk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Bitki Koruma Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 271
Özet
Erwinia amylovora'nın neden olduğu ateş yanıklığı hastalığı, Rosaceae familyasına ait yaklaşık 140 türde enfeksiyon yapabilmekte ve tüm dünyada yumuşak çekirdekli meyve yetiştiriciliği açısından büyük bir tehdit oluşturmaktadır. Bu çalışma, Erwinia amylovora'nın neden olduğu ateş yanıklığı hastalığı ile ilişkili virülenslik faktörleri, konukçu farklılıkları ve genetik çeşitliliği araştırmayı amaçlamaktadır. Türkiye'nin farklı illerinden (Konya, Samsun, Antalya, Bursa, Afyonkarahisar, Kahramanmaraş, Iğdır, Amasya, Nevşehir, Ankara ve Adana) ve çeşitli konukçulardan (elma, armut, ayva, yenidünya, muşmula, serik armudu, asya armudu, yabani armut, alıç ve böğürtlen) toplanan izolatların morfolojik, fizyolojik, biyokimyasal ve genetik özellikleri incelenmiştir. PCR analizleri ile 200 izolatın E. amylovora olduğu doğrulanmış ve CRISPR gen bölgeleri kullanılarak da genetik karakterizasyonları gerçekleştirilmiştir. Tip 3 Salgı Sistemi (T3SS) ve ams genleri, izolatların virülenslik mekanizmalarının belirleyici unsurları olarak tespit edilmiştir. In vitro denemelerde, yüksek virülensliğe sahip izolatların ams ve T3SS gen (HrpL, HrpA, HrpN, DspA/E ve AmsG) ifadelerinin daha yüksek olduğu, düşük virülensliğe sahip izolatlarda ifadelerin daha düşük seviyede kaldığı belirlenmiştir. In vivo denemeler üretim miktarları ve ekonomik açıdan daha önemli olan elma bitkisinde gerçekleştirilmiştir. Patojen inokülasyonundan sonra elma izolatlarından virülensliği düşük (EEA14) ve yüksek (EEA6) olan izolatlar hassas çeşit olan cv. Gala'ya inoküle edilerek farklı zaman dilimlerinde (24, 48 ve 72. saatlerde) patojenin virülensliği için gerekli olan T3SS genleri (HrpL, HrpA, HrpN ve DspA/E), ams geni ve bitkinin savunma mekanizmasında rol oynayan Patojenisite ile ilişkili protein (PR2, PR5 ve PR8) genlerinin ifade analizlerine bakılmıştır. T3SS genleri (HrpL, HrpA, HrpN ve DspA/E) ve amsG geni için in vitro ile benzer sonuçlar elde edilmiş olup, zaman dilimi açısından 24. saatte en yüksek gen ifadesi elde edilirken 48. saatte ise gen ifadesi azalmıştır. PR genlerinde ise zamana bağlı olarak sürekli bir artış görülmekte olup virülensliği yüksek olan izolatın gen ifadelerinin daha fazla olduğu tespit edilmiştir. Yapılan analizler, izolatların virülenslik düzeylerinin coğrafi bölge ve çevresel faktörlere bağlı olarak değişiklik gösterdiğini ortaya koymuştur. Kahramanmaraş izolatları yüksek virülenslik gösterirken, Konya ve Antalya izolatları arasında avirülent olanlara rastlanmıştır. Farklı konukçulardan elde edilen izolatlar arasında genetik çeşitlilik ve protein profilleri açısından farklılıklar gözlemlenmiştir. Ayrıca bu çalışma ile ülkemize özgü endemik bir tür olan Serik armudu (Pyrus serikensis) izolatları, E. amylovora konukçu listesine bu çalışma ile eklenmiştir. Bitki ve patojen arasındaki etkileşimin anlaşılabilmesi için konukçuda patojeni tanıyan proteinlerin yanı sıra enfeksiyon sonucu oluşan sinyal sistemi ve bitki savunma mekanizmasının da anlaşılması gerekmektedir. Elde edilen bulgular E. amylovora'nın genetik yapısı ve konukçu-patojen etkileşimleri hakkında yeni bilgiler sunarak, tarımsal üretimde hastalık yönetimi stratejilerinin geliştirilmesine katkıda bulunmaktadır.
Özet (Çeviri)
Fire blight disease caused by Erwinia amylovora can infect approximately 140 species belonging to the Rosaceae family and poses a significant threat to pome fruit cultivation worldwide. This study aims to investigate the virulence factors, host differences, and genetic diversity associated with fire blight disease caused by Erwinia amylovora. The morphological, physiological, biochemical, and genetic characteristics of isolates collected from different provinces of Turkey (Konya, Samsun, Antalya, Bursa, Afyonkarahisar, Kahramanmaraş, Iğdır, Amasya, Nevşehir, Ankara, and Adana) and various hosts (apple, pear, quince, loquat, medlar, Serik pear, Asian pear, wild pear, hawthorn, and blackberry) were examined. PCR analyses confirmed that 200 isolates belonged to E. amylovora, and their genetic characterization was performed using CRISPR gene regions. The Type 3 Secretion System (T3SS) and ams genes were identified as key determinants of the isolates virulence mechanisms. In vitro experiments showed that highly virulent isolates exhibited higher expression levels of ams and T3SS genes (HrpL, HrpA, HrpN, DspA/E, and AmsG), while isolates with low virulence had lower expression levels. In vivo experiments were conducted on apple plants, which are more significant in terms of production volume and economic value. After pathogen inoculation, isolates with low (EEA14) and high (EEA6) virulence from apple were inoculated into the susceptible cultivar 'Gala,' and the expression analyses of T3SS genes (HrpL, HrpA, HrpN, and DspA/E), ams gene, and Pathogenesis-Related (PR) genes (PR2, PR5, and PR8), which play a role in plant defense mechanisms, were examined at different time points (24, 48, and 72 hours). The results obtained for T3SS genes (HrpL, HrpA, HrpN, and DspA/E) and amsG gene were similar to those in in vitro experiments. The highest gene expression was observed at 24 hours, while gene expression decreased at 48 hours. In contrast, PR gene expression continuously increased over time, with the highly virulent isolate exhibiting higher expression levels. The analyses revealed that the virulence levels of isolates varied depending on the geographical region and environmental factors. While isolates from Kahramanmaraş exhibited high virulence, avirulent isolates were found among those from Konya and Antalya. Genetic diversity and protein profile differences were observed among isolates obtained from different hosts. Additionally, this study identified Pyrus serikensis, an endemic species unique to Turkey, as a new host for E. amylovora, adding it to the pathogen's host list. To understand the interaction between the plant and the pathogen, it is necessary to study not only the proteins that recognize the pathogen in the host but also the signaling system triggered by the infection and the plant's defense mechanism. The findings provide new insights into the genetic structure of E. amylovora and host-pathogen interactions, contributing to the development of disease management strategies in agricultural production.
Benzer Tezler
- Rosaceae familyasindaki farklı bitki türlerinden elde edilen Erwinia amylovora (Burr.) Winslow et al.'nin biyokimyasal ve polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) testleriyle tanılanması
Identification of Erwinia amylovora (Burr.) Winslow et al. from the different plant species of Rosaceae family with biochemical and polymerase chain reaction (PCR) tests
RÜVEYDA ATASAĞUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
BiyoteknolojiSelçuk ÜniversitesiBitki Koruma Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. KUBİLAY K. BAŞTAŞ
- Bursa ve yalova illerinde yumuşak çekirdekli meyve ağaçlarında ateş yanıklığı hastalığına neden olan Erwinia amylovora (Burr.) Winslow et al., izolatlarının bakır sülfat ve streptomisine olan duyarlılık düzeylerinin araştırılması
The investigation of the susceptibility levels of Erwinia amylovora (Burr.) Winslow et al., strains, causing fire blight in pome fruit trees in Bursa and Yalova, to copper sulphate and streptomycin
NESRİN TUNALI
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
ZiraatNamık Kemal ÜniversitesiBitki Koruma Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA MİRİK
- Farklı konukçu bitkilerden izole edilen Agrobacterium tumefaciens izolatlarının fenotipik ve genotipik karakterizasyonu
Phenotypic and genotypic characterization of Agrobacterium tumefaciens isolated from different host plant
EDA GEYLANİ YÜZBAŞIOĞLU
- Kerpe araştırma ormanı konifer türlerinde Diplodia spp.'den kaynaklanan kozalak ve sürgün enfeksiyonlarının belirlenmesi
Determination of shoot and cone infections caused by Diplodia ssp. on coniferous tree species
ŞULE YELTEKİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Ormancılık ve Orman MühendisliğiSüleyman Demirel ÜniversitesiOrman Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HATİCE TUĞBA DOĞMUŞ LEHTİJARVİ
- Molecular characterization of Monilinia species associated with brown rot of stone fruits
Sert çekirdekli meyvelerde kahverengi çürüklük ile ilişkili Monilinia türlerinin moleküler karakterizasyonu
ZERRİN KOZMA
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Bilim ve TeknolojiÇanakkale Onsekiz Mart ÜniversitesiDR. ÖĞR. ÜYESİ HİLAL ÖZKILINÇ