Geri Dön

Pentilentetrazol ile oluşturulan epileptik nöbet modelinde NOX-1 enzim inhibisyonunun etkilerinin İn-Vitro ve İn-Vivo incelenmesi

In-Vitro and In-Vivo investigation of the effects of NOX-1 enzyme inhibition in a pentylenetetrazol-induced epileptic seizure model

PDF İndir

  1. Tez No: 945750
  2. Yazar: AHMET OZAN KALECİ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AHMET ALTUN
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Farmakoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 103

Özet

Bu çalışmanın amacı pentilentetrazol (PTZ) ile oluşturulan nörotoksisite ve epileptik nöbet modellerinde, NADPH Oksidaz-1 (NOX-1) enzim inhibisyonunun sinir doku üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Çalışmanın in vitro aşamasında SH-SY5Y insan nöroblastom hücre hattı kullanıldı. PTZ ile oluşturulan toksisite sonrası NOX-1 inhibitörü ML-171'in hücre ölümü üzerindeki etkisini incelemek için hücreler altı gruba ayrıldı. Kontrol grubuna herhangi bir işlem uygulanmadı; toksisite modeli oluşturmak amacıyla PTZ grubuna 24 saat süresince 30 mM PTZ uygulandı. Diğer deney gruplarına öncelikle farklı derişimlerde ML-171 veya valproik asit (VPA) uygulanmış, bu uygulamadan 3 saat sonra kombinasyon gruplarındaki hücrelere 30 mM PTZ eklenmiştir. 24 saatlik inkübasyon süresi sonunda hücre canlılığı (XTT testi), total antioksidan seviyesi (TAS) ve total oksidan seviyesi (TOS), apoptoz ve nekroz oranları (Annexin V flow sitometri) ve Bax, Bcl-2, bölünmüş kaspaz-3 düzeyleri (ELISA) ölçüldü. Çalışmanın in vivo ayağında 230–250 g ağırlığında toplam 48 adet erkek Wistar Albino sıçan kullanıldı. Sıçanlara PTZ (35 mg/kg, i.p.) ile kindling protokolü uygulanarak epileptik nöbet modeli oluşturuldu. Tutuşmuş sıçanlara elektrot yerleştirilerek ML-171'in farklı dozlarının elektrokortikogram (ECoG) kayıtları üzerindeki etkileri değerlendirildi. Deney sonunda tüm sıçanlar anestezi altında servikal dislokasyonla sakrifiye edilerek hipokampal beyin dokuları çıkarıldı. Bu dokularda Bax, Bcl-2 ve bölünmüş kaspaz-3 düzeyleri ELISA yöntemiyle; oksidatif stres belirteçleri (TAS, TOS) ise spektrofotometrik olarak ölçüldü. Ayrıca NOX-1 protein ekspresyonu olası değişimleri tespit etmek için için immünohistokimyasal boyama yapıldı. Bulgulara göre, ML-171 hem hücre kültüründe hem de sıçan epilepsi modelinde oksidatif stres seviyelerini azalttı, hücre canlılığını artırdı ve apoptoz belirteçlerini baskıladı. Elektrokortikografi (ECoG) kayıtlarında ML-171'in nöbet şiddetini azalttığı ve jeneralize tonik-klonik nöbete (JTKN) giriş zamanı düşürdüğü gözlemlendi. VPA ve ML-171 uygulanan gruplarda hipokampal dokuda yapılan histopatolojik değerlendirmede piknotik-dejeneratif değişimlerin, immünhistokimyasal değerlendirmede ise NOX-1 ekspresyonunun azaldığı gözlemlendi. Sonuç olarak elde edilen bulgular, NOX-1 inhibitörü ML-171'in epileptik nöbet sonrası oluşan oksidatif stres, apoptoz ve elektrofizyolojik bozuklukları azalttığını ve potansiyel antiepileptik etkilere sahip olabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

The aim of this study is to investigate the effects of NADPH Oxidase-1 (NOX-1) enzyme inhibition on nervous tissue in neurotoxicity and epileptic seizure models induced by pentylenetetrazol (PTZ). SH-SY5Y human neuroblastoma cell line was used in the in vitro phase of the study. Cells were divided into six groups to examine the effect of NOX-1 inhibitor ML-171 on cell death after PTZ-induced toxicity. No treatment was applied to the control group; 30 mM PTZ was applied to the PTZ group for 24 hours to create a toxicity model. First, ML-171 or valproic acid (VPA) was applied at different concentrations to the other experimental groups, and 30 mM PTZ was added to the cells in the combination groups 3 hours after this application. At the end of the 24-hour incubation period, cell viability (XTT test), total antioxidant level (TAS) and total oxidant level (TOS), apoptosis and necrosis rates (Annexin V flow cytometry) and Bax, Bcl-2, cleaved caspase-3 levels (ELISA) were measured. In the in vivo part of the study, a total of 48 male Wistar Albino rats weighing 230–250 g were used. An epileptic seizure model was created by applying a kindling protocol with PTZ (35 mg/kg, i.p.) to the rats. The effects of different doses of ML-171 on electrocorticogram (ECoG) recordings were evaluated by placing electrodes on the epileptic rats. At the end of the experiment, all rats were sacrificed under anesthesia by cervical dislocation and their hippocampal brain tissues were removed. Bax, Bcl-2 and cleaved caspase-3 levels in these tissues were measured by ELISA; Oxidative stress markers (TAS, TOS) were measured spectrophotometrically. In addition, immunohistochemical staining was performed to detect possible changes in NOX-1 protein expression. According to the findings, ML-171 reduced oxidative stress levels, increased cell viability and suppressed apoptosis markers both in cell culture and in the rat epilepsy model. Electrocorticography (ECoG) recordings showed that ML-171 reduced seizure severity and reduced the time to generalized tonic-clonic seizure. Histopathological evaluation of hippocampal tissue in the VPA and ML-171 groups revealed pyknotic-degenerative changes, while immunohistochemical evaluation showed decreased NOX-1 expression. In conclusion, the findings show that the NOX-1 inhibitor ML-171 reduces oxidative stress, apoptosis and electrophysiological disorders that occur after epileptic seizures and may have potential antiepileptic effects.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    248997

    Ratlarda pentilentetrazol ile oluşturulan epileptik nöbet modelinde pregabalinin beyin korteksinde oksidatif stres üzerine etkileri

    The effects of pregabalin on cerebral cortical oxidative stress of rats in pentylenetetrazole induced epileptic seizure

    AHMET TÜFEKÇİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    NörolojiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Nöroloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. H. RAMAZAN YILMAZ

    DOÇ. DR. HASAN RİFAT KOYUNCUOĞLU

  2. Tez No

    358895

    Ratlarda pentilentetrazol ile oluşturulan epileptik nöbet modelinde klopidogrel ile antiepileptik ilaç etkileşiminin incelenmesi

    Effect of Interaction Copidogrel with Antiepileptic Drug on Pentylenetetrazol Induced Epileptic Seizure

    SİBEL ÖZDEMİR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    NörolojiCumhuriyet Üniversitesi

    Dahili Tıp Bilimleri Bölümü

    PROF. DR. ERTUĞRUL BOLAYIR

  3. Tez No

    229685

    Ratlarda pentilentetrazol ile oluşturulan epileptik nöbet modelinde topiramatın beyin kalsiyum, Ca+2ATPaz Ve NMDA reseptörleri üzerine etkileri

    Effect of topiramate on pentylenetetrazol induced epileptic seizure, brain Ca2+, microsomes Ca2+ -ATPase and NMDA receptors of rats

    MUSTAFA YILMAZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    NörolojiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Nöroloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SÜLEYMAN KUTLUHAN

  4. Tez No

    386614

    Pentilentetrazol ile oluşturulan nöbet modelinde Ginkgo biloba'nın ağrı duyarlılığı ve nöbetlere etkisi

    Effects of Ginkgo biloba on pain sensitivity and seizures in pentylentetrazol-induced seizure model

    HAVA YILDIRIM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    FizyolojiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET AYAR

  5. Tez No

    577121

    Sıçanlarda pentilentetrazol ile oluşturulan epilepsi modelinde serotonin reseptörlerin anti-epileptik etki mekanizmalarının araştırılması

    The investigation of anti-epileptic mechanisms of serotonin receptors with pentylenetetrazol induced epilepsy model in rats

    BİLAL ŞAHİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    FizyolojiSivas Cumhuriyet Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ERCAN ÖZDEMİR

Geri Dön