Rekombinant dna teknolojisiyle üretilen enzimler ile nişasta ve nişasta türevlerinden alluloz üretimi
Production of allulose from starch and starch derivatives using enzymes produced by recombinant dna technology
- Tez No: 952623
- Danışmanlar: PROF. DR. OSMAN KOLA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Gıda Mühendisliği, Mikrobiyoloji, Biotechnology, Food Engineering, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Alluloz, Rekombinant DNA Teknolojisi, Enzimatik Dönüşüm, Nişasta, Nadir Şekerler, Allulose, Recombinant DNA Technology, Enzymatic Conversion, Starch, Rare Sugar
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Adana Alparslan Türkeş Bilim Ve Teknoloji Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 107
Özet
Bu çalışmada, rekombinant DNA teknolojisiyle üretilen enzimler kullanılarak ucuz ve bol miktarda bulunabilen nişastadan pahalı ve değerli bir nadir şeker olan D-alluloz üretimi gerçekleştirilmiştir. Çalışmanın ilk aşamasında, liyofilize halde satın alınan Clostridium thermocellum ve Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum suşları laboratuvarda aktifleştirilmiş ve bu suşlardan genomik DNA izolasyonu gerçekleştirilmiştir. Her bir enzim geni için özel olarak tasarlanmış primerler kullanılarak, izole edilen DNA'lardan enzimleri kodlayan genler elde edilmiştir. Elde edilen genler, pET serisi plazmid vektörler kullanılarak klonlanmış ve E. coli rosetta suşunda ekspresyonları sağlanmıştır. Üretilen fosfoglikoizomeraz (PGI), alluloz 6-fosfat 3-epimeraz (A6PE) ve alluloz 6-fosfat fosfataz (A6PP) enzimleri nişastanın alluloza dönüşüm prosesinde kullanılmıştır. Çalışmada, nişasta öncelikle ticari enzimler kullanılarak glikoza hidrolize edilmiş, ardından rekombinant enzimler aracılığıyla glikoz çözeltisinden D-alluloz üretimi sağlanmıştır. Bu tez çalışması ile Türkiye'de ilk defa alluloz 6-fosfat 3-epimeraz ve alluloz 6-fosfat fosfataz enzimleri rekombinant olarak başarıyla üretilmiş ve karakterize edilmiştir. Nişastanın alluloza dönüşümü prosesinde oluşan her bir ara ürün HPLC cihazında analiz edilmiş ve 48 saatlik dönüşümleri grafiğe aktarılmıştır. Elde edilen bulgular, nişastadan D-alluloz üretiminin ekonomik ve verimli bir yöntemle gerçekleştirilebileceğini göstermekte olup, bu yöntem şeker alternatiflerine yönelik endüstriyel uygulamalar için önemli bir potansiyel taşımaktadır.
Özet (Çeviri)
In this study, the production of D-allulose, a high-value rare sugar, from abundant and inexpensive starch using enzymes produced via recombinant DNA technology. In the first stage of the study, lyophilized Clostridium thermocellum and Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum strains were activated and their genomic DNA isolated. Specific primers were designed to amplify the genes encoding enzymes from the isolated DNA. The genes were cloned into pET series plasmid vectors and expressed in E. coli rosetta strain. The produced enzymes -phosphoglucose isomerase (PGI), allulose 6-phosphate 3-epimerase (A6PE), and allulose 6-phosphate phosphatase (A6PP)- were used in the starch-to-allulose conversion process. Initially, starch was hydrolyzed to glucose using commercial enzymes. Subsequently, D-allulose production was achieved by enzymatic conversion using the recombinant enzymes. Within the scope of this study, recombinant allulose 6-phosphate 3-epimerase and allulose 6-phosphate phosphatase were successfully produced and characterized for the first time in Türkiye. Each intermediate product formed during the starch-to-allulose conversion was analyzed by HPLC, and their 48-hour transformation profiles were graphically represented. The findings demonstrate that D-allulose can be efficiently and economically produced from starch, providing a promising alternative for industrial applications in the field of sugar substitutes.
Benzer Tezler
- Beyaz peynir üretiminde alternatif süt pıhtılaştırıcı enzimler ile rennet kombinasyonları kullanımının üzerine etkileri
Başlık çevirisi yok
MERT KAYTANLI
- Sığır rotavirus vp4 ve vp7 proteinlerinin lactobacillus casei'de açıklatılması
Expression of vp4 and vp7 proteins of bovine rotavirus in lactobacillus casei
EMİNE ATALAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Veteriner HekimliğiErciyes ÜniversitesiMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ İBRAHİM SÖZDUTMAZ
- D-Tagatoz 3-Epimeraz enzimi üretimi ve fruktozdan alluloz (psikoz) eldesi
D-Tagatose 3-Epimerase enzyme production and producing allulose(psicose) from fructose
ERVA PARILDI
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
GenetikAdana Alparslan Türkeş Bilim Ve Teknoloji ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OSMAN KOLA
- Limonin dehidrogenaz enziminin rekombinant DNA teknolojisiyle üretilmesi
Production of limonene dehydrogenase enzyme with recombinant DNA technology
EMİRHAN BOZOĞLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyokimyaGaziosmanpaşa ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İSA GÖKÇE