K562 hücre hattında prime editing yöntemiyle t315ı mutasyonunun oluşturulmasına yönelik yeni moleküler yaklaşım
A novel molecular approach for the generation of the t315i mutation in the K562 cell line by prime editing
- Tez No: 963254
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZKAN BAĞCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Selçuk Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Kronik Miyeloid Lösemi (KML), BCR-ABL1 füzyon proteininin sürekli tirozin kinaz aktivitesi ile karakterize edilen bir hematopoietik malignitedir ve tyrosine kinase inhibitörleri (TKI) ile tedavi edilmektedir. Ancak, TKI tedavisi sırasında bazı hastalarda direnç gelişmekte ve bu direnç sıklıkla BCR-ABL1 geninde meydana gelen nokta mutasyonlarına bağlıdır. Bu mutasyonlar, TKI bağlanmasını engelleyerek tedavi etkinliğini düşürmekte ve hastalığın progresyonunu hızlandırmaktadır. Bu tez çalışmasında, K562 hücre hattında KML'de en sık gözlenen ve TKI tedavisine direnç sağlayan T315I mutasyonu, prime editing teknolojisi kullanılarak modellenmiştir. Çalışmada iki farklı metodoloji uygulanmış olup, bunlardan biri araştırmacılar tarafından geliştirilmiş ve çift floresan marker tabanlı zenginleştirme stratejisini içermektedir. Bu yeni metodoloji, hedef hücrelerin görsel olarak izlenmesine ve direnç geni taşıyan hücrelerin seçilmesine olanak sağlayarak edit verimliliğini artırmaktadır. Elde edilen veriler, geliştirilen stratejinin önceki metodolojiye kıyasla belirgin bir edit oranı artışı sağladığını göstermektedir. Bu yöntem, KML'ye özgü mutasyonların güvenilir bir şekilde in vitro modellenmesine olanak tanırken, transfeksiyon veriminin sınırlı olduğu veya hücresel heterojenliğin yüksek olduğu sistemlerde de prime editing verimliliğini artıracak bir platform sunmaktadır. Böylece, geliştirilen metodoloji hem temel araştırmalar hem de gelecekteki fonksiyonel ve terapötik çalışmalar için değerli bir araç olarak değerlendirilebilir.
Özet (Çeviri)
Chronic Myeloid Leukemia (CML) is a hematopoietic malignancy characterized by constitutive tyrosine kinase activity of the BCR-ABL1 fusion protein and is commonly treated with tyrosine kinase inhibitors (TKIs). However, resistance to TKI therapy can develop in some patients, often due to point mutations in the BCR-ABL1 gene. These mutations hinder TKI binding, reducing treatment efficacy and accelerating disease progression. In this thesis, the T315I mutation, which is the most frequently observed mutation conferring TKI resistance in CML, was modeled in the K562 cell line using prime editing technology. Two different methodologies were applied, one of which was developed by the researchers and incorporates a dual-fluorescent marker–based enrichment strategy. This novel approach allows visual monitoring of target cells and selection of cells carrying the resistance gene, thereby enhancing editing efficiency. The results indicate that the developed strategy significantly increases the editing rate compared to the previous methodology. This approach enables reliable in vitro modeling of CML-specific mutations and provides a platform to improve prime editing efficiency in systems with limited transfection efficiency or high cellular heterogeneity. Consequently, the developed methodology represents a valuable tool for both basic research and future functional and therapeutic studies.
Benzer Tezler
- Halotan anastezisinin eritrosit zarları üzerine olan etkileri
Başlık çevirisi yok
AKIN YEŞİLKAYA
Doktora
Türkçe
1990
Anestezi ve ReanimasyonErciyes ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. PAKİZE DOĞAN
- Karacabey yetiştirmesi esmer ve siyah-alaca sığırlarda, Amerika kökenli spermaların kullanılmasının sonuçları üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
SEYİT ALİ ASLAN
- Kemoterapiye duyarlı doku kültürlerinde benzenin P-glikoprotein ekspresyonu üzerine etkisinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
MEVLÜDE AYYILDIZ
Yüksek Lisans
Türkçe
1992
Onkolojiİstanbul Üniversitesiİmmünoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. N. FARUK AYKAN
- K562 ve MEL hücre modelinde G proteinlerinin farklılaşma üzerindeki rolünün incelenmesi
Başlık çevirisi yok
BAHİRE KÜÇÜKKAYA
- Akut myeloblastik lösemili hastalarda in vitro doğal öldürücü (NK) ve lenfokin aktive öldürücü (LAK) hücrelerin oluşumu ve sitotoksik aktivitelerine interlökin-2 (IL-2), granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör.....
Generation of NK and LAK cells in vitro in patients with acute myeloblastic leukemia; effects of interleukin-2 granulocyte-macrophage colony stimulating factor and high dose Methylprednisolone on .....
HAMZA OKUR
- Omeprazolün natural killer hücre fonksiyonlarına inhibitör etkisi
Başlık çevirisi yok
HÜSEYİN ALKIM
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1994
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıGazi ÜniversitesiPROF.DR. SELAHATTİN ÜNAL