Diyagnostik amaçlı estradiol-'horseradish' peroksidaz konjugatı hazırlanması ve karakterizasyonu
Preparation and characterization of estradiol-'horseradish' peroxidase conjugate for diagnostic uses
- Tez No: 168445
- Danışmanlar: PROF.DR. HURİYE KUZU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: 17p -estradiol-6-(0-karboksimetil)-oksim, Estradiol-HRP konjugatı, horseradish”peroksidaz, FTIR, HPLC, Elisa vı, 17p -estradiol-6-(0-carboxymethyl)-oxime, Estradiol-HRP conjugate, horseradish peroxidase, FTIR, HPLC, ELISA vu
- Yıl: 2005
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 73
Özet
ÖZET Kadın üreme steroid hormonu 17P-estradiol, esas olarak yumurtalıklarda ve daha az miktarda adrenal korteks, teslisler ve periferal dokularda üretilmektedir. Bu hormon reprodüksiyon (üreme) ve sekonder seks karakterlerinin anatomik ve fizyolojik gelişimine katkıda bulunmak tadır.Aynca kemik gelişimi, intraselüler kalsiyum konsantrasyonu ve ikinci mesaj molekülle rinin aktivitesini de etkilemektedir. Biyolojik örneklerde estradiol tayini immünolojik yöntemler ile yapılmaktadır. 17p Estradiol tayininde genellikle kullanılan, bağlı spesifik antikorlar bulunduran ve radyoaktif izotoplar, farklı türde enzimler veya lüminesans maddeler ile işaretli estradiol içeren kitler ticari olarak temin edilebilmektedir. Bu çalışma klinik laboratuarlarında yer alan bir enzimatik kitin geliştirilmesinde kullanmak üzere, enzim ile işaretlenmiş 17p-estradiol hazırlanmasına odaklanmıştır. Bu maksatla hormon, hem grubu bulunduran bir protein olan ve molekül tartısı 40.000 dalton dolayında bulunan“horseradish”peroksidaz enzimi ile işaretlendi.“Horseradish”peroksidaz 17(5 - estradiol-6-(0-karboksimetil)-oksim türevine kovalant olarak bağlandı. Estradiol-HRP kovalent bağlanması FTIR ve HPLC teknikleri ile incelendi. Ticari enzimatik estradiol kitinin spesifik antikorlar bulunduran kuyucuklarına, elde edilen estradiol-HRP konjugatının bağlan ması Elisa Okuyucusu vasıtasıyla gözlendi. Ek olarak, elde edilen Estradiol-BSA konjugatına Rodamin izotiyosiyanat kovalent olarak bağlandı. Estradiol-BSA-RITC konjugatının fuloresans karakteristikleri tayin edildi.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT 17p-estradiol is a female sex steroid hormone produced mainly in the ovaries and to a lesser extent in the adrenal cortical, testes and peripheral tissues. This hormone helps to anatomic and physiological regulation of reproduction and secondary sex charecteristics and also influences the activities of bone growth, intracellular concentration of calcium and certain second messenger molecules. Estradiol in biologic samples(tissue culture media, human saliva,urine) have been measured by immunoassay methods. 17{3-estradiol kits used in general, for the determination of estradiol which includes bonded spesific antibodies and labelled hormone with radioactive isotopes, different types of enzymes, or luminescent substances were commercially available. This study is focused on the preparation of enzyme labeled 17P-estradiol for the development of an enzymatic kit used in clinical laboratories. For this aim, hormone linked to“horseradish”peroxidase(HRP); which is a heme protein and has a molecular weight of about 40.000 daltons. Horseradish peroxidase covalently bonded to Hjî-estradiol, using Estradiol 17p-6-(0-carboxymethyl)-oxime. The occurence of estradiol- HRP covalent bond was confirmed by FTIR and HPLC techniques. The binding of estradiol-HRP conjugate to the wells of comercial enzimatic estradiol kit including spesific antibody was observed by ELISA reader. İn addition, Rhodamine isothiocyanate covalently bonded to obtained Estradiol-BSA conjugates. The fluorescence characteristics of the Estradiol-BSA-RITC conjugate were determined.
Benzer Tezler
- qPCR validation of in vivo diagnostic importance and regulation by estrogen for CHRNA5 isoform expression in breast cancer
Meme kanserinde CHRNA5 isoform ifadesinin ın vıvo tanısal önemi ve östrojenle düzenlenmesinın qpcr ile doğrulanması
EMİNE SILA ÖZDEMİR
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ÖZLEN KONU
- Prematür overyan yetmezlikli (POY) bireylerde FMR1 geni CAG tekrar dizi analizi, kromozomal mikroarray ve multigenetik panel analizi verilerinin değerlendirilmesi ile genetik etiyolojinin retrospektif olarak araştırılması
Retrospective investigation of genetic etiology by evalution of FMR1 gene CAG repeat sequence analysis chromosomal microarray and multigenetic panel analysis data individuals with premature ovarian insuffiency (POY)
ASMAR NAGHIYEVA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Kadın Hastalıkları ve DoğumGazi ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURAY BOZKURT
- Genç erkek meme büyümesine tanısal yaklaşım
Diagnostic approach to breast enlargement in young male
MAHMUT YAZICI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2007
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıGATAEndokrinoloji ve Metabolizma Bilim Dalı
DOÇ.DR. Ş. EROL BOLU
- Temporomandibular düzensizliklerde hipotalamo-pituiter-adrenal aks fonksiyonlarının değerlendirilmesi
Assesment of hypothalamic-pituitary-adrenal axis in patients with temporomandibular disorders
SÜREYYA CURA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Fiziksel Tıp ve RehabilitasyonErciyes ÜniversitesiFiziksel Tıp ve Rehabilitasyon Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET KIRNAP
- Refleks sempatik distrofi (Kompleks bölgesel ağrı sendromu tip 1) hastalarında hipotalamo -pitüiter- adrenokortikal aksın değerlendirilmesi
Assesment of the hypothalamo -pituitary- adrenocortical axes in patients with reflex sympathetic dystrophy (Complex regional pain syndrome tip 1)
NİMET BAHADIR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2012
Fiziksel Tıp ve RehabilitasyonErciyes ÜniversitesiFiziksel Tıp ve Rehabilitasyon Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN DEMİR