Geri Dön

Immunochemical and sub-structural characterization of sheep lung cytochrome P450LgM2

Koyun akciğer sitokram P450 LgM2'nin immünokimyasal ve altyapısal karakterizasyonu

  1. Tez No: 29267
  2. Yazar: TALAL MOHAMMED ABU-BAKER
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. ORHAN ADALI
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Koyun akciğer mikrozomları, akciğer sitokrom P450LgM2, peptit haritası, NH2-terminal asit analizi, biyokatalitik aktivite, antikor inhibisyonu. Bilim dalı
  7. Yıl: 1993
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 118

Özet

oz KOYUN AKCİ?ER SITOKROM P450LgM2'nin İMMÜNOKİMYASAL VE ALTYAPISAL KARAKTERİZAS YONU ABU-BAKER, Talal Yüksek Lisans Tezi, Biyokimya Anabilim Dalı Tez Yöneticisi: Doç. Dr. Orhan ADALI Yardımcı Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Emel ARINÇ Kasım 1993, 102 sayfa Akciğer havada bulunan çeşitli kirleticilerin ve potansiyel karsinoj enlerin esas giriş kapısı olduğu için, sitokrom P450 enzimlerinin akciğerde özel bir önemi vardır. Çeşitli türlerin akciğerleri, benzerlikler gösteren sitokrom P450 tiplerine sahip olmasına rağmen, aralarında bazı önemli farklılıklar olabilir. Koyun akciğer sitokrom P450LgM2 izozimi deterjan ile çözünürleştirilmiş koyun akciğer mikrozomlarından, dört kromatografik basamak kullanılarak saflaştırıldı ve laboratuvarımızda daha önce geliştirilen metotlar kullanılarak sitokrom P450LgM2'ye karşı tavşanlarda antikor üretildi. P450LgM2 antikorlarının sitokrom P450LgM2 tarafından katalize edilen reaksiyonlara etkisi incelendi. Koyun akciğer mikrozomlannm benzfetamin N-demetilaz aktivitesi P450LgM2 antikorları tarafından tamamen inhibe edildi. Akciğer mikrozomlarına benzer olarak, saflaştırılmış koyun akciğer sitokrom P450LgM2 veya fenobarbital (PB) ile muamele edilmiş tavşan karaciğer sitokrom P450LM2 ile rekonstitute (yeniden oluşturulan) sistemlerin benzfetamin N-demetilaz aktivitesi, birbiri ardına,P450LgM2 antikorları tarafinden %95 ve %82 oranlarında inlıibe edildi. P450LgM2 antikorlarının inlıibisyon etkisi, koyun akciğer mikrozomlarınm ve saflaştınlmış koyun akciğer sitolcrom P450LgM2 ile rekonstitute sistemin etilmorfîn N-demetilaz aktivitesinde de gözlendi. Etilmorfîn N-denıetilasyon reaksiyonunun sonuçlan, akciğer mikrozomlarında %80, rekonstitute sistemde %50 oranlarında inlıibisyon olduğunu gösterdi. Koyun akciğer mikrozomlannm anilin 4- hidroksilaz aktivitesi, P450LgM2 antikorları tarafından %62 oranında inlıibe edildi. Koyun akciğer sitokrom P450LgM2 ve PB-tavşan karaciğer sitolcrom P450LM2 (IIB4) izozimleri, kimotiripsin ve papain kullanılarak kısmi proteolize tabi tutulduğunda, oluşan peptitler SDS-poliakrilamit jel elektroforezi ile analiz edilip, gümüş boyaması ile gözlemlendiğinde, ufak farklılıklar (genelde benzer) göstermiştir. Ayrıca, koyun akciğer sitokrom P450LgM2 izozirninin NH?- terminalindeki amino asiti, farklı solvent sistemleri kullanılarak silika jel ince tabaka kromatografisi ile analiz edildiğinde, metionin olarak bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT IMMUNOCHEMICAL AND SUB-STRUCTURAL CHARACTERIZATION OF SHEEP LUNG CYTOCHROME P450LgM2 ABU-BAKER, Talal M. Sc. in Biochemistry Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Orhan ADALI Co-Supervisor: Prof. Dr. Emel ARINÇ November 1993, 102 pages. Cytochrome P450 enzymes, are of particular importance in lung since the lung is the main portal of entry for various airborne contaminants and potential carcinogens. Although the lungs from a number of species, have similarities in the types of P450 isozymes, some important differences may exist among them. Sheep lung cytochrome P450LgM2 was purified from detergent solubilized sheep lung microsomes by four chromatographic steps and antibodies against cytochrome P450LgM2 were produced in rabbits by using the previously developed methods in our laboratory. The effect of P450LgM2 antibodies on cytochrome P450LgM2 catalyzed reactions were examined. Benzphetamine N- demethylase activity of sheep lung microsomes was inhibited by P450LgM2 antibodies completely. Similar to lung microsomes, benzphetamine N-demethylase activity of the reconstituted systems containing purified sheep lung cytochrome P450LgM2 or phenobarbital (PB)-treated rabbit liver cytochrome P450LM2 was also inhibited by P450LgM2 antibodies about 95% and 82%, respectively. Inhibitory effect of P450LgM2 antibodies was also observed in ethylmorphine N-demethylase mactivity of sheep lung microsomes and reconstituted system containing purified sheep lung cytochrome P450LgM2. The results of ethylmorphine N-demethylation reaction showed 80% inhibition in lung microsomes and about 50% inhibition in reconstituted system. Aniline 4-hydroxylase activity of sheep lung microsomes was inhibited 62% by P450LgM2 antibodies. Partial proteolysis of sheep lung cytochrome P450LgM2 and PB-rabbit liver cytochrome P450LM2 (2B4) isozymes using chymotrypsin and papain showed minor differences (similar in general) in peptide formation when analyzed by SDS- polyacrylamide gel electrophoresis and visualized by the silver staining method. In addition, NH2-terminal amino acid residue of sheep lung cytochrome P450LgM2 was identified as a methionine residue analyzed by thin layer chromatography on silica gel plates using different solvent systems. Key Words : Sheep lung microsomes, lung cytochrome P450LgM2, peptide mapping, NH2-terminal amino acid analysis, biocatalytical activity, antibody inhibition. Science Code: 401.01.05, 405.05.01, 101.04.01 IV

Benzer Tezler

  1. Tez No

    68363

    Purification and characterization of cytochrome P4501A1 and cytochrome P450 reductase from feral leaping mullet (Liza salines) liver microsoms

    Sitokrom P4501A1 ve P450 redüktazın doğal kefal balığı karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    ALAATTİN ŞEN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1997

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMEL ARINÇ

  2. Tez No

    248049

    Farklı deneysel testis iskemilerinin apoptozis ile histolojik ilişkisi

    The histologic relation of different experimental testis ischemia with apoptozis

    TURGAY BARUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    Histoloji ve EmbriyolojiCelal Bayar Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İBRAHİM TUĞLU

  3. Tez No

    408354

    Testiküler konneksin 43 ifadesi üzerine seftriaksonun etkileri

    The effect of ceftriaxone on testicular connexin 43 expression

    HİLAL ŞAHİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Histoloji ve Embriyolojiİnönü Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NİGAR VARDI

  4. Tez No

    814148

    CO2 lazer ile oluşturulmuş yanık modelinde wharton jeli kaynaklı mezenkimal kök hücre ve condıtıoned medıum'un iyileşme üzerindeki etkinliğinin araştırılması

    Investigation of the effectiveness of wharton's jelly derived mesenchimal stem cell and conditioned medium on wound healing in a burn model created with CO2 laser created burns model

    ERDEN ERKUT ERKOL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiSelçuk Üniversitesi

    Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEKERİYA TOSUN

  5. Tez No

    119474

    Cytochrome P4502B-type protein from feral leaping mullet (liza saliens) liver microsomes: Its isolation and biochemical and immunological characterization

    Doğal kefal balığı (marvaki) karaciğerinden sitokrom P4502B-tipi protein: Saflaştırılması, biyokimyasal ve immunolojik karakterizasyonu

    AZRA BOZCAARMUTLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2002

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. EMEL ARINÇ

Geri Dön