Geri Dön

Geobacillus stearothermophilus 12 suşundan iki farklı alfa-L-arabinofuranosidaz geninin klonlanması, ekspresyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu

Cloning, expresion, purification and characterization of two different alpha-L arabinofuranosidase genes from Geobacillus stearothermophilus 12 strain

PDF İndir

  1. Tez No: 343439
  2. Yazar: İCLAL ŞAHİN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SABRİYE ÇANAKÇI
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Geobacillus stearothermophilus 12, α-L arabinofuranosidaz, enzim saflaştırılması, enzim karakterizasyonu, Geobacillus stearothermophilus 12, α-L arabinofuranosidase, enzyme purification, enzyme characterization
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 67

Özet

Gerçekleştirilen bu çalışmada, daha önce yapılan çalışmalarla iki adet arabinofuranosidaz enzimine sahip olduğu belirlenen Geobacillus stearothermophilus 12 bakterisinin bu her iki enzimine ait olan gen dizileri öncelikle ortaya çıkarıldı. Her bir gen bir E. coli ekspresyon vektörü olan pET28a'ya klonlanarak E. coli BL21 pLys hücresi içinde ekspres edildi. Ekspres edilen proteinler sahip oldukları histidin kuyruktan faydalanılarak afinite kromotografisi yardımıyla saflaştırıldı. Saflaştırılan proteinlerin karakterizasyonları gerçekleştirildi. Her iki enzimin de 56-57 kDa civarında olduğu, optimum çalışma sıcaklıklarının birbirlerinden farklı olup Abf1'in optimum olarak 65°C'de, Abf2'nin ise 50°C'de aktivite gösterdiği, optimum çalışma pH'larının ise Abf1'in 6,5; Abf2'nin ise 5,5 olduğu belirlendi. Abf 1'in 6,0'nın üzerindeki pH'larda uzun süre kararlı olduğu, buna karşı Abf2'nin pH kararlılığının iyi olmadığı tespit edildi. Her iki enzimin de subtrat olarak p-NP α-L arabinofuranosidden başka bir substratı kullanmadığı görüldü.

Özet (Çeviri)

This study, firstly, finds out the gene sequence of two arabinofuranosidase enzymes belonging to the bacteria called Geobacillus stearothermophilus 12 which has been found out to have these two enzymes in former studies. On the basis of these sequences, each gene is expressed in the cell of E. coli BL21 plys by cloning them to pET28 which is an E.coli expression vector. The proteins expressed were purified via affinity chromatography and by making use of their Histidine Tag. The characterization of these purified proteins was done. In this study, it is shown that both enzymes are about 57 kDa and that they have different optimum activation temperature. The optimum activation temperature of Abf1 is 65°C whereas it is 50°C for Abf2. Moreover, it is found out that the optimum PH activation of Abf1 is 6,5 and it is 5,5 for Abf2. It is also identified that Abf1 is stable a long time at pH over 6,0 but the pH stability of Abf2 is not good. It is also observed that both enzymes do not use any substrate other than pNP a-L arabinofuranosidase.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    300828

    Geobacıllus sp. tarafından termostabil ?-amilaz üretimi

    Thermostable ?-amylase production by Geobacillus sp.

    SENNUR ÇALIŞKAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CUMHUR ÇÖKMÜŞ

  2. Tez No

    474457

    Comparision of two different methods for the determination of residues of tetracycline antibiotics in beef and chicken meat

    Dana ve tavuk etinde tetrasiklin antibiyotiği kalıntılarının tayininde kullanılan iki farklı yöntemin karşılaştırılması

    NİL KOÇ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    Beslenme ve DiyetetikYeditepe Üniversitesi

    Beslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. İSKENDER KARALTI

  3. Tez No

    488145

    Characterisation of immobilised Geobacillus stearothermophilus L-arabinose isomerase

    İmmobilize Geobacillus stearothermophılus L-arabinoz izomeraz'ın karakterizasyonu

    ZEHRA NAZLI KIZILÇAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    BiyokimyaYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEVİL YÜCEL

  4. Tez No

    743137

    Geobacillus stearothermophilus Ah6'dan proteaz üretimi ve optimizasyonu

    Production and optimization of protease from Geobacillus stearothermophilus

    YEŞİM DALİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyoteknolojiAtatürk Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ORHAN ERDOĞAN

  5. Tez No

    388276

    Geobacillus stearothermophilus AH22 suşundan lipaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of lipase enzyme from Geobacillus stearothermophilus AH22 strain

    ARİFE PINAR EKİNCİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaRecep Tayyip Erdoğan Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. BARBAROS DİNÇER

Geri Dön