Ayva polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 35197
- Danışmanlar: Y.DOÇ.DR. AYTEN SARIOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1994
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Trakya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 75
Özet
ÖZET Bu çalışmada ayvadan {Cydonia Oblango) polifenol oksidaz enzimi izole edilmiş ve kısmen sallandırılarak enzimin karakterizasyonu yapılmıştır. Polifenol oksidaz enzimi (E.C. 1.10.3.1) gıdalarda mevcut renksiz polifenolleri kahverengi kinonlara dönüştürerek enzimatik kararmalara neden olmaktadır. Yerel pazarlardan alınantaze Eşme ayvaları polivinilpirolidon ve askorbik asit varlığında 0.2 M fosfat tamponunda blender ile homojenize edildi. Cam pamuğu ve tülbent yardımıyla membran artıklarından ayrıldı. Elde edilen ham ekstrakt (NH4)2S04 ile %67.5 doygunlukta çöktürüldü. Santrifîijlenerek ayrılan çökelek, 0.02M fosfat tamponu ile çözüldükten sonra denature proteinden arındırmak üzere santrifîijlenerek supernatant kısmı alındı. Supernatant çözeltisi 0.02 M fosfat tamponu 3 kez değiştirilmek üzere 36 saat dialize tabi tutuldu. Sallandırma basamaklarının herbirinde Lowry Metoduna göre protein tayini yapıldı. Ayrıca her fraksiyon için polifenol oksidaz aktivitesi tayini spektrofotometrik metod kullanılarak yapılmıştır. Substrat spesifitesi çalışılmış, enzim kateşol ve pirogallolu substrat olarak seçtiği belirlenmiştir. Optimum pH ve optimum sıcaklık çalışmaları yapılmış, optimum pH 8, optimum sıcaklık = 15°C olarak bulunmuştur. Yapılan inhibitor denemesinde tiyoasetamid, KCN, üre, EDTA, Na2S203, askorbik asit, sistein, sitrik asit, Na2HAs04.7H20 'in enzimi farklı oranlarda inhibe ettiği gözlenmiştir. Zamanın enzim aktivitesine etkisini belirlemek amacıyla substrat olarak kateşol kullanılarak 21 gün süreyle aktivite denemeleri yapılmıştır. Aynı substrat için polifenol oksidaz enzime ait K^ ve Vmax sabitleri Km = 3.31 x 10-3 ve Vmax = 0.153 olarak belirlenmiştir. Yapılan sıcaklık çalışması yardımıyla aktivasyon enerjisi -916.502 cal/mol olarak bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
SUMMARY In this study, polyphenol oxidase enzyme was isolated from quince (Cydonia Oblcmgo) and characterised after partiall purification. Polyphenol oxidase enzyme (EC. 1.1 0.3.1) oxidizes the colorless polyphenol to brown quinones and thus is responsible for the darkening of the sliced fruits and vegetables. Fresh quince obtained from local markets were homogenised a with a blender in 0.2 M phosphate buffer containing of polyvinylpyrrolidone (PVP) and ascorbic acid. Membranes were trapped on a fine batiste and glass cotton. The crude extract acquired this way was precipitated with (NH4)2S04 at 67.5% saturation point. After the sediment that separeted with centrifuge solved with 0.02M phosphate buffer, it was centrifuged again to clear from protein and supernatant was obtained. The supernatant solution have been subjected to dialysis for 36 hours after 0.02 M phosphate buffer were altered 3 times. In each purification stage, proteins were assayed by Lowry method and the determination of polypheol oxidase activity for each fraction were made by spectrophotometric method. Specification of substrate was evaluated and the enzyme was described as catechol and pyrogallol substrate. Specific charecterization studies of these enzyme yielded optimum pH of 8 and optimum temperature of 15°C. Enzyme inhibitor determination studies were performed and the following inhibitors were found to inhibit the enzyme at different rates : thioacetamide, potassium cyanide, urea, EDTA, sodiumthiosulphate, ascorbic acid, cycteine, citric acid, NaoHAsC^JHoO. In order to determine the effects of time over the activity of the enzyme, catechol was used as substrate and for 21 day period. Using catechol as substrate, the K^ and Vmax constants were determined as 3.31xl0-3 and 0.153 respectively. The temperature studies, displayed an activation energy of -916.502 cal/mol.
Benzer Tezler
- Ayva polifenol oksidazının çeşitli taşıyıcılara immobilizasyonu ve karakterizasyonları
The Immobilization of polyphenol oxidase of quince in various supports and characterizations
HÜLYA YAĞAR
- Bitkilerden elde edilecek bazı enzimlerin tekstil proseslerinde kullanılması
The textile applications of some enzymes plants
AYŞE USLUOĞLU
- Bazı meyve-sebze ve atıklarının toplam fenolik madde, antioksidan özellikleri ve enzimatik esmerleşme üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigation of the total phenolic content, antioxidant properties and effects of some fruit-vegetables and pulp on enzymatic browning
ZÜHAL ŞAHİN
- Bazı meyve ve sebzelerdeki polifenol oksidaz enzim aktivitesi üzerine ultrason ve ultraviyole ışınlarının inhibisyon etkisinin incelenmesi
Investigation of inhibition effects of ultrasound and ultraviolet light on polyphenol oxidase activation of some fruits and vegetables
CEMAL BİRDAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyokimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HALİS ŞAKİROĞLU
- Biyosensör hazırlamada enzim kaynağı olarak değerlendirilmek üzere bazı bitkisel dokuların incelenmesi
Investigation of some plants tissues about to evaluate as enzyme sources to preparation
ÖZHAN HASANÇEBİ