Geri Dön

Therapeutic monoclonal antibody (IGG) binding properties with tnf-α and fcγ receptor under stress conditions

Terapötik monoklonal antikorun (İGG) stres koşullari altinda tnf-α'ya ve fcγ reseptörüne bağlanma özellikleri

  1. Tez No: 646053
  2. Yazar: GÜLİPEK GÜVEN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ÖZGE CAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 118

Özet

Son yıllarda monoklonal antikorların mekanızmalarının anlaşılması bir çok hastalığın tedavisi için umut olmuştur. Ek olarak teknolojinin her geçen gün gelişmesi ile birlikte terapötiklerin keşfi hız kazanmıştır ve piyasada her geçen payı artmaktadır. Terapötik amaçla kullanılan monoklonal antikorların (mAb) bağlanma özelliklerinin belirlenmesi medikal biyoteknoloji alanında büyük önem taşımaktadır. Çalışmada antikor/antijen ve antikor/reseptör bağlanma davranışları yüzey plazmon rezonansı tekniği ile incelenmiştir. Bu teknik sayesinde, in vitro olarak terapötik ilaçların hedef molekül veya reseptör ile bağlanma kinetik analizleri gerçek zamanlı olarak incelenmiştir. Yapılan çalışma, protein A/G immobilize edilmiş çip yüzeyinde IgG/TNF-α bağlanmasını ve anti histidin antikor ile immobilize edilmiş çip yüzeyinde Fc reseptörlerinin (FcγR) IgG'ye bağlanmasını kapsamaktadır. İlk olarak metodlar optimize edilmiştir, sonrasında mAb'lara kimyasal deamidasyon stresi uygulanarak (pH3 ve pH9, 24 ve 72 saat) bu iki yaklaşım ile Fc bölgesinin bağlanma davranışları incelenmiştir. Sonuç olarak, monoklonal antikorların Fc kısımlarının hedef bölge ile bağlanma kapasitesi stres uygulanmamış örnekler ile karşılaştırıldığında, pH 3 koşullarında azalma gözlemlenirken pH 9 koşullarında ise hafif bir değişime neden olmuştur. Ek olarak, IgG/TNF-α ve IgG/FcγRI bağlanma deneylerinde, nanomolar (E-09) seviyelerinde KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmışken, aynı stress koşullarında FcγRIIIa , daha düşük afinitede (E-06) KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmıştır.

Özet (Çeviri)

Understanding of mechanisms of action of monoclonal antibodies in recent years has been the hope for the treatment of many diseases. In addition, with the development of technology every day, the discovery of therapeutics has gained speed and therapeutics market is increasing in the market. The determination of the binding properties of monoclonal antibodies (mAb) used for therapeutic purposes is of great importance in the field of medical biotechnology. In this study, antibody/antigen and antibody/receptor binding behaviors were examined by surface plasmon resonance technique. Through this technique, binding kinetic analyzes of therapeutic drugs in the in vitro target molecule or receptor were investigated in real time. This study involves IgG/TNF-α binding on the protein A/G immobilized chip surface and binding of Fcγ receptors (FcγR) to IgG on the chip surface immobilized with anti histidine antibody. Firstly, the methods were optimized and then the Fc region's binding behaviors were investigated by applying chemical deamidation stresses to mAbs (pH 3 and pH 9, 24 hour and 72 hour). As a result, the ability of the Fc portions of the monoclonal antibodies to bind with the target site decreased at the pH 3 conditions whereas the pH 9 conditions caused a slight change in the Fc binding compared to the stress-free conditions. In addition, IgG/TNF-α and IgG/FcγRI binding assays, resulting with the KD values of nanomolar levels (E-09) exhibited lower affinity compared to FcγRIIIa experiments which resulted with KD values of (E-06) under the same stress conditions.

Benzer Tezler

  1. Determination of the biological and functional properties of monoclonal antibody in IGG structure developed for pharmaceutical use

    Farmasötik kullanım için geliştirilen IGG yapısındaki monoklonal antikorun biyolojik ve fonksiyonel özelliklerinin belirlenmesi

    ZEYNEP ZÜLFİYE YILDIRIM KELEŞ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyoteknolojiAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi

    Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖZGE CAN

  2. Investigation of engineered anti-vegf antibodies for cancer treatment

    Kanser tedavisi için protein mühendisliği yaklaşımları ile geliştirilmiş anti-vegf antikorlarının araştırılması

    MURAT KARADAĞ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyomühendislikDokuz Eylül Üniversitesi

    Moleküler Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SİNAN GÜVEN

  3. Detecting binding activity of a therapeutic monoclonal antibody targeting vascular endothelial growth factor using surface plasmon resonance

    Vasküler endotelyal büyüme faktörünü hedeleyenterapötik monoklonal antikorun bağlanma aktivitesinin yüzey plazmon rezonans ile belirlenmesi

    SERİM ERDEM

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ABDULHALİM KILIÇ

  4. Assessment of physicochemical quality of monoclonal antibody based drugs at thermal stressand stability conditions

    Monoklonal antikor temelli ilaçların fizikokimyasal kalitesinin termal stres ve stabilite koşullarında değerlendirilmesi

    CEREN PAMUKCU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyoteknolojiAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi

    Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ AHMET EMİN ATİK

  5. Development of a bioanalytical method for rapid and efficient N-glycan analysis of therapeutic proteins by mass spectrometric methods

    Kütle spektrometrik yöntemlerle terapötik proteinlerin hızlı ve etkili N-glikan analizi için biyoanalitik bir yöntemin geliştirilmesi

    ZIDAN MASOUD EMHAMED RAGOUBI

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyokimyaKarabük Üniversitesi

    Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    Assist. Prof. Dr. HACI MEHMET KAYILI

    PROF. DR. BEKİR SALİH