Geri Dön

Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin tavuk yüreğinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

Purification and characterization of glutathione S- transferase enzyme from chicken heart

  1. Tez No: 807478
  2. Yazar: SUAT ZOR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Bingöl Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 67

Özet

Glutatyon S-transferaz enzimi (GST; EC 2.5.1.18) metabolizmada önemli bir antioksidan enzimdir ve glutatyonun toksisite oluşturabilecek birçok metabolitle konjugasyonunu sağlayan reaksiyonlarda görev alır. Bu tez kapsamında, GST enzimi tavuk yüreğinden homojenatın hazırlanması, amonyum sülfat çöktürmesi ve glutatyon-agaroz afinite kromatografisi vasıtasıyla 9,048 EÜ/mg protein spesifik aktivite ve %40 verimle 20,99 kat saflaştırıldı. Daha sonra enzim saflığının kontrol edilmesi ve alt birim molekül kütlesinin belirlenmesi amacıyla sodyum dodesil sülfat poliakrilamit jel elektroforezi (SDS-PAGE) yapılarak tek bant elde edildi. SDS-PAGE ile saflaştırılan GST enziminin alt birim molekül kütlesi yaklaşık 20,94 kDa olarak bulundu. Saflaştırılan GST enzimi için yapılan karakterizasyon çalışmalarında optimum pH, (Tris-HCI tamponunda) pH= 8,5, optimum iyonik şiddet, (Tris-HCI tamponunda) 0,2 M, stabil pH, (Tris-HCI tamponunda) pH = 8,5 ve optimum sıcaklık 60 oC olarak bulundu. Ayrıca Lineweaver-Burk grafiklerinden faydalanılarak enzime ait KM ve Vmax değerleri sırasıyla GSH substratı için KM, 0,087 mM, Vmax 0,625 EÜ/mL; CDNB substratı için KM, 0,798 mM, Vmax, 1,141 EÜ/ mL olarak hesaplandı.

Özet (Çeviri)

Glutathione S-transferase enzyme (GST; EC 2.5.1.18) is an important antioxidant enzyme in metabolism and takes part in reactions that provide conjugation of glutathione with many metabolites that may cause toxicity. Within the scope of this thesis, the GST enzyme, which has 9,048 EU/mg protein specific activity, was purified 20.99-fold with 40% yield by means of preparation of homogenate from chicken heart, ammonium sulfate precipitation and glutathione-agarose affinity chromatography. Then, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was performed to control the enzyme purity and to determine the subunit molecular mass, and a single band was obtained. The subunit molecular mass of the GST enzyme purified by SDS-PAGE was found to be approximately 20.94 kDa. In the characterization studies for the additionally purified GST enzyme, optimum pH (in Tris-HCl buffer) pH= 8.5, optimum ionic strength (in Tris-HCl buffer) 0.2 M, stable pH, (in Tris-HCl buffer) pH = 8, 5 and the optimum temperature is 60 oC; also, using Lineweaver-Burk graphs, the KM and Vmax values of the enzyme were determined as KM, 0.087 mM, Vmax 0.625 EÜ/mL for the GSH substrate; For CDNB substrate, KM was calculated as 0.798 mM, Vmax was calculated as 1.141 EU/mL.

Benzer Tezler

  1. Glutatyon S-transferaz enziminin tavuk karaciğerinden saflaştırılması karakterizasyonu ve bazı pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkisi

    Characterization of glutathion S-transferase enzyme from chicken liver and the effect of some pesticides on enzyme activity

    HAKAN YILMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyokimyaBingöl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  2. Glutatyon-s-transferaz enziminin tavuk eritrositlerinden saflaştrılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of GST from chicken erythrocyte

    DEMET KAVRAYAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    KimyaCelal Bayar Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. TÜLİN AYDEMİR

  3. Purification, characterization and the effect of some drugs on glutathione s-transferase (GST) enzyme from rat erythrocyte

    Glutatyon s-transferaz (GST) enziminin sıçan eritrositlerinden saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkisinin araştırılması

    LUQMAN QADER AHMED KHOSHNAW

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    BiyokimyaBingöl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  4. Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması, bazı karbazol türevlerinin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

    Purification of glutathione S-transferase (GST) enzyme from human erythrocytes, investigation of the effects of some carbazole derivatives on enzyme activity

    FUAT KARTAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MUHAMMET SERHAT ÖZASLAN

  5. Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin japon bıldırcın (Coturnix coturnix japonica) karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of glutathion S-transferase enzyme from quail (Coturnix coturnix japonica) liver

    MEHMET ŞERİF TAYSI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    KimyaBingöl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ YUSUF TEMEL