Farmasötik preparatlarda N-nitrozaminlerin LC-MS/MS ile tayini için yöntem geliştirme ve validasyon: Extractables ve leachables çalışmalarına uygulama
Method development and validation for determination of N-nitrosamines in pharmaceutical preparations by LC-MS/MS: Application to extractables and leachables studies
- Tez No: 843211
- Danışmanlar: PROF. DR. ALPTUĞ ATİLA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: N-nitrozamin, Extractables, Leachables, LC-MS/MS, Farmasötik Preparat, Validasyon, N-nitrosamine, Extractables, Leachables, LC-MS/MS, Pharmaceutical Preparation, Validation
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 149
Özet
Amaç: İlaç endüstrisinde bir ilacın üretim aşamasından başlayıp, raf ömrünün sonuna kadar izlenmesi gereken süreçte ilaca kontamine olabilecek N-nitrozaminlerin analizi için LC-MS/MS yöntemini geliştirip, geliştirilen bu yöntemi valide etmektir. Valide edilmiş olan LC-MS/MS metodu ile Extractables ve Leachables çalışmalarında N-nitrozaminlerin analizlerini yapmaktır. Yöntem: İlaç endüstrisinde sıkça karşılaşılan, literatürde bilinen ve Avrupa Farmakopesi'nde belirlenen toplam 15 adet N-nitrozamin LC-MS/MS sisteminde çalışıldı. Bu çalışmada iç standart olarak N-nitrozo-dimetilamin-d6 (N-DMA-d6) kullanıldı. LC-MS/MS sisteminde iyonlaştırma kaynağı olarak Atmosferik Basınçlı Kimyasal İyonizasyon (APCI) kullanılmıştır. Kromatografik ayrımda sabit faz olarak ters faz C18 kolon, hareketli faz olarak %0.1 formik asit içeren ultra saf su ve %0.1 formik asit içeren metanol karışımı kullanılarak gradient ayrım gerçekleştirildi. Gerçek numunelerde Extractables ve Leachables çalışmaları için çeşitli ekstraksiyon teknikleri kullanılarak LC-MS/MS sisteminde analizleri yapıldı. Bulgular: İç standart yardımıyla 15 adet N-nitrozaminin analizi için LC-MS/MS metot geliştirilip ICH (Validation of Analytical Procedures: Q2(R1))'e göre metot validasyonu yapıldı. Optimize edilen kromatografik ve spektroskopik şartlarda her bir N-nitrozamin ve iç standartın moleküler iyon ve parçalanma iyon pikleri belirlendi. 15 adet N-nitrozaminin sinyal/gürültü (S/N) oranlarına göre gözlenebilme limiti (LOD) ve tayin alt limiti (LOQ) belirlendi. Her bir N-nitrozaminin doğrusal olduğu aralık belirlenerek kalibrasyon eğrileri çizildi. Çalışılan 15 adet N-nitrozamin için gün içi ve günler arası kesinlik, doğruluk, tekrarlanabilirlik, sistem uygunluk ve stabilite analizleri yapılarak geliştirilen LC-MS/MS metodunun uygulanabilir olduğu gösterilmiştir. Sonuç: Farmasötik preparatların ambalaj malzemelerinden ekstrakte olabilecek, yapısında N-nitrozamin oluşumunu tetikleyebilecek amin grupları ihtiva eden, üretim ve ambalajlama esnasında veya sonrasında sızabilecek N-nitrozamin safsızlıkları için uygun ekstraksiyon metotları ile E&L profili belirlendi. Elde edilen ekstraktların analizi için literatürde bilinen ve Avrupa Farmakopesi'nde tanımlanan toplam 15 adet N-nitrozaminin tek enjeksiyonda analizinin LC-MS/MS sistemi ile yapılabilmesi için hassas, hızlı, hassas, tekrarlanabilir ve güvenilir olan yeni ve özgün bir metot geliştirildi. Geliştirilen metot ICH (Validation of Analytical Procedures: Q2(R1))'e uygun olarak valide edildi. Bu yeni metot ile ilaç endüstrisinde son yıllarda büyük önem kazanan Extractables ve Leachables çalışmaları için ihtiyaç duyulan N-nitrozaminlerin analizi güvenilir bir şekilde yapılacaktır.
Özet (Çeviri)
Purpose: Our aim is to develop and validate the LC-MS/MS method for the analysis of N-nitrosamines that may contaminate the drug in the pharmaceutical industry, starting from the production phase of a drug until the end of its shelf life. To analyze N-nitrosamines in Extractables and Leachables studies with the validated LC-MS/MS method. Method: A total of 15 N-nitrosamine LC-MS/MS systems, which are frequently encountered in the pharmaceutical industry, known in the literature and identified in European Pharmacopoeia, were studied. N-nitroso-dimethylamine-d6 (N-DMA-d6) was used as the internal standard in this study. Atmospheric Pressure Chemical Ionization (APCI) was used as the ionization source in the LC-MS/MS system. In chromatographic separation, gradient separation was performed using a reverse phase C18 column as the stationary phase, and a mixture of ultrapure water containing 0.1% formic acid and methanol containing 0.1% formic acid as the mobile phase. Real samples were analyzed in the LC-MS/MS system using various extraction techniques for Extractables and Leachables studies. Findings: LC-MS/MS method was developed for the analysis of 15 N-nitrosamines with the help of internal standard and validated according to ICH (Validation of Analytical Procedures: Q2(R1)) method validation was performed. The molecular ion and fragmentation ion peaks of each N-nitrosamine and internal standard were determined under optimised chromatographic and spectroscopic conditions. For 15 N-nitrosamines, the limit of detection (LOD) and lower limit of quantification (LOQ) were determined according to their signal-to-noise (S/N) ratios. The linear range of each N-nitrosamine was determined and calibration curves were drawn. Intraday and inter-day precision, accuracy, reproducibility, system suitability and stability analyses were performed for 15 N-nitrosamines and the developed LC-MS/MS method was shown to be applicable. Results: The E&L profile was determined by suitable extraction methods for N-nitrosamine impurities that may be extracted from the packaging materials of pharmaceutical preparations, contain amine groups that may trigger the formation of N-nitrosamine, and may leak during or after production and packaging. For the analysis of the extracts obtained, a new and unique method that is sensitive, fast, precise, reproducible and reliable was developed for the analysis of a total of 15 N-nitrosamines known in the literature and defined in the European Pharmacopoeia in a single injection with LC-MS/MS system. The developed method was submitted to ICH (Validation of Analytical Procedures: Q2(R1)) was validated in accordance. With this new method, the analysis of N-nitrosamines needed for Extractables and Leachables studies, which have gained great importance in the pharmaceutical industry in recent years, will be performed reliably.
Benzer Tezler
- Nitrozamin grubu impüritelerin farmasötik preparatlardan kromatografik miktar tayini
Chromatographic determination of nitrosamine impurities from pharmaceutical preparations
İBRAHİM DANİŞ
- Pseudoefedrin hidroklorür içeren farmasötik preparatlarda etken maddelerin kemometrik teknikler kullanılarak spektrofotometrik miktar tayinleri
Başlık çevirisi yok
İ. MURAT PALABIYIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2003
Eczacılık ve FarmakolojiAnkara ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF.DR. FEYYAZ ONUR
- Danazolun farmasötik preparat ve biyolojik materyalden analizi üzerinde çalışmalar
Studies on the analysis of danazol from phramaceutical preparation and biological material
NURTEN KARAŞEN
Doktora
Türkçe
2000
Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEDEF KIR
- Omeprazol içeren farmasötik preparatlarda türevsel UV spektrofotometrisi ile analiz çalışmaları
Derivative UV spectrophotometric analysis of pharmaceutical preparations containing omeprazole
AYŞEGÜL ÇELİK KOÇER
- Vigabatrinin farmasötik preparatlarda ve biyolojik sıvılarda yüksek performanslı sıvı kromatografisi ile analizi
Analysis of vigabatrin in pharmaceutical preparations and biological fluids by high-performance liquid chromatography
SEVİL MÜGE ÇETİN
Doktora
Türkçe
2003
Eczacılık ve Farmakolojiİstanbul ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF.DR. SEDEF ATMACA